Ц20 05 схема: Ц20-05 Инструкция

Содержание

Авометр (тестер) Ц20. Схема, доработки

Авометр (тестер) Ц20. Схема, доработки

категория

Измерительные приборы

материалы в категории

Авометр Ц20 (или как еще их принято называть «тестер» а в простонародье просто «Ц-ешка») довольно неплохой прибор, причем не только в свое время но и даже сейчас! Ведь напряду со всеми недостатками он имеет и свои преимущества, такие как довольно быстрая инерционность стрелки и практическая «неубиваемость»…
Кстати: само название АВОМЕТР это своеобразное сокращение от слов АмперВольтОм-метр

Самый первый прибор автометр Ц20 выглядел вот так

Затем было несколько модификаций, например авометр Ц20-05, выглядел он уже вот так

Вид прибора внутри

Картинка с сайта masteru.org.ua

Схема авометра Ц20

Все бы ничего, но есть пара недостатков:
1* Постоянная необходимость перевтыкать измерительные щупы в разные гнезда.
2* Питание от двух батареек 1,5 Вольта и 4,5.

Правда источник питания в 4,5 Вольта используется только лишь при замерах в мегаОмах, и и ведь иногда и такая необходимость требуется. В принципе можно подцепиться и к внешнему источнику питания, а вот при использовании прибора в «походных» условиях можно немного перехитрить ситуацию- использовать небольшой импульсный преобразователь 1,5-4,5V вот по такой схемке:

Когда кнопочным выключателем ЗВ1 подают напряжение 1,5В на преобразователь, начинает работать генератор, собранный на транзисторах VT1n VT2. Частота колебаний примерно 14кГц, потребляемый генератором ток от источника не превышает 8мА. С обмотки II трансформатора Т1 генератора переменное напряжение подается на выпрямитель, выполненный на диодах VD1n VD2 по схеме удвоения напряжения. Выпрямленное напряжение фильтруется конденсаторами СЗ, С4. Далее следует параметрический стабилизатор напряжения, составленный из транзисторов VT3, VT4 и резисторов R2, R3. Транзисторы включены как аналог стабилитрона, напряжение стабилизации которого можно установить подстроечным резистором R3. Балластным сопротивлением является выходное сопротивление преобразователя. При изменении потребляемого от преобразователя тока до 0,2мА (когда щупы омметра замкнуты) выходное напряжение изменяется не более чем на 0,1В. Обмотки трансформатора размещены в карбонильном броневом сердечнике СБ-23-17а. На каркас сначала наматывают обмотку 1 — 500 витков провода ПЭВ-1 диаметром 0.12 мм с отводом от 100-го витка, считая от верхнего по схеме вывода. Затем ее изолируют бумажной прокладкой, поверх которой наматывают обмотку II — 330 витков такого же провода.

Диоды могут быть любые другие серии Д9. Вместо МП41А подойдет другой транзистор серий МП39-МП42 со статическим коэффициентом передачи тока не менее 50, а вместо КТ315В -другие транзисторы этой серии со статическим коэффициентом передачи тока не менее 30. Налаживание преобразователя сводится к установке подстроечным резистором (при нажатой кнопке выключателя) выходного напряжения около 4,5 В. При этом можно обойтись и без вольтметра, поставив ручку резистора установки нуля омметра примерно в среднее положение, а подстроечным резистором выведя стрелку индикатора на начальную отметку шкалы (при замкнутых щупах). Хотя данный преобразователь разработан специально для авометра. Ц20, использовать его можно и с другими аналогичными измерительными приборами.

 

⚡️Питание тестера от сети 220В

На чтение 2 мин Опубликовано Обновлено

Если сделать сетевой блок питания для ампервольтметра Ц20-05, тогда его можно рационально использовать при ремонте и обслуживании электро и радиооборудования в домашней, лабораторной и цеховой практике, т.е. там, где всегда рядом есть напряжение сети 220 В.

В зависимости от измеряемой величины вместо 9 элементов 316 можно обойтись всего лишь одним (или вообще без него). В этом тестере и ему подобных используется девять элементов питания типа 316. На сегодняшний день элементы питания стоят дорого, и при частом пользовании прибором приходиться чаще производить их замену. А при длительном не пользовании тестером оставленные в нем элементы питания и контакты прибора покрываются налетам карбонатов (выступающих солей).

Согласно паспортным данным, потребляемый прибором ток не превышает 5 мА от источника питания ±6 В. Этим напряжением (от ±5 В и выше) запитывается микросхема тестера D1 КР551УД1А. Создать такое двуполярное напряжение позволит предлагаемый блок питания. Его принципиальная схема изображена на рис.1. Выпрямитель собран на диодах VD1…VD4, включенных по мостовой схеме. Пульсации выпрямленного напряжения сглаживаются электролитическим конденсатором С1 и стабилизатором, выполненном на микросхеме КРЕН8А и стабилитронах VD5, VD6 Последние делят выходное напряжение +12В пополам, и таким образом создается высокостабилизированное питающее напряжение для авометра.

Стабилитроны типа КС162А, номинальное напряжение стабилизации которых Uст = 6,2 В, допустимый разброс ΔU=±0,4 В, ток стабилизации Iст=3…22 мА. Светодиод HL1 служит индикатором включения блока в сеть и подачи питания на тестер. Силовой трансформатор Т1 – самый малогабаритный и маломощный на 1,5-2 Вт. Вторичная обмотка его выполнена проводом ПЭЛШ-0,25. Напряжение на вторичной обмотке 14 В Конструктивно все элементы размещены на печатной плате в корпусе от блока питания вилочного типа.

Корпус можно сделать самодельный 1рис.2). Разъем Х2 типа СШЗ. Розетку СГЗ этого разъема устанавливают на корпусе прибора Ц20-05 и подключают согласно принципиальной схеме (рис.З). Таким образом, ампервольтметр получился с универсальным питанием от батареек, а при их отсутствии – от сети 220 В. Элемент питания 316 (G1) для замера остается в любом случае, если необходимо измерять сопротивления. Если надо измерять только напряжение и силу тока, тогда тестером можно пользоваться вообще без батареек.

ВЗАЙМЫ У «СПЕЦИАЛИСТА» | МОДЕЛИСТ-КОНСТРУКТОР

Идею питать ампервольтомметр Ц20-05 не от батарей, а от электросети (что, конечно же, должно быть весьма удобным для работы, если прибором пользуются стационарно) вряд ли можно назвать новой и оригинальной. Тем более что мысль о ее осуществлении тут же невольно связывается с необходимостью собирать индивидуальный блок с тремя фиксированными напряжениями (+6 В, —6 В и +1,5 В относительно «земли»).

Гораздо привлекательнее видится соответствующее расширение области применения уже имеющегося сетевого блока питания. Например, от ПК «Специалист», приспособив его для обеспечения «безбатарейного» тестера электроэнергией.

Схема такой доработки приведена на иллюстрации. Все вносимые изменения здесь выделены другим цветом. При этом максимально сохранен порядок обозначения элементов базы-оригинала, впервые опубликованного в четвертом номере журнала за 1991 год.

При анализе предлагаемой схемы (а она приведена как работающая в режиме «компьютер») видно, что канал +5 В остался абсолютно неизмененным. Оно и понятно. Ведь при работе с компьютером напряжение на входе ПК из-за потерь в соединениях как раз составляет обычно +5 В. В случае же использования этого блока для питания ампервольтомметра оно уже будет на полвольта выше. Но такое является вполне допустимым, так как согласно прилагаемой к прибору инструкции правильная работа тестера гарантируется, если на него подается питающее напряжение 5,4…6,6 В.

А вот остальные каналы у блока питания «Специалиста» пришлось-таки подвергнуть небольшой доработке. Но они, как это уже подчеркивалось выше, ничуть не повлияли на его основную, заданную изначально разработчиками ПК, функцию.

Среди внесенных изменений, расширивших область применения блока, — установка двухпозиционного переключателя SB1 типа П2К в каналы +12 В и —5 В. В результате появилась возможность обеспечить двухрежимность работы сетевого источника электропитания. В канал +12 В введен также компенсационный стабилизатор, собранный (см. принципиальную электрическую схему) на транзисторе VT2, резисторе R2 и полупроводниковых диодах VD16 —VD18. Для этого удачнее всего подойдут, соответственно, КТ315 с любым буквенным индексом, МЛТ-0,125 и Д9 какой угодно модификации.

Конечно же, в случае необходимости возможна замена каждого из названных элементов на другие, со схожими параметрами. Более того, вместо пяти диодов Д9 (VD14 — VD18) вполне подойдет, например, один-единственный стабистор КС119А. Но тогда в качестве кремниевого полупроводникового триода КТ315 (VT2) надо будет ставить маломощный германиевый транзистор. Скажем, МП37 или МП38.

И еще. Выполненная в ходе доработки блока замена VD14 на КС156А повлекла за собой изменение номинала у резистора R1. Теперь это — сопротивление типа МЛТ-0,125 на 470 Ом.

Наконец, последнее. Не следует забывать, что сетевой источник питания после доработки — двухрежимный. И если переключатель на нем будет находиться в положении «тестер», а не «компьютер» (кстати, неплохо бы эти надписи сделать ярко выделяющимися на корпусе блока у самого SB1), «несанкционированное» подключение ПК грозит крупными неприятностями. Как говорится, вплоть до выхода работяги «Специалиста» из строя.

Д. КРЯЖЕВ,

г. Красноярск

Рекомендуем почитать

  • ЗВУКОВОЙ СИГНАЛИЗАТОР
    Звуковой сигнализатор на цифровых микросхемах включения/выключения электронных устройств с питанием 12 В. В автомобиле немало устройств, которые включаются в работу клавишей или…
  • ГЕРКОНЫ В ТЕЛЕГРАФНОМ КЛЮЧЕ
    Геркон (от слов ГЕРметизированный КОНтакт) является переключателем с пружинными контакт-деталями из ферромагнитного материала, помещенными внутрь вакуумного или наполненного газом (азотом,…

Инструкция ц20-05 — JSFiddle — Code Playground

Editor layout

Classic Columns Bottom results Right results Tabs (columns) Tabs (rows)

Console

Console in the editor (beta)

Clear console on run

General

Line numbers

Wrap lines

Indent with tabs

Code hinting (autocomplete)

(beta)

Indent size:

2 spaces3 spaces4 spaces

Key map:

DefaultSublime TextEMACS

Font size:

DefaultBigBiggerJabba

Behavior

Auto-run code

Only auto-run code that validates

Auto-save code (bumps the version)

Auto-close HTML tags

Auto-close brackets

Live code validation

Highlight matching tags

Boilerplates

Show boilerplates bar less often

Литература по измерениям (ссылки) — Литература и поиск информации

Доброго времени .

Выкладываю большой справочник по приборам .
Что интересует пишите , удачи.

Содержание справочника Измерительная техника. Схемы и описания:

Анализатор спектра АСШ-2, Анализатор спектра АШ-2М, Анализатор спектра С4-25, Анализатор спектра С4-60, Анализатор спектра С4-74, Анализатор спектра С4-8, Анализатор спектра СК4-3, Анализатор спектра СК4-56, Аттенюатор Д2-1, Аттенюатор Д2-16, Аттенюатор Д2-2, Аттенюатор Д2-44, Аттенюатор Д2-45, Аттенюатор Д3-32А, Аттенюатор Д3-33А, Аттенюатор Д3-34А, Аттенюатор Д3-35А, Аттенюатор Д3-36А, Аттенюатор Д4-4, Аттенюатор Д6-1, Аттенюатор Д6-2, Аттенюатор Д8-13, Аттенюатор Д8-16, Блок Я1В-22, Блок Я2М-66, Блок Я2Р-67, Блок Я40-1100, Блок Я40-1102, Блок Я40-1103, Блок Я40-2100, Блок Я40-2700, Блок Я9-44, Блок ЯЗЧ-43, Блок ЯЗЧ-51, Генератор Б-1М, Генератор Г2-1, Генератор Г2-37, Генератор Г2-59, Генератор Г3-102, Генератор Г3-109, Генератор Г3-10А, Генератор Г3-110, Генератор Г3-112, Генератор Г3-112/1, Генератор Г3-117, Генератор Г3-118, Генератор Г3-12, Генератор Г3-120, Генератор Г3-122, Генератор Г3-123, Генератор Г3-14А, Генератор Г3-19А, Генератор Г3-26, Генератор Г3-33, Генератор Г3-34, Генератор Г3-36, Генератор Г3-39, Генератор Г3-41, Генератор Г3-47, Генератор Г3-56/1, Генератор Г3-7А, Генератор Г3-8А, Генератор Г4-102, Генератор Г4-106, Генератор Г4-107, Генератор Г4-116, Генератор Г4-117, Генератор Г4-11А, Генератор Г4-120, Генератор Г4-141, Генератор Г4-153, Генератор Г4-154, Генератор Г4-158, Генератор Г4-18А, Генератор Г4-1А, Генератор Г4-37А, Генератор Г4-44, Генератор Г4-46, Генератор Г4-6, Генератор Г4-68, Генератор Г4-76А, Генератор Г4-78, Генератор Г4-79, Генератор Г4-80, Генератор Г4-81, Генератор Г4-82, Генератор Г4-83, Генератор Г4-9, Генератор Г5-15, Генератор Г5-19, Генератор Г5-22, Генератор Г5-28, Генератор Г5-2А, Генератор Г5-48, Генератор Г5-54, Генератор Г5-56, Генератор Г5-60, Генератор Г5-63, Генератор Г5-6А, Генератор Г5-75, Генератор Г5-79, Генератор Г6-26, Генератор Г6-37, Генератор Г6-8, Генератор ГИ-2А, Генератор ГИП, Генератор ГИП-2М, Генератор ГС-624М, Генератор ГСС-17, Генератор ГСС-30, Генератор ГСС-6А, Генератор ГФ-05, Генератор ГШ-3-2, Генератор И1-11, Генератор И1-12, Генератор И1-15, Генератор МГИ-1, Детектор металла и дерева AR-906, Детектор металла и дерева ARJ-02, Детектор металла и дерева ARJ-03, Детектор металла и дерева ARJ-05, Детектор металла и дерева JDT-03, Измеритель R,L,C BR-2822, Измеритель R,L,C Е12-1, Измеритель R,L,C Е3-3, Измеритель R,L,C Е4-10, Измеритель R,L,C Е7-10, Измеритель R,L,C Е7-11, Измеритель R,L,C Е7-13, Измеритель R,L,C Е7-14, Измеритель R,L,C Е7-15, Измеритель R,L,C Е7-23, Измеритель R,L,C Е7-4, Измеритель R,L,C Е7-8, Измеритель R,L,C Е7-9, Измеритель R,L,C Е9-3, Измеритель АЧХ Х1-19, Измеритель АЧХ Х1-1А, Измеритель АЧХ Х1-27, Измеритель АЧХ Х1-38, Измеритель АЧХ Х1-39, Измеритель АЧХ Х1-43, Измеритель АЧХ Х1-48, Измеритель АЧХ Х1-49, Измеритель АЧХ Х1-50, Измеритель АЧХ Х1-56, Измеритель АЧХ Х1-7, Измеритель Л1-3, Измеритель Л2-1, Измеритель Л2-27, Измеритель Л2-60, Измеритель модуляции С3-2, Измеритель модуляции СК3-39, Измеритель модуляции СК3-45, Измеритель модуляции СК3-46, Измеритель мощности М3-1, Измеритель мощности М3-10, Измеритель мощности М3-3А, Измеритель мощности М3-93, Измеритель нелинейных искажений ИИТИС, Измеритель нелинейных искажений ИНИ-11, Измеритель нелинейных искажений С6-11, Измеритель нелинейных искажений С6-15, Измеритель нелинейных искажений С6-5, Измеритель нелинейных искажений СК6-10, Измеритель параметров ГКЧ-52, Измеритель параметров ГКЧ-61, Измеритель параметров Обзор-103, Измеритель параметров Р1-29, Измеритель параметров Р2-135, Измеритель параметров Р2-58, Измеритель параметров Р33, Измеритель параметров Р-333, Измеритель параметров Р4013, Измеритель параметров Р4023, Измеритель параметров Р4033, Измеритель параметров Р5-10, Измеритель ПОС AR1852B, Измеритель ПОС AR-9214, Измеритель ПОС AR-9238, Измеритель ПОС AR-9245, Измеритель ПОС AR-9250, Измеритель ПОС AR-9263, Измеритель ПОС ARI-101, Измеритель ПОС ART-101, Измеритель ПОС ART-201, Измеритель ПОС ATT-1505, Измеритель ПОС DT-1308, Измеритель ПОС DT-318, Измеритель ПОС DT6236B, Измеритель ПОС АТТ-9501, Измеритель сопротивления MG1000, Измеритель сопротивления MG125, Измеритель сопротивления MG500, Измеритель сопротивления Е6-22, Измеритель сопротивления Е6-24, Измеритель сопротивления Е6-5, Измеритель сопротивления М372, Измеритель сопротивления М416, Измеритель сопротивления Ф4102/1-1М, Измеритель сопротивления Ф4102/2-1М, Измеритель сопротивления Ф4103-М1, Измеритель сопротивления Ф4106, Измеритель сопротивления Ф4106А, Измеритель сопротивления Щ34, Источник питания DM330MVC, Источник питания HY1502(C,D), Источник питания HY1503(C,D), Источник питания HY1505(C,D), Источник питания HY1802(C,D), Источник питания HY1803(C,D), Источник питания HY3010(E,C), Источник питания HY3020(E,C), Источник питания HY3030E, Источник питания HY5005(E), Источник питания HY5010(E), Источник питания HY5020(E), Источник питания Агат, Источник питания Б-20АМ, Источник питания Б-229, Источник питания Б-233, Источник питания Б5-21, Источник питания Б5-43, Источник питания Б5-43А, Источник питания Б5-44, Источник питания Б5-44А, Источник питания Б5-45, Источник питания Б5-45А, Источник питания Б5-46, Источник питания Б5-47, Источник питания Б5-48, Источник питания Б5-49, Источник питания Б5-50, Источник питания Б5-70, Источник питания Б5-71/1М, Источник питания Б5-71/2М, Источник питания Б5-71/4М, Источник питания Б5-8, Источник питания БПТ-50, Источник питания ВС-23, Источник питания ВС-26, Источник питания ВСА-4А, Источник питания ВСА-6А, Источник питания ВЭС-1, Источник питания Гранат, Источник питания ИПС, Источник питания ЛИПС-35, Источник питания УИП-1, Источник питания УИП-2, Калибратор Н4-12, Калибратор Н4-12МС, Калибратор Н4-6, Комбинированный прибор 43101, Комбинированный прибор 43102, Комбинированный прибор 43104, Комбинированный прибор MF-110A, Комбинированный прибор MF-110B, Комбинированный прибор Sunna, Комбинированный прибор UM-Z3, Комбинированный прибор YX-1000A, Комбинированный прибор АВО-5, Комбинированный прибор Герц-Универсал-1, Комбинированный прибор Герц-Универсал-2, Комбинированный прибор Герц-Универсал-3, Комбинированный прибор ИТТ-1, Комбинированный прибор МИ-6, Комбинированный прибор МП-4, Комбинированный прибор МХ001 С, Комбинированный прибор ПР-5 М, Комбинированный прибор ТЛ-4, Комбинированный прибор ТЛ-4 М, Комбинированный прибор ТТ-1, Комбинированный прибор ТТ-2, Комбинированный прибор ТТ-3, Комбинированный прибор УКП, Комбинированный прибор Ф 431/2, Комбинированный прибор Ф 4313, Комбинированный прибор Ф 433/3, Комбинированный прибор Ф 434, Комбинированный прибор Ф4320, Комбинированный прибор Ц20-05, Комбинированный прибор Ц2325, Комбинированный прибор Ц312, Комбинированный прибор Ц315, Комбинированный прибор Ц39, Комбинированный прибор Ц430/1, Комбинированный прибор Ц43102, Комбинированный прибор Ц43102М, Комбинированный прибор Ц43103/2, Комбинированный прибор Ц43109, Комбинированный прибор Ц4311, Комбинированный прибор Ц4312, Комбинированный прибор Ц4313, Комбинированный прибор Ц4314, Комбинированный прибор Ц4315, Комбинированный прибор Ц4317, Комбинированный прибор Ц4317.3, Комбинированный прибор Ц4317М, Комбинированный прибор Ц4323, Комбинированный прибор Ц4323Т, Комбинированный прибор Ц4324, Комбинированный прибор Ц4324Т, Комбинированный прибор Ц4325, Комбинированный прибор Ц4326, Комбинированный прибор Ц4328, Комбинированный прибор Ц433, Комбинированный прибор Ц434, Комбинированный прибор Ц4340, Комбинированный прибор Ц4341, Комбинированный прибор Ц4342, Комбинированный прибор Ц4342-М1, Комбинированный прибор Ц435, Комбинированный прибор Ц4352, Комбинированный прибор Ц4353, Комбинированный прибор Ц4354, Комбинированный прибор Ц4354-М1, Комбинированный прибор Ц4360, Комбинированный прибор Ц437, Комбинированный прибор Ц438, Комбинированный прибор Ц4380, Комбинированный прибор Ц4393, Комбинированный прибор Ц51, Комбинированный прибор Ц52, Комбинированный прибор Ц55, Комбинированный прибор Ц56, Комбинированный прибор Ц57, Комбинированный прибор ЭК4304, Мультиметр CP-07, Мультиметр DCL30DR, Мультиметр DT-362, Мультиметр DT-9702, Мультиметр M2000, Мультиметр M266, Мультиметр M266C, Мультиметр M266F, Мультиметр M830B, Мультиметр M832, Мультиметр M838, Мультиметр NB4000P-4, Мультиметр PC5000, Мультиметр VC88C, Мультиметр VC9808+, Мультиметр А4-2М, Мультиметр В1-13, Мультиметр В1-8, Мультиметр В1-9, Мультиметр В2-29, Мультиметр В2-34, Мультиметр В3-24, Мультиметр В3-38Б, Мультиметр В3-38В, Мультиметр В3-39, Мультиметр В3-4, Мультиметр В3-40, Мультиметр В3-43, Мультиметр В3-44, Мультиметр В3-48, Мультиметр В3-49, Мультиметр В3-5, Мультиметр В3-52/1, Мультиметр В3-55А, Мультиметр В3-57, Мультиметр В3-7, Мультиметр В4-17, Мультиметр В4-2, Мультиметр В6-1, Мультиметр В6-9, Мультиметр В7-15, Мультиметр В7-16, Мультиметр В7-16А, Мультиметр В7-17, Мультиметр В7-20, Мультиметр В7-21, Мультиметр В7-21А, Мультиметр В7-22А, Мультиметр В7-23, Мультиметр В7-26, Мультиметр В7-27, Мультиметр В7-27А, Мультиметр В7-27А/1, Мультиметр В7-30, Мультиметр В7-34ИЭ, Мультиметр В7-34ТО, Мультиметр В7-35, Мультиметр В7-36, Мультиметр В7-37, Мультиметр В7-38, Мультиметр В7-40, Мультиметр В7-40/1, Мультиметр В7-40/2, Мультиметр В7-40/3, Мультиметр В7-40/4, Мультиметр В7-40/5, Мультиметр В7-41, Мультиметр В7-46, Мультиметр В7-46/1, Мультиметр В7-53, Мультиметр В7-53/1, Мультиметр В7-54, Мультиметр В7-62, Мультиметр В7-63/1, Мультиметр В7-65, Мультиметр В7-65/1, Мультиметр В7-65/2, Мультиметр В7-68, Мультиметр В7-68/1, Мультиметр В8-8, Мультиметр ВК7-10А, Мультиметр ВК7-9, Мультиметр ВКС-7Б, Мультиметр ВЛУ-2, Мультиметр ВУ-15, Мультиметр КТ-1, Мультиметр МП-1, Мультиметр РВ7-32, Мультиметр цифровой серии 266, Мультиметр цифровой серии 300, Мультиметр цифровой серии 320, Мультиметр цифровой серии 3211D, Мультиметр цифровой серии 3900, Мультиметр цифровой серии 830, Мультиметр цифровой серии 830D, Мультиметр цифровой серии 832, Мультиметр цифровой серии 838, Мультиметр цифровой серии 890, Мультиметр цифровой серии 90, Мультиметр цифровой серии 93А, Мультиметр цифровой серии 9502, Мультиметр цифровой серии MY61, Мультиметр цифровой серии MY64, Мультиметр цифровой серии MY68, Мультиметр цифровой серии МY62, Мультиметр Щ301, Мультиметр Щ4300, Мультиметр Щ4310, Мультиметр ЭВ 2235, Мультиметр ЭВ2234, Осциллограф C1-15, Осциллограф C1-16, Осциллограф C1-20, Осциллограф C1-30, Осциллограф C1-73, Осциллограф DSO-2150, Осциллограф И1-9, Осциллограф ИО-60, Осциллограф К12-22, Осциллограф Н313, Осциллограф НО41У4.2, Осциллограф С1-104, Осциллограф С1-108, Осциллограф С1-114/1, Осциллограф С1-120, Осциллограф С1-125, Осциллограф С1-127, Осциллограф С1-13, Осциллограф С1-131, Осциллограф С1-137, Осциллограф С1-143, Осциллограф С1-15/3, Осциллограф С1-157/1, Осциллограф С1-159, Осциллограф С1-19, Осциллограф С1-31, Осциллограф С1-48Б, Осциллограф С1-49, Осциллограф С1-5, Осциллограф С1-54, Осциллограф С1-55, Осциллограф С1-57, Осциллограф С1-64, Осциллограф С1-64А, Осциллограф С1-65А, Осциллограф С1-67, Осциллограф С1-68, Осциллограф С1-69, Осциллограф С1-70, Осциллограф С1-70А, Осциллограф С1-71, Осциллограф С1-72, Осциллограф С1-74, Осциллограф С1-75, Осциллограф С1-77, Осциллограф С1-78, Осциллограф С1-81, Осциллограф С1-82, Осциллограф С1-83, Осциллограф С1-85, Осциллограф С1-90, Осциллограф С1-93, Осциллограф С1-97, Осциллограф С7-12, Осциллограф С7-8, Осциллограф С8-13, Осциллограф С9-1, Осциллограф С9-7, Осциллограф ЭО-58, Паяльное оборудование BOFA System 300E, Паяльное оборудование Chip Tool, Паяльное оборудование HAKKO 493, Паяльное оборудование MBT-301E, Паяльное оборудование MBT-350E, Паяльное оборудование PS-90, Паяльное оборудование PS-900, Паяльное оборудование QUCK 204, Паяльное оборудование QUCK 301, Паяльное оборудование QUCK 850 BETTER, Паяльное оборудование QUICK 218, Паяльное оборудование QUICK 854, Паяльное оборудование QUICK 855PG, Паяльное оборудование QUICK 997, Прибор 11ЛО9И, Прибор ADS, Прибор AR-5750A, Прибор AR-851, Прибор AR-875, Прибор AR-940, Прибор BT-12, Прибор DT-8835, Прибор DT-8838, Прибор DT-8839, Прибор TDGC, Прибор TDGC-SOLBY, Прибор TR-0725/S018, Прибор TR-0793, Прибор TR-0841/R080, Прибор TR-0850A, Прибор TR-0895/Q143, Прибор TR-4362/H015, Прибор TR-9189/RT002, Прибор TV17-35, Прибор АЛА, Прибор АМ-9012, Прибор Б-15, Прибор ВЕГА, Прибор ВИТ-1А, Прибор ВИТ-2, Прибор ВК-151М-153М, Прибор ВК42Ц61, Прибор ВК51Ц61, Прибор ГК-210А-2, Прибор ГК-310А-2, Прибор ДП-5А, Прибор ДП-5В, Прибор ЖД А9-1, Прибор ЖД АПК-ТРЦ, Прибор ЖД В7-63, Прибор ЖД ГП-3, Прибор ЖД ГП-4, Прибор ЖД ГПМ-3, Прибор ЖД ИВП-АЛСН-М, Прибор ЖД ИП-ЛК, Прибор ЖД ИСРС-01, Прибор ЖД МПИ-СЦБ, Прибор ЖД РПК-7132, Прибор ЖД УЗК-3, Прибор ЖД УКРУП-1-М, Прибор ЖД ФРЦ4Л, Прибор ИММ-6, Прибор ИМФ-3Р, Прибор ИП-7, Прибор ИПТ-1, Прибор ИРФ-1, Прибор К732/1, Прибор кабельный ИРК-ПРО v. 5.4.2, Прибор кабельный ПКС-АЛ, Прибор ЛТ-2, Прибор МИ-036-61, Прибор МТ-3, Прибор ОВЕН СИ-8, Прибор П-321М, Прибор П6-23М, Прибор ПОИСК-410 Мастер, Прибор ПС-100, Прибор ПСП-2, Прибор СИРИУС-Д, Прибор СТЦ-1, Прибор СЭЦ-100, Прибор СЭЦ-10000, Прибор ТКА-ПКМ, Прибор У3-29, Прибор УВ-100, Прибор УВ-15, Прибор Ф209, Прибор Ф2-1, Прибор Ф214, Прибор Ф215, Прибор Ф216, Прибор Ф217, Прибор Ф218, Прибор Ф2-34, Прибор Ф291, Прибор Ф4-14, Прибор Ф5263, Прибор Ф5303, Прибор Ф738, Прибор Щ00, Прибор Щ01, Прибор Щ02, Прибор ЩП01, Прибор ЩП02, Прибор Э9-9, Прибор ЭВП-2, Прибор ЭД-05М, Прибор ЭМ4305, Частотомер РЧ3-07-0002, Частотомер Ф5080, Частотомер Ф5137, Частотомер Ч3-32, Частотомер Ч3-33, Частотомер Ч3-34, Частотомер Ч3-35, Частотомер Ч3-44, Частотомер Ч3-45, Частотомер Ч3-54, Частотомер Ч3-57, Частотомер Ч3-63, Частотомер Ч3-64, Частотомер Ч3-68, Частотомер Ч3-84, Частотомер Ч7-10, Частотомер Ч7-13, Электроизмерительные клещи Ц4501, Электроизмерительные клещи Ц4505, Электроизмерительные клещи Ц91

Простой карманный » тестер» — Законченные проекты

Специально поместил данную тему в общем разделе, в надежде, что её глянут не только спецы — монтёры , но и те , кто не имеет достаточного опыта в эл. работах.

У меня есть дядя Он живёт в своём доме, ну машина то да сё, работал по жизни монтажником по газу. Он совершенно не электрик , ни разу не чипмэйкер. Но он совершенно правильно представляет два эл. измерения — это прозвонить цепь и измерить напряжение сети. Данный приборчик как раз и предназначен для проведения данных мероприятий. Замыслил я его , когда работал деж. электриком в цехе. Приборчик получился очень удачный, много лет я проработал по цехам , жизнь его потрепала, видно по его внешнему виду , но и сейчас он на сто процентов рабочий и часто мне помогает. Пол бригады его повторили , в то время , но думаю не все живы. (приборы).

Его плюсы. Стрелочный прибор стоит с торца , в то время как у большинства аналогичных приборов, шкала или неоновая лампочка сбоку . Это крайне неудобно, надо или голову двигать для прочтения показаний , либо выворачивать руку с УНН. Приборчик не просто » пробник» — по нему можно довольно точно , измерить как напряжение так и оценить сопротивление цепи ( большие значения). Прибор крайне простой и вполне годится для повторения , было бы желание . » Свысока» на него смотреть не стоит — по удобству выполнения кое каких работ, например в люстре , в патроне , замерить напряжение -тестер его не заменит. В режиме изм. сопротивлений работает батарейка. Её хватает на десяток лет- потребляет очень мало тока.

Недостатки. Нет защиты от забывчивости — если вы работали по прозвонке цепи , а потом начали измерять напряжение и не переключили тумблер , то прибор может » квакнуть». Кстати по этой причине и вышли из строя большинство приборчиков в нашей бригаде. Это , кстати , очень просто исправить- вместо тумблера поставить » микрик» с кнопкой.

Стрелочный прибор от переносного магнитофона, совершенно не дефицит- М476/1. Диоды Д9, Д2,Д223 , любые маломощные. Прибор я разделил на две части , и показал ,как собирать каждую , ну и конечно общая. Мощность резисторов 0,25 вт.Что ещё? Пока так…

POWERTECh3021 — Техническая программа

EDT CEST AWST Aula Magna Sala Goya Зал Пикассо
Sala Velázquez Sala El Greco Sala Sorolla
02:30 — 04:00 08:30 — 10:00 14:30 — 16:00 TS24
Динамика энергосистем и переходные процессы II
TS25
Методы планирования и эксплуатации
TS26
Стабильность частоты III
TS27
Активные распределительные сети II
TS28
Микросетки
04:00 — 04:30 10:00 — 10:30 16:00 — 16:30 Кофе
04:30 — 06:00 10:30 — 12:00 16:30 — 18:00 EP03
Внедрение системы защиты, автоматизации и управления на большой площади применительно к трансграничной передаче
SS04
Устойчивость систем с проникновением возобновляемых источников
TS29
Защита энергосистемы
Ц30
БКП в распределительных сетях
TS31
Одноранговые и локальные рынки
06:00 — 07:30 12:00 — 13:30 18:00 — 19:30 Обед
07:30 — 09:00 13:30 — 15:00 19:30 — 21:00 PL02
Модели энергосистем для реальных проблем
09:00 — 09:30 15:00 — 15:30 21:00 — 21:30 Объявление 2023
Площадка PowerTech
Чай
09:30 — 11:00 15:30 — 17:00 21:30 — 23:00 SS02
Интегрированные распределенные сети
SS07
Технологии цифровизации
TS32
Новые технологии в электроэнергетике II
TS33
Электромагнитные переходные процессы
TS34
Качество и контроль электроэнергии
11:00 — 12:30 17:00 — 18:30 23:00 — 00:30 PS11
Сетевой регламент декарбонизации
PS12
Активные распределительные сети
PS13
Планирование и эксплуатация передачи
PS14
Моделирование и управление II
PS15
Оценка
Экспрессия

c-Jun в ts20 (M) -клетках, стимулированная сывороткой при 328 ° C и 398 ° C….

Контекст 1

… следующий шаг в наших исследованиях, мы проверили, зависит ли деградация c-Jun от активного фермента E1. Как показано на фиг. 7а, клетки Balb / c и ts20 (M) лишались сыворотки на 36 часов. Одна партия была оставлена ​​при разрешающей температуре, а другая была переведена на 398 ° C за 16 ч до стимуляции, чтобы инактивировать фермент ts20 (M) E1 после того, как клетки вошли в состояние покоя. …

Контекст 2

…. из-за возможности восстановления активности E1 в ts20 (M) клетках во время фазового перехода G 0 в S, p53 продолжал накапливаться с постоянной скоростью в течение эксперимента по синхронизации (двукратное увеличение по сравнению с 24 h), хотя и медленнее, чем в первые 16 часов при недопустимой температуре (Рисунок 7B). Экспрессия c-Jun в клетках Balb / c 3T3 была временной при обеих температурах, но значительно и воспроизводимо задерживалась при 398 ° C (рис. 7Ca ± b). …

Контекст 3

…. из-за возможности восстановления активности E1 в ts20 (M) клетках во время фазового перехода G 0 в S, p53 продолжал накапливаться с постоянной скоростью в течение эксперимента по синхронизации (двукратное увеличение по сравнению с 24 h), хотя и медленнее, чем в первые 16 часов при недопустимой температуре (Рисунок 7B). Экспрессия c-Jun в клетках Balb / c 3T3 была временной при обеих температурах, но значительно и воспроизводимо задерживалась при 398 ° C (рис. 7Ca ± b). Это, вероятно, является результатом умеренного уровня активности SAPK / JNK в клетках Balb / c (данные не показаны), поскольку (i) стресс-активируемые протеинкиназы (SAPK) / c-Jun NH 2 -концевая протеинкиназа (JNK) активируются при тепловом шоке (Kyriakis et al., 1994), и (ii) было показано, что активированный SAPK / JNK снижает скорость убиквитинилирования и деградации c-Jun (Fuchs et al., Были проанализированы иммуноблоттингом с использованием моноклонального антитела X77, которое обнаруживает p53, а также неизвестный белок (up ) (Pariat et al., 1997) 1996; Musti et al., 1997). …

Контекст 4

… скорее всего, является результатом умеренного уровня активности SAPK / JNK в клетках Balb / c (данные не показаны), поскольку (i) стресс-активируемые протеинкиназы (SAPK) / c-Jun NH 2 -концевая протеинкиназа (JNK) активируется при тепловом шоке (Kyriakis et al., 1994), и (ii) было показано, что активированный SAPK / JNK снижает скорость убиквитинилирования и деградации c-Jun (Fuchs et al., Были проанализированы иммуноблоттингом с использованием моноклонального антитела X77, которое обнаруживает p53, а также неизвестный белок (up ) (Pariat et al., 1997) 1996; Musti et al., 1997). В клетках ts20 (M) c-Jun временно экспрессировался при 328 ° C (фиг. 7Cc), в то время как при 398 ° C содержание c-Jun достигало плато, которое оставалось стабильным в течение 24 часов (фиг. 7Cd). Это указывает на важную роль E1 в обороте c-Jun в используемых экспериментальных условиях….

Контекст 5

… скорее всего, является результатом умеренного уровня активности SAPK / JNK в клетках Balb / c (данные не показаны), поскольку (i) стресс-активируемые протеинкиназы (SAPK) / c-Jun NH 2 -концевая протеинкиназа (JNK) активируется при тепловом шоке (Kyriakis et al., 1994), и (ii) активированный SAPK / JNK, как было показано, снижает скорость убиквитинилирования и деградации c-Jun (Fuchs et al., al., были проанализированы иммуноблоттингом с использованием моноклонального антитела X77, которое обнаруживает p53, а также неизвестный белок (u.стр.) (Pariat et al., 1997) 1996; Musti et al., 1997). В клетках ts20 (M) c-Jun временно экспрессировался при 328 ° C (фиг. 7Cc), в то время как при 398 ° C содержание c-Jun достигало плато, которое оставалось стабильным в течение 24 часов (фиг. 7Cd). Это указывает на важную роль E1 в обороте c-Jun в используемых экспериментальных условиях. …

Контекст 6

… указывает на важную роль E1 в обороте c-Jun в используемых экспериментальных условиях. В соответствии с этим представлением, базальный уровень c-Jun был выше в ts20 (M) клетках, голодавших в течение 16 часов при 398 ° C, чем в тех же клетках, голодавших при 328 ° C (сравните время 0 на фиг. 7Cc и Cd), несмотря на аналогичные уровни c- МРНК Jun, как проверено анализом Нозерн-блоттинга (сравните время 0 на фиг. 7Da и Db)….

Контекст 7

… указывает на важную роль E1 в обороте c-Jun в используемых экспериментальных условиях. В соответствии с этим представлением, базальный уровень c-Jun был выше в ts20 (M) клетках, голодавших в течение 16 часов при 398 ° C, чем в тех же клетках, голодавших при 328 ° C (сравните время 0 на фиг. 7Cc и Cd), несмотря на аналогичные уровни c- МРНК Jun, как проверено анализом Нозерн-блоттинга (сравните время 0 на фиг. 7Da и Db). …

Контекст 8

… использовали два типа экспериментов для контроля того, что накопление c-Jun в ts20 (M) клетках при 398 ° C не было связано со стимуляцией синтеза c-Jun в результате инактивации E1. Во-первых, добавление циклогексимида к ts20 (M) клеткам через 2 часа после стимуляции привело к быстрому исчезновению c-Jun при 328 ° C (фиг. 7Ce), но не при 398 ° C (фиг. 7Cf). Во-вторых, анализ уровней мРНК c-jun в ts20 (M) клетках в разное время после стимуляции сывороткой при 32 и 398C показал временную экспрессию в обоих случаях. …

Контекст 9

… использовали два типа экспериментов для контроля того, что накопление c-Jun в ts20 (M) клетках при 398 ° C не было связано со стимуляцией синтеза c-Jun в результате инактивации E1. Во-первых, добавление циклогексимида к ts20 (M) клеткам через 2 часа после стимуляции привело к быстрому исчезновению c-Jun при 328 ° C (фиг. 7Ce), но не при 398 ° C (фиг. 7Cf). Во-вторых, анализ уровней мРНК c-jun в ts20 (M) клетках в разное время после стимуляции сывороткой при 32 и 398C показал временную экспрессию в обоих случаях. …

Контекст 10

… анализ уровней мРНК c-jun в ts20 (M) клетках в разное время после стимуляции сывороткой при 32 и 398 ° C показал временную экспрессию в обоих случаях. Однако при 398C мРНК c-Jun сохранялась дольше (рис. 7Da ± b). Тот факт, что уровень белка остается постоянным при 398 ° C в течение как минимум 24 часов после стимуляции, в то время как мРНК в конечном итоге возвращается к базовым уровням через 16 часов после стимуляции, согласуется с идеей о том, что персистентность белка c-Jun происходит из-за стабилизации, когда активность E1 заблокирован….

Мотоциклы Wayne’s Triumph:

Одна из самых сложных задач для любого реставратора — это правильная шнуровка и регулировка ступиц, спиц и ободов колес. Многие реставраторы считают это утомительным и чрезмерно сложным процессом, поэтому они предпочитают передать работу другим людям, которые могут более квалифицированно справиться с этой задачей.

Leroy Turner — одно из исключений в этом отношении. Хотя ему эта работа, мягко говоря, утомительна, он почти всегда шнурует и подправляет колеса на своих реставрациях, потому что таким образом он знает, что они сделаны правильно.

Лерой признает, что иногда требуется несколько часов, чтобы получить нужное колесо, но для него чувство выполненной задачи, если все сделано правильно, стоит затраченных усилий.

В этой публикации мы не пытаемся предоставить подробную информацию о том, как настоящие кружева и настоящие колеса. Подробную информацию об этом можно найти во многих других источниках, в том числе в отличных статьях, опубликованных за эти годы в «Vintage Bike», отличном ежеквартальном журнале Международной ассоциации владельцев Triumph.(Вы можете подписаться на Vintage bike, искать прошлые выпуски по темам, которые могут вас заинтересовать, и покупать старые выпуски журнала на vintagebikemagazine.com.)

Мы попросили Лероя дать нам несколько советов по шнуровке, которые он обнаружил за многие годы, и вот несколько интересных:

№1. Сделайте много снимков колеса перед разборкой или возьмите другое колесо с правильной зашнуровкой для справки. После разборки трудно вспомнить, как изначально было зашнуровано колесо.Лерой говорит, что очень легко запутаться, особенно если вы выполняете эту задачу не один или два раза в год, как он. Убедитесь, что вы измерили смещение перед разборкой … в дальнейшем это значительно упростит вашу работу.

# 2 Перед хромированием убедитесь, что ваши диски прямые. Катите ободок по прямой поверхности, например, по стеклянной столешнице. Они должны катиться прямо и верно. Сделайте то же самое после того, как они будут хромированы, на всякий случай. Лерой говорит, что в месте сварки обода можно заметить небольшой сбой, но если он небольшой, это не должно быть проблемой.

Вы больше не можете покупать новые диски Dunlop, но Devon делает точные версии оригинальных Dunlop, за исключением того, что товарный знак показывает «Devon», а не «Dunlop». У нас есть диски Devon на некоторых из наших восстановленных райдеров Triumph. Для Triumphs, представленных в нашей коллекции, мы всегда используем диски Dunlop. Но Devon действительно хорошо сделаны и красивы, и хотя они довольно дорогие, они отлично работают с нашими более хорошими гоночными машинами.

# 3 Убедитесь, что товарный знак Dunlop обращен в правильную сторону.Мы заметили, что на машинах оригинальной заводской сборки товарный знак на переднем колесе всегда направлен вправо … на сторону тормоза. Так что, если велосипед стоит на боковой подставке, вы сможете прочитать товарный знак Dunlop с правой стороны.

Мы отметили, что товарный знак заднего колеса не всегда направлен вправо на оригинальных машинах. Что касается задних колесных дисков, вам необходимо убедиться, что шток клапана находится перед ближайшим отверстием для блокировки колеса в ободе, даже если товарный знак может быть обращен в другую сторону.Тогда его можно будет правильно зашнуровать, как это было с завода.

По другой проблеме, мы сообщали в этом блоге, что иногда нам попадались передние диски Jones на Triumphs. Сначала мы предположили, что это были замены на вторичном рынке, но несколько человек отметили, что Triumph действительно иногда использовал диски Jones, а не Dunlop, во время сборки. Мы подтвердили этот факт, и мотоциклы, на которых мы наблюдали это большую часть времени, являются гоночными мотоциклами с объемом двигателя 500 куб. См. Но, несомненно, были и другие модели, которые поставлялись с ободами Jones с завода.

# 4 Если вы хотите выполнить правильную реставрацию, вам нужно следить за тем, чтобы спицы, которые вы используете, были такими же, как на оригинальном велосипеде. На многих реставрациях спицы имеют достаточно хорошую форму, чтобы их можно было использовать повторно. Разумеется, спицы необходимо заменить, а ниппели должны быть в хорошем состоянии или быть заменены. При повторном использовании спиц в хорошей форме проблем не возникает, если они правильно покрыты металлом и правильно зашнурованы.

Лерой заметил, однако, что многие спицы вторичного рынка, особенно более дешевые, не имеют той же формы, что и оригиналы.Они будут работать, но они просто не похожи на оригиналы. Большинство наблюдателей не заметят разницы, но когда мы оцениваем качество реставрации, спицы — это первое, на что мы смотрим. Если они не похожи на оригиналы, качество восстановления остальной части мотоцикла вызывает у нас подозрение. Обратите внимание: мы считаем, что правильные спицы из нержавеющей стали вполне приемлемы.

Leroy почти всегда использует спицы из нержавеющей стали Бьюкенена для реставраций, требующих новых спиц.На Bonneville ’65, который он ремонтирует для нас прямо сейчас, старые спицы просто не годились для использования, поэтому мы купили нержавеющую сталь Buchanan для велосипеда. Они точно такой же формы, что и оригинальные спицы, и, хотя они стоят на несколько долларов больше, они того стоят.

Для спиц и ниппелей из нержавеющей стали компания Buchanan поставляет специальную смазку, которую необходимо использовать, как показано на этом рисунке.

# 5 Убедитесь, что вы стачиваете концы спиц достаточно глубоко, чтобы они не могли проткнуть трубку после сборки колеса, как показано ниже.

# 6 Шнуровка Triumphs ’65 и более ранних версий выполняется с использованием правильных спиц «шляпка гвоздя», в то время как ’66 и более поздние модели используют спицы крючкового типа. Спицы шляпки гвоздя могут легко выпасть из обода во время сборки, но Лерой нашел оригинальный способ предотвратить это. Он использует тройники для гольфа, чтобы удерживать головы на месте во время сборки, как показано на этом рисунке.

Вот последовательные фотографии процесса шнуровки и коррекции, которые Лерой выполнил на нашем Bonneville ’65 …




Далее… Сборка двигателя…

% PDF-1.5 % 1 0 объект > эндобдж 3 0 obj > эндобдж 2 0 obj > эндобдж 4 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 5 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Группа 91 0 р / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 6 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 7 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Группа 102 0 р / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 8 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 9 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 10 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 11 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 12 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 13 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 14 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Группа 121 0 р / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 15 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 16 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 17 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 18 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Группа 129 0 руб. / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 19 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 20 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 21 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 22 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 23 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 612 792] / TrimBox [0 0 612 792] / Повернуть 0 >> эндобдж 24 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 25 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 26 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 27 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 28 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 29 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 30 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 31 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 32 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 33 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 34 0 объект > / XObject> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Группа 167 0 руб. / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 35 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 36 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 37 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 38 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 39 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 40 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 41 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 42 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 43 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 44 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 45 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 46 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 47 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 48 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 49 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 50 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 51 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 52 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 53 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 54 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 55 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 56 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 57 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 58 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 59 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 60 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 61 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 62 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 63 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 64 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 65 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 66 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 67 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841,89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 68 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 69 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 70 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.276 841.89] / TrimBox [0 0 595.276 841.89] / Повернуть 0 >> эндобдж 71 0 объект > / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Родитель 2 0 R / MediaBox [0 0 595.HYTIiDJy3M + \ zoqrn! 57qT

13, Eamont Road, Stockton-on-tees, Cleveland, TS20 1DG — Цены на дома — Детали адреса

8a, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG 03 февраля 2005 г. 85 000 фунтов стерлингов Посмотреть детали
9, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG 17 декабря 2007 г. 70 000 фунтов стерлингов Посмотреть детали
10, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG 17 октября 2014 £ 96 500 Посмотреть детали
11, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG 17 марта 2005 г. 38 478 фунтов стерлингов Посмотреть детали
12, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG 12 июля 1996 26 000 фунтов стерлингов Посмотреть детали
14, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG Посмотреть детали
15, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG Посмотреть детали
16, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG Посмотреть детали
17, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG 05 октября 2018 85 000 фунтов стерлингов Посмотреть детали
18, Eamont Road, Stockton-on-tees, Кливленд, TS20 1DG 28 октября 2016 £ 72 600 Посмотреть детали

Дома на продажу и в аренду, TS20 1PE, Station Road, Norton West Stockton-on-tees

Цены на дом в TS20 1PE, Station Road, Norton West

Недвижимость в TS20 1PE имеет среднюю стоимость дома £ 148 900.00 и совершил 5 сделок с недвижимостью за последние 3 года. самый дорогой объект недвижимости был продан за 180 000,00 фунтов стерлингов .
Этот почтовый индекс: 35 домашних хозяйств TS20 1PE — это почтовый индекс на Station Road , расположенный по соседству с Norton West , район Stockton-on-Tees Town , Stockton-on-Tees .

Цена собственности, уплаченная в TS20 1PE, Station Road по годам

Средняя цена проданной недвижимости по годам составила:

Год Средняя цена продажи % Изменение по сравнению с предыдущим годом Продано Недвижимости
2020 161 000 фунтов стерлингов.00

35%

2 объекта
2019 105 000,00 фунтов стерлингов

-51%

1 Недвижимость
2018 £ 158 750,00

3%

2 объекта
2017 £ 153 666,00

17%

3 Недвижимости
2016 128 000,00 фунтов стерлингов

-25%

1 Недвижимость
2015 160 000 фунтов стерлингов.00

7%

1 Недвижимость
2014 £ 148 500,00 2 объекта
2011 £ 178 500,00 1 Недвижимость
2009 108 500,00 фунтов стерлингов

9%

2 объекта
2008 98 500,00 фунтов стерлингов

-65%

2 объекта
2007 162 500 фунтов стерлингов.00

28%

1 Недвижимость
2006 £ 117 500,00

0%

1 Недвижимость
2005 £ 117 125,00

23%

4 Недвижимости
2004 £ 89 975,00

32%

2 объекта
2003 61 000,00 фунтов стерлингов

4%

4 Недвижимости
2002 58 333 фунтов стерлингов.00

27%

3 Недвижимости
2001 42 750,00 £

-11%

6 Недвижимости
2000 47 375,00 £

18%

4 Недвижимости
1999 38 750,00 £

23%

2 объекта
1998 29 700,00 фунтов стерлингов 2 объекта
1996 32 665 фунтов стерлингов.00 3 Недвижимости
Источник: Земельный кадастр

Цена на каждый тип недвижимости в TS20 1PE, Station Road

Здесь вы можете найти исторические данные о проданных ценах, чтобы облегчить поиск недвижимости.

Средняя оплачиваемая цена за отдельные типы недвижимости за последние три года составляет:

Тип недвижимости Средняя цена продажи Продано Недвижимости
Таунхаус 141 125 фунтов стерлингов.00 4 рядных дома
Таунхаус 180 000,00 фунтов стерлингов 1 Таунхаус
Источник: Земельный кадастр

Переоценка ингибирования теломеразы квадруплексными лигандами и их механизмов действия

Де Циан и др. 10.1073 / pnas.0707365104XXYYYYY103.

Вспомогательная информация

Файлы в этом дополнении к данным:
SI Текст
SI Рисунок 7
SI Рисунок 8
SI Рисунок 9
SI Рисунок 10
SI Рисунок 11

SI Рисунок 7

Рис.7 . Ингибирование протокола амплификации теломерных повторов лигандами G-квадруплекса на экстрактах клеток A431. ( Right ) теломеразная активность 400, 200, 100 и 0 нг экстрактов клеток A431 CHAPS с использованием включения [ 32 P] a-dCTP в анализ TRAP. ( Left ) Анализ TRAP проводили с 200 нг экстрактов и различных концентраций соединения: () соответствует последовательным 5-кратным разведениям соединения, начиная с 800 нМ до 1,3 нМ для теломестатина и лиганда Phen-DC3 и от 20 мМ до 32 нМ для 307A.Серийные разведения исходных растворов лиганда были сделаны в 50% ДМСО для PhenDC3, 307A и в 10% метаноле: 10% ДМСО для теломестатина; C — конечные концентрации растворителя, использованного для разведения, начиная с 10´ исходных растворов. Лиганд добавляли во время или () после стадии элонгации теломеразы (в течение 30 мин при 30 ° C) для исследования влияния лиганда на амплификацию ПЦР (30 с при 90 ° C, 30 с при 50 ° C и 90 с при 72 ° C, 28 циклов) последовательностей, склонных к теломерному G-квадруплексу. Продукты были разрешены на 7.5% денатурирующая СТРАНИЦА. ITAS соответствует амплификации ПЦР TSNT (36 мер).

SI Рис. 8

Рис. 8. Схемы для удлинения праймеров Telo3R, TS и Telo4R и возможности образования G-квадруплекса. ( A ) Праймер Telo3R, содержащий три блока G, теоретически способен образовывать межмолекулярную структуру (би- или тетрамолекулярную) до удлинения теломеразы. После двух транслокаций возможно образование первого внутримолекулярного G-квадруплекса. ( B ) Праймер TS не способен образовывать какой-либо G-квадруплекс до элонгации теломеразы.После добавления AGGGTTAG присутствие первого блока G может позволить образование тетрамолекулярных G-квадруплексов. Дальнейшие добавления приведут к множеству возможностей укладки G-квадруплексов, которые могут быть индуцированы присутствием лиганда. Первый внутримолекулярный G-квадруплекс, вероятно, встречается только при числе повторов n = 5. ( C ) Сворачивание Telo4R во внутримолекулярный G-квадруплекс возможно до любого удлинения теломеразой. Могут быть обнаружены и другие структуры, но обычно при этих концентрациях предпочтительна внутримолекулярная укладка.Однако в присутствии лиганда эта структура может стабилизироваться.

SI Рис. 9

Рис. 9. Влияние лиганда на процессивность теломеразы. Количественная оценка экспериментов прямого анализа с использованием праймера Telo3R, показанного на фиг. 3, плюс два других независимых эксперимента для теломестатина, Phen-DC3 и 360A. Активность каждого продукта удлинения n , прекращающаяся после первого G, была количественно определена и нормализована к общему количеству включенного G, таким образом давая количество продукта, имеющего n повторов.Суммирование этих количеств для каждого добавленного повтора n дает общее количество произведенных продуктов. Отношения R n продукта, содержащего n повторов, по сравнению с общим количеством образованных продуктов нанесены на график в логарифмической шкале 10 , соответственно, для теломестатина ( A ), Phen-DC3 ( B ). ), 360A ( C ), BRACO19 ( D ) и TMPyP4 ( E ). Для n > 3 данные соответствовали модели: (см. Экспериментальные процедуры), которая позволила нам определить среднюю процессивность X для каждой концентрации лиганда.

SI Рис. 10

Рис. 10. Влияние лиганда на вероятность теломеразы удлинить праймер TS. Способность теломеразы удлиняться после добавления n повторов, P n , была выведена из количественной оценки прямого анализа с праймером TS путем построения отношения, соответствующего сумме продуктов, имеющих n + 1 повторов. деленное на сумму продуктов, имеющих n повторов, для теломестатина ( A ), Phen-DC3 ( B ).Планки погрешностей соответствуют стандартному отклонению двух независимых экспериментов.

SI Рис. 11

Рис. 11. Влияние концентрации праймера на ингибирование теломеразы. Прямые анализы на теломеразу проводили с 35 нМ или 2 мМ праймеров Telo3R, Telo4R или TS в присутствии или в отсутствие 4 мМ теломестатина или Phen-DC3 (+). M, маркер размера праймеров Telo3R, Telo4R или TS 3 ‘, радиоактивно меченных [ 32 P] a-ddATP; LC, радиоактивно меченный контроль загрузки (5′-dT 12 -3 ‘) добавляли перед очисткой продуктов элонгации.Образцы разделяли на 12% денатурирующем ПААГ.

SI Текст

Олигонуклеотиды и соединения. Олигонуклеотиды pu27Myc (5′-TGGGGAGGGTGGGGAGGGTGGGGAAGG-3 ‘), ACX (5’GCGCGGCTTACCCTTACCCTTACCCTAACC-3′), NTTATT (5′-ATC’GCTTCTCGGCCT (5′-ATC’GCTTCTCGGCCT) (5′-ATC’GCTTCTCGGCCT) (5′-ATC’GCTTCGGCCT) (5’-ATC’GCTTCGGCCT) — (TTAGGG) 3-3 ‘), Telo4R (5’ — (TTAGGG) 4-3 ‘) и TSNT (5′-ATTCCGTCGAGCAGAGTTAAAAGGCCGAGAAGCGAT-3’) были синтезированы Eurogentec (Seraing, Бельгия). TS, Telo3R и Telo4R очищали на геле в соответствии со стандартными протоколами.Соединения 360A, 307A (противоион I ) и BRACO-19 (1) были любезно подарены П. Майе (Sanofi-Aventis, Витри / Сена, Франция). Синтез Phen-DC3 (противоион CF 3 SO 3 ) был описан ранее (2). Эти соединения хранили при 2 мМ в ДМСО и разбавляли 50% ДМСО. TMPyP4 (противоион p CH 3 (C 6 H 4 ) SO 3 , Calbiochem, San Diego, CA) солюбилизировали и разбавляли бидистиллированной водой.Описано выделение и очистка теломестатина (3). Теломестатин хранили при 5 или 1 мМ при -20 ° C в темноте в 50% ДМСО / 50% МеОН, а дальнейшие разведения проводили либо в 10% МеОН / 10% ДМСО (для экспериментов TRAP), либо в 50% ДМСО / 50. % MeOH (для прямых аналитических экспериментов). Для всех соединений разведения проводились непосредственно перед серией экспериментов. Структура всех протестированных лигандов представлена ​​на фиг. 1 B .

Протокол амплификации теломерных повторов. Реакцию TRAP проводили в две стадии.( i ) Элонгация: олигонуклеотид TS (0,4 мМ) был удлинен теломеразой, присутствующей в 2 нг экстракта CHAPS из клеток HEK 293T, которые временно сверхэкспрессируют теломеразную РНК человека (hTR) и обратную транскриптазу теломеразы человека (hTERT) (4). Буфер содержал 20 мМ Трис · HCl (pH 8,3), 63 мМ KCl, 1,5 мМ MgCl 2, 1 мМ EGTA, 0,005% Tween 20 и 0,1 мг / мл BSA, с добавлением 50 мМ dTTP, dGTP и dATP, 5 мМ dCTP и 0,02 мКи / мл (1 Ки = 37 ГБк) 32 Pa-dCTP. Раствор смешивали на льду с G-квадруплексным лигандом, контрольным разбавителем или водой (для образцов без лиганда во время элонгации).Элонгацию проводили в течение 15 мин при 30 ° C до конечного объема 40 мл. Реакцию останавливали нагреванием образцов в течение 2 мин при 90 ° C и мгновенным охлаждением на льду. ( ii ) Амплификация: Смесь для стадии амплификации готовили на льду, добавляя ко всем образцам 5 мл 10´ смеси для ПЦР, содержащей олигонуклеотиды ACX (4 мМ), NT (4 мМ) и TSNT (200 фМ), и 0,2 единиц / мл полимеразы Taq в 2´ буфере TRAP, содержащем 40 мМ Трис · HCl (pH 8,3), 126 мМ KCl, 3 мМ MgCl2, 2 мМ EGTA и 0.01% Tween 20. В образцы, в которых удлинение происходило в присутствии лиганда, добавляли дополнительно 1 мл 10´ раствора, и образцы дополняли водой до достижения конечного объема 50 мл. В образцы без лиганда во время элонгации добавляли 5 мл 10´ раствора лиганда непосредственно перед ПЦР. Для амплификации было выполнено 28 циклов ПЦР (94 ° C в течение 30 секунд, 56 ° C в течение 30 секунд и 72 ° C в течение 90 секунд). Затем продукты удлинения теломеразы анализировали денатурированием 7,5% PAGE в 7 M мочевине и 1´ TBE.Гели сушили в вакууме, экспонировали на экране PhosphorImager и сканировали с помощью аппарата Typhoon (Amersham Pharmacia Biosciences, Пискатауэй, штат Нью-Джерси). Продукты удлинения были количественно определены с помощью программного обеспечения ImageQuant 5.2 и нормализованы по сигналу продуктов удлинения в контрольном растворителе.

Прямой анализ. Реакции проводили при 30 ° C в течение 45 мин в конечном объеме 20 мл, содержащем 50 мМ Трис · HCl (pH 8,0), 50 мМ KCl, 1 мМ MgCl2, 1 мМ 2-меркаптоэтанол, 1 мМ спермидин, 35 нМ (или 2 мМ) олигонуклеотид Telo3R, Telo4R или TS, 20 мКи 32 Pa-dGTP (3000 Ки / ммоль), 2 мМ dGTP (эквивалент 20 мКи [ 32 P] a-dGTP при 750 Ки / ммоль), 40 мМ dATP, 80 мМ dTTP и 2 мг экстракта CHAPS из клеток HEK 293T, временно экспрессирующих hTR и hTERT (4).Образцы готовили на льду в присутствии 2 мл 10´ раствора лиганда или 10´ соответствующего растворителя для контроля. После инкубации при 30 ° C образцы мгновенно охлаждали на льду и непосредственно осаждали ДНК путем смешивания 10 мл раствора, содержащего 7,5 М ацетата аммония, 20 мг гликогена (Invitrogen, Carlsbad, CA), 0,2 пмоль радиоактивно меченного dT . 12 олигонуклеотид (в качестве контроля нагрузки для преципитации) и 120 мл абсолютного этанола. Гранулы один раз промывали 70% этанолом и после сушки на воздухе добавляли 1 мл 200 мМ олигонуклеотида pu27Myc, образующего G-квадруплекс, чтобы конкурировать с лигандами G-квадруплекс за связывание с добавлением теломерных повторов; это было особенно важно для теломестатина и TMPyP4 (5).Наконец, добавляли 10 мл 90% формамида, 0,02% ксиленцианола и 0,02% бромфенолового синего, и после нагревания в течение 2 минут при 90 ° C 5 мл загружали в 12% денатурирующий PAGE (TBE 1´, 7 M мочевина). Гели фиксировали в 10% уксусной кислоте в течение 5 минут для уменьшения фона, сушили в вакууме, экспонировали на экране PhosphorImager и сканировали с использованием аппарата Typhoon. Общую активность продуктов удлинения в присутствии лиганда количественно определяли с помощью программного обеспечения ImageQuant 5.2 и нормализовали по сигналу продуктов удлинения с помощью контрольного растворителя.

1. Гован С.М., Харрисон Дж. Р., Паттерсон Л., Валенти М., Рид М. А., Нейдл С., Келланд Л. Р. (2002) Mol Pharmacol 61: 1154-1162.

2. Де Киан А., ДеЛемос Е., Мергни Дж. Л., Теулад-Фишу М. П., Моншо Д. (2007) J Am Chem Soc 129: 1856-1857.

3. Шин-я К., Вежба К., Мацуо К., Отани Т., Ямада Ю., Фурихата К., Хаякава И., Сето Х. (2001) J Am Chem Soc 123: 1262-1263.

4. Cristofari G, Lingner J (2006) EMBO J 25: 565-574.

5.Gomez D, O’Donohue MF, Wenner T., Douarre C, Macadre J, Koebel P, Giraud-Panis MJ, Kaplan H, Kolkes, A., Shin-ya K, et al. (2006) Cancer Res 66: 6908-6912.

6. Чен Дж. Л., Greider CW (2003) EMBO J 22: 304-314.

7. Ван Ф., Поделл Э. Р., Зауг А. Дж.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *