Кс630А характеристики: КС630А металл, Стабилитрон кремниевый, сплавной 130В, СЗТП

relerel — А2, БА2

Назначение. Реле предназначены для включения резервного питания в случае аварии питающей линии.

Некоторые конструктивные особенности. Реле А2-220 — штепсельные, предназначены для установки на стативах и в релейных шкафах. Реле БА2-220  — нештепсельные, с ламелями под пайку, предназначены для установки в релейных блоках.
Предусмотрена избирательность реле с целью исключения ошибочной установки реле одного типа вместо другого. Коды избирательности реле приведены на рис. 11. Конструкция реле А2, БА2 аналогична описанной ранее конструкции реле 02 и Б02. Отличается реле параметрами контактной системы, схемой включения и обмоточными данными.

Электрическая схема включения реле приведена на рис. 12. В корпусе реле установлены два выпрямителя УД1, УД2 типа КД-205Б УФЗ.362.004 ТУ и стабилитрон УДЗ типа КС630А аАО.336.545 ТУ.
Установленный ресурс должен быть не менее 105 циклов.

Электрические характеристики реле А-220, БА-220:
Сопротивление обмотки постоянному току. Ом 2800± 10%
Напряжение питания, В 220± 10%
Напряжение срабатывания, не более, В 190
Напряжение отпускания, не менее, В 133
Клеммы подключения питания реле 3—83

Контактная система содержит четыре переключающих контакта (4 фт), выполненных из материала СрКд 86-14.
Расположение контактов реле А2 и БА2 приведено на рис. 12.
Замкнутые контакты не должны размыкаться независимо от того, возбуждено реле или не возбуждено, при вибрации реле с частотой синусоидальных колебаний от 10 до 50 Гц и ускорением 0,2 g в вертикальном направлении по отношению к нормальному положению реле.
Условия эксплуатации. Реле изготовляют для эксплуатации при температуре окружающего воздуха от +50°С до -45’С, влажности до 100% при температуре +25*С.
Габаритные размеры реле приведены на рис. рис. 11; масса реле не более 1,1 кг
 

Миниатюрный импульсный сетевой блок питания 5В 0,5А

Этот блок может быть использован для питания электронных часов, микрокалькулятора, электронного термометра, другой маломощной радиоэлектронной аппаратуры (рис. 5.3).

Основные технические характеристики:

Переменное напряжение источника питания, В………………………….220 ±15%;

Максимальная мощность нагрузки, Вт……………………………………….3;

Частота преобразования, кГц…………………………………………………35;

Коэффициент полезного действия, %……………………………………….75;

Удельная мощность, Вт/дм3 …………………………………………………..115.

Основным узлом блока является так называемый полумостовой преобразователь напряжения, выполненный на транзисторах VT1, VT2 и трансформаторе Т1. Напряжение питающей сети выпрямляется диодным мостом VD1. Стабилитроны VD3…VD5 и резистор R1, включенные параметрическим стабилизатором, вместе с конденсаторами С2…С4 образуют делитель выпрямленного напряжения. Светодиод VD2 служит индикатором включения источника питания. Напряжение на симметричном стабилитроне VD3 используется для питания задающего генератора. Резистор R1, входящий как балластный в параметрический стабилизатор, обеспечивает напряжение вольтодобавки на конденсаторе С8.

В случае короткого замыкания на выходе этот резистор ограничивает ток, потребляемый блоком питания от сети. Кроме этого, он и конденсатор С1 образуют фильтр, подавляющий высокочастотные помехи, создаваемые преобразователем. Задающий генератор собран на операционном усилителе DA1 по схеме мультивибратора. Его особенность — использование для питания однополярного напряжения, снимаемого со стабилитрона VD3, что снижает общее число элементов блока.

Гальваническую развязку генератора и высоковольтного транзистора VT1 по постоянному току обеспечивает конденсатор Сб. Необычен и способ управления транзистором VT2. Его открывает ток, протекающий через резистор R9 тогда, когда закрыт транзистор VT1.

В момент открывания транзистора VT1 к эмиттерно-му переходу транзистора VT2 прикладывается обратное напряжение, вызывающее эффективное рассасывание неосновных носителей в базе, что приводит к его закрыванию без появления сквозного тока. Диод VD11 ограничивает обратное напряжение на эмиттерном переходе транзистора VT2, не препятствуя току через первичную обмотку трансформатора Т1 и открытый транзистор VT1. Такое построение этого узла преобразователя позволяет исключить сквозной ток через транзисторы и не требует приме-нения трансформатора в цепи управления. Закрывание транзистора VT1 приводит к открыванию транзистора VT2 также без появления сквозного тока. Транзисторы VT1, VT2 работают в облегченном режиме, что обеспечивает повышенную надежность блока питания.

Трансформатор Т1 намотан на кольце типоразмера К12х8хЗ из феррита 2000НМ. Первичная обмотка содержит 500 витков провода ПЭВ-2-0,15; вторичная, рассчитанная на выходное напряжение 5 В, — 50 витков провода ПЭВ-2-0,31, с отводом от середины. Стабилитрон КС162А можно заменить на КС156А. Транзисторы могут быть КТ604Б или КТ605Б, но тогда стабилитроны КС630А придется заменить на КС620А. В этом случае КПД блока несколько ухудшится. Налаживание блока питания сводится к подборке резисторов R1 и R9 под конкретное значение мощности нагрузки.

Резистор R9 выбирают из условия насыщения транзистора VT2, что определяют с помощью осциллографа. Сопротивление резистора R1 должно быть таким, чтобы при номинальной нагрузке и напряжении питающей сети 220 В через стабилитроны VD4, VD5 протекал ток не менее 5 мА. Для снижения пульсаций выходного напряжения емкость конденсаторов СЗ и С4 надо увеличить в 2…3 раза. Кроме того, уровень пульсаций можно дополнительно снизить путем подключения параллельно конденсатору С7 оксидного конденсатора емкостью 50…100 мкФ на номинальное напряжение 10 В.

BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P GEAR Смена передач Продукты силовой передачи roycepainter.site

BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P GEAR, GEAR BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P, купите BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P GEAR: изменение шестерни — ✓ БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА возможна при соответствующих покупках, вторичный рынок Не беспокойтесь, ваши любимые товары здесь, купите официальный сайт онлайн здесь! X630A-2A-82 I / P GEAR BOSTON 28308 roycepainter.сайт.

BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P ШЕСТЕРНЯ

BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P GEAR: Промышленное и научное. Купить BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P GEAR: Change Gears — ✓ Возможна БЕСПЛАТНАЯ ДОСТАВКА для соответствующих критериям покупок. BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P ШЕСТЕРНЯ。。。

BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P ШЕСТЕРНЯ

80B11-1 1/8 Boston GearSTEEL ЗВЕЗДА, диаметр отверстия 22 мм и 7/8 NBK MJC-65-EGR-22-7 / 8 Установочный винт гибкой муфты кулачков Тип Алюминий A2017, наружный диаметр 300 мм, ширина 60 мм, W33, масляная канавка URB 23944 MC3W33 Обработанный латунный сепаратор для сферических роликоподшипников, внутренний диаметр 220 мм.Латунный сепаратор, ширина 115 мм. BAR 234415M.SP, наружный диаметр 115 мм, двухсторонний угловой контакт, особая точность, внутренний диаметр 75 мм, Barden Bearings, 234415M.SP, упорный шарикоподшипник. H-1000, 1,875 дюйма, с прямым отверстием, KW 2SS, открытое воздушное соединение / пружинный выжимной вал, установленный на валу Nexen 810011-810011 Однодисковое сцепление. S862BR-112K-M1 Бостон РЕДУКТОР СКОРОСТИ ВЕРТИКАЛЬНОЙ ЧЕРВЫ, Внутренний диаметр: 6X10 мм Передача мощности Новая гибкая губчатая муфта соединительного вала 4 мм 5 мм 6 мм 6,35 мм 8 мм 9 мм 9,5 мм 10 мм 11 мм 12 мм D30 L40. Boston Gear STEEL SPROCKET 40B24-5 ​​/ 8, VXB Brand Japan MJC-40-EBL От 7/16 дюймов до 14 мм Гибкая муфта кулачкового типа Диаметр отверстия 2: 14 мм Длина муфты 66 Внешний диаметр муфты: 40, Новая муфта C40B16 Browning, PIX 1765х250 H Стандартный трапециевидный ремень ГРМ 1-1 / 2 X 176-1 / 2 T353.

BOSTON 28308 X630A-2A-82 I / P ШЕСТЕРНЯ

T1023126 — 1.500.004 | Мерсен

MULTIVERT® NH соответствуют всем функциям предохранительных выключателей-разъединителей NH. Они предназначены для установки на сборные шины в трехполюсной схеме.Выключатели-разъединители с двумя вертикальными предохранителями MULTIVERT®
предназначены для установки на шинных системах диаметром 185 мм.
Доступные конструкции: MULTIVERT® 800A (2 x 400A и MULTIVERT® 1260A (2x 630A). Они предназначены для плавких вставок NH в соответствии с IEC / EN 60269-2, VDE 0636-2, размер 2: 400A и размер 3. : 630A.
Система представляет собой модульную систему, которая позволяет установку отдельных компонентов.MULTIVERT® предлагает пользователю возможность быстрой и простой установки, а также высокую степень защиты во время установки и обслуживания.

• NH-выключатель-разъединитель с двумя вертикальными предохранителями, размер 2, 800 A (2 x 400 A)
• NH-вертикальный выключатель-разъединитель с двумя вертикальными предохранителями, размер 3, 1260 A (2 x 630 A)
• Для вставок NH-предохранителей в соответствии с IEC / EN 60 269-2, VDE 0636-2
• Установка на шинную систему 185 мм
• Подходит для верхних / нижних кабельных клемм
• Трехполюсное и однополюсное переключение
• Многополюсная заделка кабеля — исполнение с 3 или 4 кабели / полюс
• Безопасное подключение / отключение нагрузки в соответствии с IEC 60947-3

MULTIVERT® NH соответствуют всем функциям предохранительных выключателей-разъединителей NH.Они предназначены для установки на сборные шины в трехполюсной схеме. Выключатели-разъединители с двумя вертикальными предохранителями MULTIVERT®
предназначены для установки на шинных системах диаметром 185 мм.
Доступные конструкции: MULTIVERT® 800A (2 x 400A и MULTIVERT® 1260A (2x 630A). Они предназначены для плавких вставок NH в соответствии с IEC / EN 60269-2, VDE 0636-2, размер 2: 400A и размер 3. : 630A.
Система представляет собой модульную систему, которая позволяет установку отдельных компонентов.MULTIVERT® предлагает пользователю возможность быстрой и простой установки, а также высокую степень защиты во время установки и обслуживания.

% PDF-1.4 % 2425 0 объект > эндобдж xref 2425 73 0000000016 00000 н. 0000001815 00000 н. 0000002016 00000 н. 0000002074 00000 н. 0000002107 00000 н. 0000002164 00000 п. 0000003244 00000 н. 0000003475 00000 н. 0000003562 00000 н. 0000003653 00000 п. 0000003743 00000 н. 0000003870 00000 н. 0000003927 00000 н. 0000004051 00000 н. 0000004108 00000 п. 0000004228 00000 п. 0000004285 00000 н. 0000004426 00000 н. 0000004483 00000 н. 0000004614 00000 н. 0000004671 00000 п. 0000004795 00000 н. 0000004852 00000 н. 0000004989 00000 н. 0000005045 00000 н. 0000005207 00000 н. 0000005263 00000 п. 0000005429 00000 п. 0000005485 00000 н. 0000005621 00000 п. 0000005677 00000 н. 0000005795 00000 н. 0000005851 00000 п. 0000005979 00000 п. 0000006035 00000 н. 0000006158 00000 н. 0000006214 00000 н. 0000006334 00000 н. 0000006390 00000 н. 0000006514 00000 н. 0000006570 00000 н. 0000006685 00000 н. 0000006741 00000 н. 0000006905 00000 н. 0000006961 00000 п. 0000007068 00000 н. 0000007124 00000 н. 0000007179 00000 н. 0000007234 00000 н. 0000007409 00000 н. 0000007433 00000 н. 0000008813 00000 н. 0000008837 00000 н. 0000010038 00000 п. 0000010062 00000 п. 0000011274 00000 п. 0000011298 00000 п. mZYY $ J V & i) 0 \ 2E- j ؇ NV-> ~ a sr9

ПАРАЛЛЕЛЬНОЕ ПОДКЛЮЧЕНИЕ ПРЕДОХРАНИТЕЛЕЙ

Предохранители для защиты полупроводников ПАРАЛЛЕЛЬНО ПОДКЛЮЧЕНИЕ OF ПРЕДОХРАНИТЕЛЯ — ССЫЛКИ для увеличения номинального тока предохранителей, плавкие вставки можно подключать параллельно парами P50U… или четыре P50T06 при соблюдении следующих условий: Предохранители для параллельного включения должны быть одинакового типа и номинального тока с макс. 5% разница постоянного тока. падение напряжения. Подходящие комбинации выбираются производителем на основании заказа на поставку. Предохранители подключаются к клеммам пар или четырех плавких вставок, габаритные чертежи которых показаны в этой главе. Пример: 4 предохранителя подключены параллельно I 2 t для выбранного тока 50 000 A 2 с. I 2 t комплекта:: 50 000 x 4 2 = 800 000 A 2 с Параметры Клеммы для пар плавких вставок, включенных параллельно I n [A] Тип Код продукта Параметры комплектов: Значения потерь мощности являются приблизительными равной сумме значений потерь мощности отдельных предохранителей.Время / токовая характеристика комплекта идентична вре- менно-токовой характеристике отдельного предохранителя. Значения ожидаемого тока необходимо умножить на количество параллельно подключенных предохранителей. Значения I 2 t набора равны произведению I 2 t отдельного предохранителя и квадрата количества параллельных предохранителей. I n [A] Тип Изделие I Всего 2 т Вес Код упаковки [A 2 с] [кг] [шт] 2×200 P50T06 2x200A AR 18279 104 000 0,700 1 2×250 P50T06 2x250A AR 18280 204 000 0,700 1 P50T06 2×315 P50T06 2x315A AR 11208420 000 0.700 1 2×350 P50T06 2x350A aR 18281 520 000 0,700 1 2×400 P50T06 2x400A aR 10526 680 000 0,700 1 2×250 P50U06 2x250A aR 14800 114 000 1.200 1 2×315 P50U06 2x315A aR 14

Seite wurde nicht gefunden. — Nusswahn

Akzeptieren

Печенье Nur essenzielle akzeptieren

Individualuelle Datenschutzeinstellungen

Hier finden Sie eine Übersicht über alle verwendeten Cookies.Sie können Ihre Einwilligung zu ganzen Kategorien geben oder sich weitere Informationen anzeigen lassen und so nur bestimmte Cookies auswählen.

Корреляция экспрессии EGFR, количества копий гена и клинико-патологического статуса в NSCLC Академическая исследовательская работа по «Биологическим наукам»

ИССЛЕДОВАНИЯ Открытый доступ

Корреляция экспрессии EGFR, количества копий гена и клинико-патологического статуса в NSCLC

Рания Габер1’2,41, Ирис Ватерманн1,3,4 * 1, Кристиан Куглер3,4, Нильс Рейнмут4,4, Рудольф М. Хубер5,6, Филипп А. Шнабель7,8, Эккехард Фоллмер1,4, Мартин Рек3,4 и Торстен Гольдманн1,4

ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ ПАТОЛОГИЯ

Аннотация

Предпосылки: Терапия, направленная на рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), в настоящее время имеет большое значение для лечения рака легких.По этой причине, в дополнение к мутационному анализу, иммуногистохимия (ИГХ) EGFR при раке легкого обсуждалась для принятия решения о соответствующих терапевтических стратегиях. Цель этого исследования состояла в том, чтобы получить стандартизацию методов экспрессии EGFR для отбора пациентов, которым может быть полезна терапия, нацеленная на EGFR.

Методы: В качестве отправной точки широкого исследования, направленного на выяснение экспрессии EGFR на разных биологических уровнях, четыре EGFR-специфических антитела были проанализированы на предмет потенциальных различий в уровнях экспрессии с помощью иммуногистохимии (IHC) и коррелированы с флуоресцентной гибридизацией in situ (FISH ) анализ и клинико-патологические данные.206 опухолевых тканей были проанализированы в формате тканевого микрочипа с использованием иммуногистохимии с четырьмя различными антителами, включая набор Dako PharmDx (клон 2-18C9), клон 31G7, клон 2.1EI и клон SP84 с использованием трех различных методов оценки. Экспрессию белка сравнивали с FISH с использованием двух разных зондов.

Результаты: экспрессия белка EGFR, определенная ИГХ с использованием набора Dako PharmDx, клона 31G7 и клона 2.1E1 (p <0,05), достоверно коррелировала с обоими зондами FISH независимо от трех методов оценки; Наилучшая корреляция показана для 31G7 с использованием метода оценки, который определял положительность EGFR, когда> 10% опухолевых клеток показывают мембранное окрашивание средней и тяжелой интенсивности (p = 0.001).

Заключение. В целом, наши данные показывают различия в экспрессии EGFR, определенные с помощью ИГХ, из-за примененного антитела. Наибольшее соответствие с FISH показано для клона антитела 31G7, оцененного с помощью балла B (p = 0,001). По этой причине этот клон антитела можно использовать для стандартной оценки экспрессии EGFR с помощью IHC.

Виртуальные слайды: виртуальные слайды для этой статьи можно найти здесь: http://www.diagnosticpathology.diagnomx.eu/vs/ 13000_2014_165.

Ключевые слова: немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ), рецептор эпидермального фактора роста (EGFR), иммуногистохимия, флуоресценция in situ гибридизация, клоны антител

Фон

Согласно данным ВОЗ, опубликованным в декабре 2013 года, рак легкого является ведущей причиной смерти от рака в мире. На немелкоклеточный рак легкого (НМРЛ) приходится около 85% всех случаев рака легких [1]. Несмотря на терапевтические достижения, общая 5-летняя выживаемость составляет всего

* Переписка: [email protected] tEqualcontributors

1 Клиническая и экспериментальная патология, Исследовательский центр Борстель, Parkallee 3, 23845 Борстель, Германия

3 Центр пульмонологии и торакальной хирургии, Lungenclinic Grosshansdorf,

Wöhrendamm 80, 22927 Гроссхансдорф, Германия

Полный список информации об авторах доступен в конце статьи

Bio Med Central

15% [2].EGFR представляет собой рецептор тирозинкиназы клеточной поверхности, обильно экспрессируемый на всех эпителиальных и стромальных клетках [3]. Экспрессия EGFR нарушена в различных солидных опухолях и коррелирует с прогрессированием заболевания и плохой выживаемостью [4]. У 34–84% пациентов с НМРЛ также обнаруживается сверхэкспрессия EGFR; Предполагается, что повышенная экспрессия EGFR имеет прогностическое значение, а также имеет потенциальную прогностическую значимость [5]. Высокое число копий гена EGFR обнаруживается почти у 60% пациентов [6].Основываясь на его центральной роли в росте клеточной опухоли, EGFR предназначен в качестве предпочтительной лекарственной мишени для разработки специфических методов лечения против НМРЛ [7]. Много EGFR

© 2014 Gaber et al .; лицензиат BioMed Central Ltd. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0), которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальная работа должным образом указана.Отказ Creative Commons Public Domain Dedication (http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/) распространяется на данные, представленные в этой статье, если не указано иное.

специфических терапевтических средств были разработаны и протестированы в клинических испытаниях; включая специфические антитела, такие как цетуксимаб и нецитумумаб, а также низкомолекулярные ингибиторы тирозинкиназы (TKI), такие как эрлотиниб, афатиниб и гефитиниб [8]. Выявление пациентов, которым могут быть полезны эти селективные препараты, представляет огромный интерес.Хотя таргетные методы лечения EGFR были одобрены, не существует единого мнения относительно оценки паттернов экспрессии EGFR при NSCLC. Как показано в исследовании FLEX (лечение первой линии для пациентов с расширенным НМРЛ, экспрессирующим EGFR), высокие H-показатели EGFR могут прогнозировать улучшение выживаемости для цетуксимаба в сочетании с химиотерапией первой линии у пациентов с распространенным НМРЛ [9]. В связи с прогностической ролью EGFR и важности определения статуса экспрессии EGFR, а также идентификации мутаций EGFR для выбора индивидуальной терапии для пациентов с раком легкого, оценка карциномы легкого требует оптимальной характеристики клинических разделов в рутинной гистопатологии. .Таким образом, очень важно определить конкретный статус EGFR для выявления пациентов для соответствующего лечения. С продолжающимся прогрессом в создании EGFR-специфических терапевтических средств, патологи должны использовать стандартизированные протоколы для определенных антител, используемых для иммуногистохимического обнаружения экспрессии EGFR, а также согласованные системы оценки. До сих пор определение статуса EGFR выполнялось с помощью иммуногистохимии на залитых парафином образцах опухолей для отбора пациентов, подходящих для лечения, специфичного для EGFR.Однако этот метод сильно зависит от выбора первого антитела и применяемого метода оценки [10]. Поскольку отсутствуют данные об оптимальном выборе антител, используемых для диагностических подходов, мы сравнили четыре коммерчески доступных EGFR-специфических антитела и три разные системы оценки относительно их различий в иммуногистохимической оценке, чтобы понять, какой вариант лучше всего подходит для определения экспрессии EGFR. при НМРЛ.

Существуют противоречивые данные о взаимосвязи между экспрессией EGFR на уровне белка и ответом на терапию, специфичную для EGFR [11].Тем не менее, увеличенное число копий гена EGFR недавно было предложено в качестве предиктора направленной терапии против EGFR у пациентов с раком легкого [6]. Оценка статуса гена EGFR с помощью FISH деликатна: вариации гена EGFR в опухолевых клетках являются очаговыми, а низкие уровни амплификации EGFR трудно визуализировать. В качестве начала исследования, направленного на выявление расширенных коллективов пациентов, которым лечение TKI может быть полезно в дополнение к пациентам, несущим активирующие мутации, мы оценили основанные на IHC методы для оптимизации обнаружения экспрессии EGFR на уровне белка с использованием различных процедур фиксации.Во-первых, мы проанализировали иммуногистохимию и FISH в фиксированных формалином и залитых парафином тканях (FFPE). FISH-анализ выполнен

путем применения двух разных зондов для оценки статуса гена EGFR. Данные коррелировали с экспрессией EGFR на уровне белка, определенном IHC, чтобы выяснить прогностическую ценность экспрессии EGFR на уровне белка и статусе амплификации гена. Данные IHC и FISH-анализа коррелировали с клинико-патологическими данными, чтобы выяснить, может ли IHC быть методом выбора, возможно, в сочетании с FISH-анализом.Таким образом, целями этих исследований были, прежде всего, исследование различных антител и систем оценки в иммуногистохимии и сравнение двух различных зондов FISH. Во-вторых, выяснить, коррелирует ли IHC эффективно с FISH-анализом. Чтобы оценить значимость определений EGFR, были проанализированы ткани 206 пациентов с раком легкого, включая их клинические данные.

Методы

Данные пациента и ткани

Для создания блоков тканевого микрочипа (ТМА) после резекции из хирургического отделения LungenClinic Grosshansdorf была получена коллекция из 206 образцов хирургической резекции опухоли легкого с НМРЛ (Таблица 1).Ретроспективное исследование включало 100 случаев аденокарциномы (ADC), 86 случаев плоскоклеточного рака (SCC), 12 случаев крупноклеточного рака (LCC), 6 случаев карциноидной опухоли и 2 случая аденосквамозной карциномы. Все образцы опухолей были гистологически классифицированы в соответствии с Международной мультидисциплинарной классификацией аденокарциномы легких, 2011 г. [12] и рекомендациями ВОЗ 2010 г. [13], Международной ассоциации по изучению рака легких / Американского торакального общества / Европейского респираторного общества.Фиксированные в формалине блоки, залитые парафином, были собраны из Архива клинической и экспериментальной патологии Исследовательского центра Борстель, Германия.

Заявление о соблюдении этических норм

Это исследование было выполнено в соответствии с этическим комитетом Любекского университета (номер ссылки 12-220).

Построение тканевых микрочипов

Для построения ТМА были взяты репрезентативные штампы опухоли (2 мм в диаметре) после характеризации с помощью окрашивания гематоксилином и эозином (H&E), как описано ранее [14].Две основные биопсии из двух различных жизнеспособных частей каждого образца опухоли были перенесены с использованием ручного устройства для обработки Beecher (Beecher instruments, Alpha, Metrix Biotech), чтобы улучшить репрезентативность при анализе экспрессии EGFR. В качестве положительного контроля использовали залитые в парафин клетки A549.

Таблица 1 Характеристики 206 пациентов с немелкоклеточным раком легкого

Категория Подкатегория Результаты (%)

Возраст> 65 128 (62.1)

<65 78 (37,9)

Пол Мужской 132 (64)

Женский 74 (36)

* Курящий статус Текущий 78 (37.9)

Бывшая 30 (14,6)

Никогда 12 (5,8)

* Контакт по асбесту Присутствует 17 (8)

Отсутствует 49 (24)

* Наличие ХОБЛ 43 (21)

Отсутствует 5 (2)

Гистологический тип ADC 100 (48.6)

SCC 86 (41,7)

LCC 12 (5,8)

Другое 8 (3.9)

Подтипы ADC Преобладающие ацинары 38 (18,4)

Твердые преобладающие 25 (12,1)

Папиллярный преобладающий 22 (10,8)

Преобладающий микропапиллярный 10 (4,9)

Инвазивный муцинозный 3 (1,4)

Лепидик 2 (1)

Скважина 5 (2.4)

Умеренная 82 (39,8)

Плохо 119 (57,8)

Размер опухоли Т1 39 (18,9)

Т2 115 (55,8)

Т3 32 (15,5)

Т4 20 (9,8)

Состояние лимфатических узлов N0 99 (48,1)

№1 49 (23,8)

N2 43 (20.9)

N3 15 (7.3)

I этап 68 (33)

57 (27.m депарафинизированных срезов ТМА с использованием четырех специфических антител к EGFR: Food and Drug

Администрация (FDA) одобрила набор Dako EGFR PharmDx (клон 2-18C9, мышиный моноклональный, предварительно разведенный, DAKO, Corp., Glostrup, Дания), антитело Zymed (клон 31G7, мышиный моноклональный препарат, 1:30, лаборатории Zymed, Сан-Франциско, CA), антитело Zytomed (клон 2.1E1, мышиное моноклональное, 1: 100, Zytomed Systems, Берлин, Германия) и клон антитела SP84 (моноклональное антитело кролика, 1: 100, Spring Bioscience, CA).Первые два клона распознают внеклеточный домен EGFR и мутантную форму EGFR (EGFRvIII) с помощью иммуногистохимического окрашивания [15] и вестерн-блоттинга [16]. Клон антитела 2.1E1 также распознает внеклеточную часть EGFR (Zytomed Information). Напротив, клон антитела SP84 генерируется против синтетического пептида, соответствующего С-концу белка EGFR.

Процедуры окрашивания проводились согласно протоколам производителя.срезы толщиной m, помещенные на положительно заряженные предметные стекла и окрашенные H&E, а также всеми специфическими антителами к EGFR. В каждый цикл иммуноокрашивания включали отдельный раздел отрицательного контроля, в который мы не включали первичное антитело. Для клона 2-18C9 Dako PharmDx был предоставлен контрольный слайд (линия клеток CAMA-1 с уровнем экспрессии 0 и линия клеток HT-29 с уровнем экспрессии 2+), которые были включены в опыты окрашивания IHC. Для Dako PharmDx, 31G7 и 2.1E1 слайды депарафинизировали, гидратировали и извлечение антигена выполняли с помощью протеиназы K.Для SP84 извлечение антигена проводили с 0,1 натрийцитратным буфером, pH 6,0 (Merck KGaA, Дармштадт, Германия), обработанным в микроволновой печи в течение 4 минут с последующим 30-минутным охлаждением при комнатной температуре. Блокирование эндогенной пероксидазы достигалось погружением срезов в 3% h3O2 на 10 минут при комнатной температуре (Dako PharmDx и Merck KGaA, Дармштадт, Германия), затем промыванием в буфере TRIS (10-кратный промывочный буфер для набора Dako PharmDx и 10-кратный промывочный буфер для биосистем Zytomed). в течение 2 минут. Затем срезы инкубировали с различными клонами антитела против EGFR (реагент отрицательного контроля Dako PharmDx и разбавитель антител Zytomed biosystems) в течение одного часа в увлажненных камерах при комнатной температуре.Срезы, окрашенные 31G7 и 2.1E1, инкубировали при комнатной температуре с реагентом Post Block в течение 15 минут перед добавлением полимера HRP в течение 20 минут (Zytomed Systems). Для SP84 HRP инкубировали в течение 20 минут, а для Dako PharmDx (системы Zytomed и меченый Dako полимер HRP) в течение 30 минут соответственно. Срезы трижды промывали в буфере TRIS в течение двух минут после инкубации с каждым реагентом. Набор субстратов DAB (хромоген DAB и субстрат DAB) использовали в течение 15 минут для визуализации связывания антител.В конце было проведено контрастное окрашивание срезов гематоксилином Мейера. Наконец, секции были смонтированы с помощью Pertex (Medite GmbH, Бургдорф, Германия).

Методология оценки EGFR

Образцы оценивали с помощью световой микроскопии (Nikon Eclipse 50i) с малым (xioo) и большим (x200 или x400) увеличением.

Экспрессия EGFR с помощью IHC оценивалась с использованием трех различных методов оценки:

(A) H-балл: значение, примененное в ретроспективном исследовании FLEX [17], представляет собой произведение процента раковых клеток, положительных по белку EGFR на поверхности клетки, на общую интенсивность окрашивания (от 0 до 3+). , производя число от 0 до 300 [9,18].

(B) Экспрессия EGFR определяется как положительная, если> 10% опухолевых клеток при увеличении в 10 и 20 раз демонстрируют мембранное окрашивание только на 2+ и 3+ [6,19,20].

(C) Экспрессия EGFR считается положительной, если> 10% опухолевых клеток демонстрируют мембранное окрашивание любой интенсивности при увеличении x10 и x20, оцениваемом с помощью таблицы данных Dako EGFR PharmDx.

Оценка EGFR IHC была сделана для каждого отдельного ядра двумя независимыми наблюдателями, и среднее значение двух ядер использовалось как результат для экспрессии EGFR в каждом случае.Кроме того, отдельные срезы исходных блоков FFPE окрашивали четырьмя EGFR-специфическими антителами: 1) во всех случаях LCC; карциноидная и аденозно-квамозная карцинома (опухоли с низкой частотой), 2) 12 случаев потери одного из двух ядер в массивах во время IHC, были дополнены окрашиванием целых срезов.

Флуоресценция in situ гибридизация

В исследовании использовались два разных FISH-зонда EGFR / Centromere хромосомы 7 (CEN7, CEP7): смесь зондов Dako Cytomation FISH (DAKO; Дания, A / S) и двухцветный зонд ZytoLight SPEC EGFR / CEN 7 (система Zytomed. , Берлин, Германия).г / мл 4 ‘, 6’-диамидино-2-фенилиндола (DAPI) монтажной среды (Vectashield, Vector Laboratories, Burlingame, CA) и покровные стекла фиксировали лаком для ногтей.

Анализ сигналов FISH выполнен на эпифлуоресцентном микроскопе Nikon Eclipse 80i H550L

(Nikon) с интерференционными фильтрами (AHF Analysentechnik AG, Тюбинген, Германия).

На одно ядро ​​оценивали не менее 50 неперекрывающихся межфазных ядер среднего размера. Отбор ядер производился с использованием фильтра DAPI при большом увеличении (x600).Для каждого зонда количество EGFR и центромеры хромосомы 7 на ядро ​​визуализировали и оценивали с использованием зеленого (FITC) и красного (ET Rhod) фильтров отдельно, а также двойного красного и зеленого фильтров. Красный фильтр использовали для визуализации последовательности EGFR смеси зондов Dakocytomation FISH и центромеры хромосомы 7 двухцветного зонда Zytolight SPEC EGFR / CEN7. В то время как зеленый фильтр использовали для визуализации последовательности EGFR двухцветного зонда Zytolight SPEC EGFR / CEN7 и центромеры хромосомы 7 смеси зондов Dako cyto-mation FISH.

результатов статуса гена EGFR были сгруппированы в соответствии с системой оценки Колорадо, разделенной на шесть основных категорий [21]. 1) дисомия: <2 копии в> 90% клеток, 2) низкая трисомия: <3 копии в> 40% клеток, 3 копии в 10% — 40% клеток,> 4 копии в <10% клеток клетки, 3) высокая трисомия: <3 копии в 40% клеток, 3 копии в> 40% клеток,> 4 копии в <10% клеток, 4) низкая полисомия:> 4 копии в 10% — 40% 5) высокая полисомия:> 4 копии в 40% клеток, 6) амплификация гена: образцы с амплификацией гена EGFR, определяемой как: (a): соотношение гена EGFR к CEP 7> 2, (b): небольшое кластеры генов (4-10 копий) или бесчисленные плотные кластеры генов в> 10% опухолевых клеток, независимо от отношения EGFR к CEP 7, (c): более крупные и яркие сигналы EGFR, чем сигналы CEP 7 в> 10% опухолевых клеток , в то время как сигналы EGFR меньше, чем сигналы CEP 7 в соседних стромальных и реактивных клетках, независимо от соотношения EGFR и CEP 7, (d):> 5 копий сигналов EGFR в> 10% опухолевых клеток независимо от EGFR до Коэффициент CEP 7.Амплификация гена была классифицирована на низкий и высокий уровни в соответствии с соотношением генов к хромосомам в диапазоне от 2,1 до 3 для низкой амплификации и более 3 для высокой амплификации [22-24]. Наконец, пациенты были разделены на FISH-отрицательные по EGFR (дисомия, низкая трисомия, высокая трисомия, низкая полисомия) и EGFR FISH-положительные (высокая полисомия, низкая амплификация, высокая амплификация). Оценка количества копий гена проводилась для каждого ядра в каждом случае, и ядро ​​с наибольшим числом копий использовалось в результате анализа FISH.

Что касается IHC, дополнительные отдельные секции исходных блоков FFPE репрезентативных случаев опухолей с низкой частотой и случаев потери одного из двух ядер по оценке H&E были вырезаны. Область опухоли была выбрана и помечена, и один из FISH-зондов EGFR / CEN 7 был применен к этой области для анализа и сравнения между целым разрезом и ядрами, включенными в массивы.

Статистический анализ

Статистический анализ проводился с использованием SPSS версии 20 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс). Связи между различными переменными были выполнены с использованием критерия хи-квадрат и U-критерия Манна-Манна-Уитни. Тесты были двусторонними. Различия считались статистически значимыми при значениях p <0,05.

Результаты

Характеристики пациента

Из 206 пациентов 100 опухолей (48,6%) были классифицированы как ADC, 86 опухолей (41,7%) были сгруппированы как SCC, 12 опухолей (5,8%) как LCC и 8 опухолей (3,9%) как другие опухоли (4 типичных карциноиды, 2 атипичных карциноида и 2 аденосквамозной карциномы).Базовые характеристики пациентов и клинико-патологический статус представлены в таблице 1. По данным ВОЗ за 2010 г., патологическая стадия TNM была IA у 22 (10,8%), IIA — у 38 (18,4%), IIIA — у 53 (25,7%), IB — у 46. (22,3%), IIB у 19 (9,2%), IIIB у 20 (9,7%) и IV у 8 (3,9%) пациентов. История курения была доступна для 120 пациентов и классифицирована как нынешние, бывшие и никогда не курившие [25]. Контакт с асбестом выясняли, задавая вопросы пациентам.

Возраст пациентов показал статистически значимые различия для стадии и степени опухоли (p = 0.034 и p = 0,009). Из пациентов старше 65 лет у 49 (38,3%) были опухоли I стадии. 65 (54,6%) имели низкодифференцированные опухоли. Пациенты моложе 65 лет, 35 (44,9%) имели опухоль III стадии и 54 (69,2%) имели низкодифференцированные опухоли. Пол пациентов и разные степени опухолей показали значительную разницу в пределах гистологических подтипов: 68 (51,5%) пациентов мужского пола имели SCC и 48 (64,9%) пациентов женского пола имели ADC (p <0,001). Для классов карцином: 66 опухолей (55.5%) и 39 опухолей (32,8%) низкодифференцированных карцином были ADC и SCC соответственно, в то время как 45 опухолей (54,9%) умеренно дифференцированных случаев были SCC (p <0,001).

Значительные различия были обнаружены между подтипами и степенями ADC: 24 (36,4%) опухоли низкодифференцированного ADC были сгруппированы как преобладающие ацинары. 23 опухоли (34,8%) были классифицированы как солидные с преобладанием муцина. 8 случаев (12,1%) относились к папиллярному преобладанию, 8 опухолей (12,1%) были с преобладанием микропапиллярных, 2 опухоли (3%) лепидные и 1 случай (1.5%) инвазивного муцинозного. Курительное поведение было значительно связано с гистологическими подтипами и оценками. 36 пациентов (46,2%) нынешних курильщиков и 18 пациентов (60%) бывших курильщиков имели ПКР; в то время как 8 пациентов (66,7%) из никогда не куривших имели ADC (p = 0,023). 53 SCC (67,9%) были курильщиками. 16 пациентов (53,3%) бывших курильщиков имели низкодифференцированные опухоли, а 6 пациентов (50%) никогда не курили — умеренно дифференцированные опухоли (p = 0,001). Контакт с асбестом в значительной степени был связан со сценой.

10 (55,6%) случаев контакта с асбестом относились к I стадии, а 23 (45,1%) из тех, кто не контактировал с асбестом, относились к стадии III (p = 0,039). Корреляций между клинико-патологическими параметрами не обнаружено.

Сравнение различных EGFR-специфических антител и трех методов оценки

Все полные срезы опухолей с редкой заболеваемостью и 12 случаев потери одного из двух ядер показали те же результаты, что и соответствующие ядра в массивах.Результаты статистической ассоциации четырех различных антител, специфичных к EGFR, и трех различных методов оценки показаны в таблице 2.

Интенсивность иммуноокрашивания EGFR, проведенного с четырьмя различными клонами антител, варьировала как в одном образце опухоли, так и в разных образцах опухоли (рис. 1). Анализ паттернов экспрессии EGFR с использованием 3 методов оценки показал разные результаты для положительности EGFR (рис. 2). Из 206 пациентов, проанализированных с помощью Dako PharmDx и оцененных методом балльной оценки (A), 129 образцов опухолей (62.6%) были признаны положительными. Анализ иммуноокрашивания EGFR Dako PharmDx методом подсчета баллов (B) определил 176 пациентов (85,4%) как положительный, а метод подсчета баллов (C) показал положительное окрашивание EGFR в 184 образцах (89,3%).

Результат применения 31G7 с использованием метода оценки (A) дал 137 EGFR-положительных опухолей (66,5%). В то время как с помощью метода подсчета (B) 176 опухолей (85,4%) и метода подсчета баллов (C) 185 образцов (89,9%) были определены как положительные по EGFR.

Антитело 2.1E1 был наиболее чувствительным антителом: мы получили наибольшее количество EGFR-положительных образцов опухоли, используя этот клон в иммуноокрашивании для всех трех методов оценки. 31G7 и Dako PharmDx показывают одинаковую интенсивность окрашивания независимо от методов оценки, тогда как SP84 показал самую низкую чувствительность. Уменьшение пороговых значений приводит для всех клонов антител к увеличению количества положительных иммуноокрашенных EGFR (рис. 3).

Степень согласия, определенная по шкале (A) между Dako PharmDx по сравнению с 31G7, 2.1E1 и SP84 составили 83,5%, 76,7% и 83% соответственно. Корреляция между 31G7 и 2.1E1 и между 31G7 и SP84 составляет 80,6% и 77,2% соответственно, а между 2.1E1 и SP84 — 68,4%. Для оценки (B) корреляция между Dako PharmDx и 31G7 составила 94,2%, для Dako PharmDx и 2.1E1 — 93,3%, а между Dako PharmDx и SP84 — 86,4%. Согласие между 31G7 и 2.1E1 и 31G7 и SP84 составило 93,3% и 89,3% соответственно, между 2.1E1 и SP84 оно составило 84,4%. Оценка с помощью метода (C) показала степень согласия между Dako PharmDx, 31G7, 2.1E1 и SP84 98,5%, 96,1% и 94,6% соответственно. Между 31G7 и 2.1E1

т ст>

Таблица 2 Экспрессия EGFR, оцененная с помощью Dako PharmDx, 31G7, 2.1E1 и SP84 с использованием трех различных методов оценки; корреляция между четырьмя антителами

31G7 2.1E1 SP84

Положительный Отрицательный Положительный Отрицательный Положительный Отрицательный

Оценка A

DAKO Положительный 116 (56.3%) 13 (6,3%) * 129 (62,6%) 0 (0%) * 103 (50%) 26 (12,6%) *

Всего отрицательных 21 (10,2%) 137 (66,5%) 56 (27,2%) 69 (33,5%) 48 (23,3%) 177 (85,9%) 29 (14,1%) 29 (14,1%) 9 (4,4%) 112 ( 54,4%) 68 (33%) 94 (45,6%)

31G7 Положительный 137 (66,5%) 0 (0%) * 101 (49%) 36 (17,5%) *

Отрицательное всего 40 (19,4%) 177 (85,9%) 29 (14,1%) 29 (14,1%) 11 (5,3%) 112 (54,3%) 58 (28,2%) 94 (45,7%)

2.1E1 Положительный Отрицательный всего 112 (54,3%) 0 (0%) 112 (54.3%) 65 (31,6%) * 29 (14,1%) 94 (45,7%)

Оценка B

DAKO Positive 170 (82,5%) 6 (2,9%) * 175 (85%) 1 (0,4%) * 154 (74,7%) 22 (10,7%) *

Отрицательное всего 6 (2,9%) 176 (85,4%) 24 (11,7%) 30 (14,6%) 13 (6,3%) 188 (94,3%) 17 (8,3%) 18 (8,7%) 6 (2,9%) 160 ( 77,6%) 24 (11,7%) 46 (22,4%)

31G7 Положительный 175 (85%) 1 (0,4%) * 157 (76,2%) 19 (9,2%) *

Отрицательное всего 13 (6,3%) 188 (91,3%) 17 (8,3%) 18 (8,7%) 3 (1.5%) 160 (77,7%) 27 (13,1%) 46 (22,3%)

2.1E1 Положительный Отрицательный всего 158 (76,6%) 2 (1%) 160 (77,6%) 30 (14,6%) * 16 (7,8%) 46 (22,4%)

Оценка C

Положительный результат DAKO 183 (88,8%) 1 (0,5%) * 183 (88,8%) 1 (0,5%) * 177 (85,9%) 7 (3,4%) *

Всего отрицательных 2 (1%) 185 (89,8%) 20 (9,7%) 21 (10,2%) 7 (3,4%) 190 (92,2%) 15 (7,3%) 16 (7,8%) 4 (2,0%) 181 ( 87,9%) 18 (8,7%) 25 (12,1%)

31G7 Положительный 185 (89.8%) 0 (0%) * 178 (86,4%) 7 (3,4%) *

Отрицательное всего 5 (2,4%) 190 (92,2%) 16 (7,8%) 16 (7,8%) 3 (1,5%) 181 (87,9%) 18 (8,7%) 25 (12,1%)

2.1E1 Положительный Отрицательный всего 179 (86,9%) 2 (1%) 181 (87,9%) 11 (5,3%) * 14 (6,8%) 25 (12,1%)

г О

н ст>

* р <0,001.

Рис. 1. Иммуногистохимическое окрашивание EGFR четырьмя различными антителами, показывающее различия в уровнях экспрессии EGFR в одном и том же образце плоскоклеточной карциномы (SSC) (исходное увеличение x 400).(A) Интенсивность окрашивания с Dako PharmDx 2+, (B) Интенсивность окрашивания с помощью 31G7 2+, (C) Интенсивность окрашивания с помощью 2.1E1 3+, (D) Интенсивность окрашивания с SP84 1+.

Рис. 2 Различные случаи аденокарциномы (ADC), показывающие разные результаты с использованием баллов A, B, C (исходное увеличение x 400).

(A) Положительный результат с оценкой C, отрицательный результат с оценкой A и B (интенсивность 1 в 100% опухолевых клеток, H-рейтинг u 200). (B) Положительный результат с оценкой B и C и отрицательный результат по шкале A (опухолевые клетки показывают разную интенсивность: 2 из 40%, 1 из 40% и 0 из 20% по шкале H u 200).(C) и (D) Положительные по всем баллам: C) интенсивность 2 в 100% опухолевых клеток H-оценка = 200, D) интенсивность 3 в 100% опухолевых клеток H-оценка = 300).

Подсчет очков

Рис. 3 Оценка Dako PharmDx, 31G7, 2.1E1 и SP84 с использованием трех различных методов оценки.

в SCC. Экспрессия белка EGFR, оцененная с помощью 31G7, оцененная методом (B), и 2.1E1, оцененная методом (A), показала значительную связь с дифференцировкой опухоли (p = 0.041 и p = 0,029).

Связь между экспрессией EGFR и степенью опухоли была показана, когда оценка проводилась с 31G7 с использованием метода оценки (B) (p = 0,02) и 2.1E1 с использованием метода оценки (A) (p = 0,009) и (C) (p = 0,047). ). Курение коррелирует с экспрессией EGFR при оценке IHC с антителом SP84 с использованием метода подсчета баллов (C) (p = 0,014).

EGFR, определенная с помощью четырех антител, не была связана с возрастом, полом, стадией опухоли и состоянием опухоли или лимфатических узлов.

и SP84 он был определен как 97,6% и 95,1% соответственно, а между 2,1E1 и SP84 он составлял 93,7% (Таблица 2).

Все исследованные клоны антител показали разную степень согласия относительно экспрессии EGFR при анализе с помощью трех различных методов оценки. Для клона антитела Dako PharmDx корреляция между методами оценки (A) и (B) составила 73,3%, между (A) и (C) — 70,1%, а между (B) и (C) — 95,7%. Клон антитела 31G7 показал степень совпадения 77 баллов между методами подсчета (A) и (B).8%, между

(A) и (C) 74,1% и между (B) и (C) 95,1%. Для клона антитела 2.1E1 корреляция между методами оценки (A) и (B) составила 94,1%, между (A) и (C) — 93,2% и 98,9% между методами оценки

(В) и (С). Клон антитела SP84 показал степень соответствия между методами оценки (A) и (B) 70%, между (A) и (C) 61,9% и между методами оценки (B) и (C) 88,4% (Таблица 2 ).

Связь между экспрессией белка EGFR и клинико-патологическими данными

Результаты для четырех специфичных к EGFR антител, полученные иммуноокрашиванием и проанализированные тремя различными методами оценки, различались в пределах гистологических типов NSCLC.

Четыре клона антитела показали разную интенсивность окрашивания и, следовательно, разные паттерны экспрессии EGFR в одном и том же образце, что привело к разным результатам ИГХ (рис. 1).

В зависимости от используемого метода подсчета оценка экспрессии EGFR варьируется. Различные образцы опухолей ADC показывают разные результаты в экспрессии EGFR в соответствии с различными системами оценки (A), (B) и (C) (Рисунок 2).

EGFR, оцененная методом балльной оценки (A), показала для всех четырех антител меньшее количество EGFR-положительных образцов опухоли для всех четырех антител в SCC и ADC, чем при оценке с помощью методов (B) и (C).Данные представлены в таблице 2. Оценка с помощью метода (C) показывает больше EGFR-положительных образцов опухоли в ADC, чем

Флуоресценция EGFR in situ Гибридизация

FISH на количество копий гена EGFR показал точно такие же результаты для обоих зондов (смесь зондов Dako Cytomation FISH и ZytoLight SPEC) (рис. 4). Из 206 образцов опухолей 84 опухоли (40,8%) показали дисомию, 36 опухолей (17,5%) низкую трисомию, 22 образца опухоли (10,7%) высокую трисомию, 22 образца опухоли (10,7%).7%) низкая полисомия, 28 пациентов (13,6%) высокая полисомия, 5 опухолей (2,4%) с низкой амплификацией и 9 пациентов (4,4%) с высокой амплификацией. В целом положительные результаты FISH, включая высокую амплификацию, низкую амплификацию и высокую полисомию, были продемонстрированы в 42 случаях (20,4%).

Связь между количеством копий EGFR и клинико-патологическими данными

FISH-положительность чаще встречалась в ADC, чем в SCC и LCC (23 (11,2%) против 17 (8,3%) против 2 (1%)). Различия не достигли статистической значимости (p = 0.567) (таблица 3). Таким образом, наличие амплификации не коррелировало с гистологическими подтипами.

Но для ADC была обнаружена связь между положительностью FISH и подклассификацией. Положительность EGFR FISH была оценена для 11 (5,4%) опухолей с преобладанием ацинаров, 2 (1%) с преобладанием солидных, 7 (3,4%) с преобладанием папиллярных, 1 (0,5%) с преобладанием микропапиллярных и 2 (1%) ) лепидного подтипа (p = 0,029) (таблица 4).

Распределение паттернов FISH не было связано с возрастом, полом, курением, контактом с асбестом или ХОБЛ, степенью, стадией, размером лимфатических узлов или размером опухоли (Таблица 3).

Связь между экспрессией белка EGFR и номером копии EGFR

Была обнаружена значимая (точный критерий Фишера) связь между положительностью IHC и количеством копий гена EGFR на клетку для всех четырех исследованных клонов антител независимо от применяемого метода оценки, за исключением SP84, проанализированного с оценкой A и B (таблица 5). Dako PharmDx, 31G7 и 2.1E1, оцененные тремя разными

Рис. 4 FISH-анализ с двумя разными EGFR-специфичными FISH-зондами.A, B, C, D: смесь зондов Dako Cytomation FISH (EGFR: красный, CEN7: зеленый), E, ​​F, G, H: двойной зонд ZytoLight SPEC EGFR / CEN7 (EGFR: зеленый, CEN7: красный), (увеличение x 630) A, E: сбалансированная дисомия, B, F: сбалансированная трисомия, C, G: низкое усиление, D, H: высокое усиление.

выявили значительную корреляцию с анализом FISH. Иммуноокрашивание с 31G7, оцененное с помощью метода подсчета баллов B, показало наивысшее соответствие с анализом FISH (таблица 5).

Обсуждение

Персонализированная терапия основана на точном определении, характеристике и количественной оценке соответствующих молекул-мишеней.Значимость оценки количества копий гена EGFR и экспрессии белка EGFR как биомаркеров для прогнозирования ответа на терапию, а также отбора пациентов, которым потенциально может помочь таргетная терапия EGFR, была продемонстрирована различными исследованиями [21,26-28], а также Исследование FLEX [9,17]. Кроме того, ранее была показана прогностическая ценность EGFR как биомаркера [29]. В качестве методологической основы для выявления пациентов с раком легких, которым могут помочь EGFR-специфические антитела, мы изучили взаимосвязь между экспрессией EGFR на уровне белка и количеством копий гена, оцененными с помощью FISH.

В рамках обширного исследования мы проанализировали экспрессию EGFR в образцах опухолей пациентов с НМРЛ с помощью ИГХ с использованием четырех различных клонов специфичных к EGFR антител и трех методов оценки и сопоставили эти данные с анализом FISH. Подробное сравнение Dako PharmDx, 31G7, 2.1E1 и SP84, проанализированных различными методами оценки, ранее не публиковалось, так же как сопоставление двух разных зондов FISH. Dako PharmDx и 31G7 — часто используемые антитела для исследований экспрессии EGFR [6,9].2.1E1 и SP84 коммерчески доступны, и поэтому они также являются кандидатами для применения при характеристике обычных клинических парафиновых срезов для оценки экспрессии EGFR.

Оценка четырех клонов антител продемонстрировала наивысшую степень согласия между Dako PharmDx и 31G7, составляющую 83,5% с использованием метода подсчета (A), 94,2% с оценкой (B) и 98,5% с оценкой (C), которая была ранее также было показано Lee et al. [18]. Оба антитела показывают одинаковую чувствительность к окрашиванию EGFR в фиксированных формалином образцах НМРЛ.2.1E1 показал самую высокую чувствительность при использовании методов оценки (A) (85,9%) и (C) (92,9%). Dako PharmDx и 31G7 имеют почти такую ​​же интенсивность окрашивания EGFR, как описано ранее Lee et al. [18], даже после оценки с помощью трех методов подсчета баллов.

SP84 показал более слабое связывание с EGFR, независимо от метода оценки. Это может быть связано с тем, что SP84 генерируется против синтетического пептида, соответствующего С-концу белка EGFR человека, тогда как 2.1E1, Dako PharmDx и 31G7 распознают внеклеточный домен молекулы.

Наши результаты продемонстрировали значительную корреляцию результатов окрашивания EGFR между четырьмя антителами (p <0,001). Эти данные соответствуют Hirsch et al. [6]. В этом исследовании сравнивались Dako PharmDx и 31G7, а также две разные системы оценки. Они постулировали, что более низкие пороговые значения для Dako PharmDx обеспечивают лучшее различие между пациентами с положительным и отрицательным EGFR и, следовательно, позволяют более точно прогнозировать выживаемость в зависимости от лечения гефитинибом.

В соответствии с другими исследованиями [19,21,30], мы показали более частую положительную экспрессию EGFR для всех четырех антител в SCC, чем в ADC, при выполнении метода оценки (A). Только для 2.1E1, оцененного методом A, положительная экспрессия EGFR была равномерно распределена между SCC и ADC. В то время как оценка методом балльной оценки (C) указала на гораздо более заметный EGFR

Таблица 3

Итого N (%) Dako PharmDx 31G7

A B C A B

Возраст> 65 128 (62) 84 (40.8) 54,4 (112) 57,3 (118) 43,7 (90) 54,4 (112)

<65 78 (38) 45 (21,8) 64 (31,1) 66 (32) 47 (22,8) 64 (31,1)

Значение P 0,299 0,312 0,105 0,171 0,312

Пол Мужской 132 (64) 81 (39,3) 115 (55,8) 121 (58,7) 85 (41,3) 116 (56,3)

Женский 74 (36) 48 (23,3) 61 (29,6) 63 (30,6) 52 (25,2) 60 (29,1)

Значение P 0,655 0,412 0,163 0,443 0,218

Гистология ADC 100 (48,6) 53 (25.7) 82 (39,8) 88 (42,7) 58 (28,2) 81 (39,3)

см. 86 (41,7) 69 (33,5) 82 (39,8) 84 (40,8) 70 (34) 83 (40,3)

LCC 12 (5,8) 6 (2,9) 9 (4,4) 9 (4,4) 7 (3,4) 9 (4,4)

Прочие 8 (3,9) 1 (0,5) 3 (1,5) 3 (1,5) 2 (1) 3 (1,5)

Значение P 0,000 0,000 0,000 0,000 0,000

Подтипы АЦП Ацинарный 38 (18,4) 21 (21) 30 (30) 33 (33) 24 (24) 32 (32)

Цельный 25 (12,1) 11 (11) 19 (19) 21 (21) 12 (12) 19 (19)

Папиллярный 22 (10.8) 15 (15) 21 (21) 22 (22) 16 (16) 21 (21)

Микрососочковый 10 (4,9) 4 (4) 8 (8) 8 (8) 4 (4) 6 (6)

невазивный муцинозный 3 (1,4) 1 (19 2 (2) 2 (2) 1 (1) 2 (2)

Лепидовый 2 (1) 1 (1) 2 (2) 2 (2) 1 (1) 1 (1)

Значение P 0,516 0,348 0,181 0,302 0,041

Скважина 5 (2,4) 2 (1) 3 (1,5) 3 (1,5) 2 (1) 2 (1)

Умеренное 82 (39,8) 55 (26,7) 71 (34,5) 73 (35,4) 60 (29,1) 72 (35)

плохое 119 (57.8) 72 (35) 102 (49,5) 108 (52,4) 75 (36,4) 102 (49,5)

Значение P 0,371 0,268 0,107 0,148 0,020

Размер опухоли T1 39 (18,9) 24 (11,7) 30 (14,6) 31 (15) 25 (12,1) 31 (15)

T2 115 (55,9) 71 (34,5) 99 (48,1) 105 (51) 78 (37,9) 99 (48,1)

T3 32 (15,5) 21 (10,2) 30 (14,6) 31 (15) 20 (9,7) 29 (14,1)

T4 20 (9,8) 13 (6,3) 17 (8,3) 17 (8,3) 14 (6,8) 17 (8,3)

Значение P 0,982 0.271 0,080 0,919 0,615

Лимфатический узел NO 99 (48) 66 (32) 82 (39,8) 86 (41,7) 66 (32) 82 (39,8)

N1 49 (23,8) 30 (14,6) 43 (20,9) 46 (22,3) 31 (15) 43 (20,9)

N2 43 (20,9) 24 (11,7) 38 (18,4) 38 (18,4) 27 (13,1) 37 (18)

N3 15 (7,3) 9 (4,4) 13 (6,3) 14 (6,8) 13 (6,3) 14 (6,8)

Значение P 0,643 0,835 0,667 0,358 0,765

2.1 E1 SP84 РЫБА +

С А В С А В С

117 (56.8) 112 (54,4) 119 (57,8) 119 (57,5) 72 (35) 98 (47,6) 113 (54,9) 26 (12,6)

33 (68) 65 (31,6) 69 (33,5) 71 (34,5) 40 (19,4) 62 (30,1) 68 (33) 16 (7,8)

0,350 0,416 0,312 0,789 0,564 0,731 0,829 1

59,7 (123) 55,8 (115) 60,2 (124) 60,7 (125) 36,4 (75) 52,9 (109) 58,3 (120) 11,7 (24)

62 (30,1) 62 (30,1) 64 (31,1) 65 (31,6) 37 (18) 51 (24,8) 61 (29,6) 18 (8,7)

0,052 0,535 0,077 0,103 0,383 0.036 0,080 0,368

89 (43,2) 83 (40,3) 90 (43,7) 91 (44,2) 42 (20,4) 67 (32,5) 85 (41,3) 23 (11,2)

84 (40,8) 83 (40,3) 84 (40,8) 85 (41,3) 65 (31,6) 82 (39,8) 84 (40,8) 17 (8,3)

9 (4,4) 8 (3,9) 9 (4,4) 9 (4,4) 5 (2,4) 9 (4,4) 9 (4,4) 2 (1)

3 (1,5) 3 (1,5) 5 (2,4) 5 (2,4) 0 (0) 2 (1) 3 (1,5) 0 (0)

0,000 0,000 0,001 0,000 0,000 0,000 0,000 0,567

33 (33) 31 (31) 33 (33) 33 (33) 16 (16) 26 (26) 34 (34) 11 (11)

22 (22) 19 (19) 22 (22) 22 (22) 8 (8) 16 (16) 21 (21) 2 (2)

22 (22) 22 (22) 22 (22) 22 (22) 12 (12) 17 (17) 20 (20) 7 (7)

8 (8) 8 (8) 9 (9) 9 (9) 4 (4) 5 (5) 6 (6) 1 (1)

2 (2) 2 (2) 2 (2) 2 (2) 1 (1) 2 (2) 2 (2) 2 (2)

2 (2) 1 (1) 2 (2) 3 (3) 1 (1) 1 (1) 2 (2) 0 (0)

0.201 0,029 0,258 0,499 0,751 0,438 0,189 0,029

3 (1,5) 2 (1) 3 (1,5) 3 (1,5) 2 (1) 2 (1) 3 (1,5) 1 (0,5)

74 (35,9) 74 (35,9) 76 (36,9) 77 (37,4) 46 (22,3) 67 (32,5) 72 (35) 17 (8,3)

108 (52,4) 101 (49) 109 (52,9) 110 (53,4) 64 (31,1) 91 (44,2) 106 (51,5) 24 (11,7)

0,126 0,009 0,62 0,047 0,789 0,075 0,155 1 ​​

32 (15,5) 30 (14,6) 33 (16) 34 (16,5) 20 (9,7) 28 (13,6) 31 (15) 5 (2,4)

104 (50.5) 100 (48,5) 104 (50,5) 105 (51) 61 (29,6) 90 (43,7) 102 (49,5) 24 (11,7)

15 (31) 28 (13,6) 31 (15) 31 (15) 17 (8,3) 24 (11,7) 29 (14,1) 7 (3,4)

18 (8,7) 19 (9,2) 20 (9,7) 20 (9,7) 14 (6,8) 18 (8,7) 19 (9,2) 6 (2,9)

0,234 0,293 0,181 0,309 0,539 0,444 0,362 0,449

86 (41,7) 82 (39,8) 88 (42,7) 88 (42,7) 54 (26,2) 75 (36,4) 84 (40,8) 14 (6,8)

46 (22,3) 44 (21,4) 46 (22,3) 46 (22,3) 26 (12,6) 39 (18.9) 44 (21,4) 13 (6,3)

39 (18,9) 37 (18) 40 (19,4) 41 (19,9) 25 (12,1) 33 (16) 39 (18,9) 12 (5,8)

14 (6,8) 14 (6,8) 14 (6,8) 15 (7,3) 7 (3,4) 13 (6,3) 14 (6,8) 3 (1,5)

0,645 0,652 0,833 0,460 0,892 0,843 0,741 0,151

£ Г> ¡4 ш

О rsj l £> О

Таблица 3 (продолжение)

Этап 68 (33) 45 (21,8) 57 (27,7) 60 (29,1) 47 (22,8) 59 (28.6) 60 (29,1)

57 (27,7) 32 (15,5) 46 (22,3) 50 (24,3) 34 (16,5) 44 (21,4) 49 (23,8)

III 73 (35,4) 45 (21,8) 66 (32) 67 (32,5) 50 (24,3) 66 (32) 68 (33)

IV 8 (3,9) 7 (3,4) 7 (3,4) 7 (3,4) 6 (2,9) 7 (3,4) 8 (3,9)

Значение P 0,337 0,406 0,771 0,635 0,192 0,493

Курение Текущее состояние 78 (56,1) 52 (43,3) 71 (59,2) 72 (60) 55 (45,8) 70 (58,3) 72 (60)

Бывший 30 (21.6) 22 (18,3) 27 (22,5) 28 (23,3) 23 (19,2) 27 (22,5) 29 (24,2)

Никогда 12 (8,6) 6 (5) 9 (7,5) 9 (7,5) 6 (5) 9 (7,5) 9 (7,5)

Значение P 0,342 0,254 0,150 0,254 0,373 0,078

Контакт с асбестом Присутствует 18 (20,5) 14 (20,3%) 17 (24,6) 17 (24,6) 14 (20,3) 17 (24,6%) 17 (24,6)

Отсутствует 51 (58) 37 (53,6%) 45 (65,2) 45 (65,2) 38 (55,1) 44 (63,8%) 46 (66,7)

Значение P 0,763 0,667 0,667 1,000 0,441 0,681

59 (28.6) 62 (30,1) 62 (30,1) 36 (17,5) 53 (25,7) 58 (28,2) 8 (3,9)

45 (21,8) 49 (23,8) 49 (23,8) 27 (13,1) 40 (19,4) 47 (22,8) 13 (6,3)

65 (31,6) 69 (33,5) 71 (34,5) 44 (21,4) 60 (29,1) 68 (33) 18 (8,7)

8 (3,9) 8 (3,9) 8 (3,9) 5 (2,4) 7 (3,4) 8 (3,9) 3 (1,5)

0,317 0,380 0,093 0,494 0,403 0,194 0,095

71 (59,2) 72 (60) 72 (60) 44 (36,7) 67 (55,8) 72 (60) 16 (13,3)

27 (22.5) 29 (24,2) 29 (24,2) 19 (15,8) 26 (21,7) 29 (24,2) 4 (3,3)

9 (7,5) 9 (7,5) 10 (8,3) 5 (4,2) 7 (5,8) 8 (6,7) 2 (1,7)

0,254 0,078 0,368 0,494 0,055 0,014 0,729

16 (23,2) 17 (24,6%) 17 (24,6) 12 (17,4) 16 (23,2%) 18 (26,1) 3 (4,3)

44 (63,8) 46 (66,7%) 46 (66,7) 28 (40,5) 40 (58%) 46 (66,7) 14 (20,3)

1.000 0,681 0,681 0,421 0,489 0,316 0,528

£ Г> ¡4 ш

° I4J

Таблица 4 Связь между подтипами АЦП и паттернами FISH

D LT HT LP HP LA HA

Ацинар 15 (7.3%) 6 (2,9%) 1 (1%) 5 (2,4%) 10 (4,9%) 0 (0%) 1 (0,5%)

Твердый 6 (2,9%) 8 (3,9%) 5 (2,4%) 4 (1,9%) 2 (1%) 0 (0%) 0 (0%)

Папиллярный 6 (2,9%) 2 (1%) 2 (1%) 5 (2,4%) 5 (2,4%) 1 (0,5%) 1 (0,5%)

Микропапиллярный 7 (3,4%) 0 (0%) 2 (1%) 0 (0%) 1 (0,5%) 0 (0%) 0 (0%)

Инвазивный слизистый 2 (1%) 0 (0%) 0 (0%) 1 (0,5%) 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%)

Лепидовый 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%) 0 (0%) 1 (0,5%) 1 (0,5%) 0 (0%)

выражения в ADC, чем в SCC.Оценка методом (B) показала аналогичную экспрессию EGFR в SCC и ADC для Dako PharmDx и 31G7. 2.1E1 показывает более высокую экспрессию EGFR в ADC, чем в SCC, тогда как SP84 указывает на избыточную экспрессию EGFR чаще в SCC, чем в ADC. Хотя не было значительных различий в экспрессии EGFR между подтипами ADC в соответствии с классификацией IASLC [31], сверхэкспрессия EGFR чаще всего наблюдалась в ацинарном подтипе, за которым следовали папилярный и солидный подтипы. Этот показатель был постоянным для всех

четыре антитела и три метода подсчета очков.Warth et al. ранее показали, что новая гистологическая классификация легочных ADC IASLC / ATS / ERS имеет прогностическое влияние [32]. Значение экспрессии EGFR на уровне белка как прогностического, а также как прогностического маркера при НМРЛ подчеркивается Travis et al. [12] и требует дальнейших исследований, чтобы получить больше информации о корреляции экспрессии EGFR в подтипах ADC.

Согласно системе подсчета очков Колорадо Варелла-Гарсиа и др. [24] и Cappuzzo et al.[22], оба EGFR

Таблица 5 Связь между IHC с использованием трех различных методов оценки и анализом FISH

EGFR IHC FISH Положительное Отрицательное Общее значение P

Оценка Dako PharmDx (A) Положительный 34 (16,5%) 95 (46,1%) 129 (62,6%) 77 (37,4%) 0,007

Отрицательные 8 (3,9%) 69 (33,5%)

Оценка (B) Положительный 41 (19,9%) 135 (65,5%) 176 (85,4%) 30 (14,6%) 0,012

Отрицательный 1 (0.5%) 29 (14,1%)

Оценка (C) Положительный 42 (20,4%) 142 (68,9%) 184 (89,3%) 22 (10,7%) 0,009

Отрицательный 0 (0%) 22 (10,7%)

Оценка 31G7 (A) Положительный 34 (16,5%) 61 (29,6%) 95 (46,1%) 111 (53,9%) 0,028

Отрицательные 8 (3,9%) 103 (50%)

Оценка (B) Положительный 42 (20,4%) 134 (65%) 176 (85,4%) 30 (14,6%) 0,001

Отрицательный 0 (0%) 30 (14,6%)

Оценка (C) Положительный 42 (20.4%) 143 (69,4%) 185 (89,8%) 21 (10,2%) 0,009

Отрицательный 0 (0%) 21 (10,2%)

2.1E1 Оценка (A) Положительный 41 (19,9%) 136 (66%) 177 (85,9%) 29 (14,1%) 0,012

Отрицательный 1 (0,5%) 28 (13,6%)

Оценка (B) Положительный 42 (20,4%) 146 (70,9%) 188 (91,3%) 18 (8,7%) 0,027

Отрицательный 0 (0%) 18 (8,7%)

Оценка (C) Положительный 42 (20,4%) 148 (71,8%) 190 (92,2%) 16 (7,8%) 0,046

Отрицательный 0 (0%) 16 (7.8%)

Оценка SP84 (A) Положительный 25 (12,1%) 87 (42,2%) 112 (54,3%) 94 (45,7%) 0,491

Отрицательные 17 (8,3%) 77 (37,4%)

Оценка (B) Положительный 37 (18%) 123 (59,7%) 160 (77,7%) 46 (22,3%) 0,095

Отрицательные 5 (2,4%) 41 (19,9%)

Оценка (C) Положительный 42 (20,4%) 139 (67,5%) 181 (87,9%) 25 (12,1%) 0,003

Отрицательный 0 (0%) 25 (12,1%)

Всего 42 (20,4%) 164 (79.6%)

специфических зондов FISH показали точно такие же результаты. Согласованность обоих FISH-зондов по результатам распределения на одни и те же подтипы дисомии, низкой и высокой трисомии, низкой и высокой полисомии и амплификации неоднозначна. Насколько нам известно, это первое исследование, в котором сравнивались результаты двух разных зондов FISH. Эти данные подчеркивают, что FISH-анализ является надежным и воспроизводимым методом для оценки амплификации гена EGFR по сравнению с определением статуса EGFR с помощью IHC.

В этом исследовании 42 образца опухоли (20,4%) были FISH-положительными, что выражалось высокой полисомией (13,6%), низкой амплификацией (42,4%) и высокой амплификацией (4,3%). Эти результаты согласуются с Lee et al. [18] и Hirsch et al. [21]. В нашем исследовании положительный EGFR чаще встречался в ADC, чем в SCC (11,2% против 8,3%), что также согласуется с Lee et al. [18], но противоречит результатам Hirsch et al. [21], в которых амплификация EGFR чаще встречается в SCC.

Мы смогли показать значительные различия в отношении паттернов EGFR FISH у подтипов аденокарциномы (p = 0,029). Эти результаты отличаются от исследования Soma et al. [33], в которых амплификация гена EGFR не различалась среди преобладающих паттернов. Наши результаты продемонстрировали явную взаимосвязь между числом копий гена EGFR и подтипами ADC, что требует дальнейших исследований.

Сравнение данных IHC Dako PharmDx, 31G7 и 2.1E1 и результатов, полученных с помощью анализа FISH, показало сильную связь между обоими методами.31G7 показал самую высокую корреляцию с анализом FISH при оценке B (p = 0,001). В то время как данные IHC, полученные с помощью SP84, показали значительную корреляцию только после оценки с помощью метода C. Опять же, этот клон антитела находится вне диапазона, и поэтому причиной может быть другой эпитоп, который распознается SP84.

FISH в сочетании с ИГХ независимо от выбора антител Dako PharmDx, 31G7 и 2.1E1 и независимо от метода подсчета баллов, в настоящее время кажется лучшим подходом для выявления пациентов, которым может быть полезна целенаправленная терапия EGFR.Стандартизация определения статуса EGFR является обязательной. Мы советуем использовать Dako PharmDx, 31G7 или 2.1E1 в IHC и подтвердить эти данные с помощью анализа FISH, чтобы облегчить большему количеству пациентов лечение, специфичное для EGFR, в отношении их паттерна экспрессии EGFR. Однако эти результаты должны быть соотнесены с клиническими исходами после лечения EGFR-антителами, чтобы подтвердить качество прогнозирования статуса экспрессии EGFR.

Выводы

Таким образом, суть этого исследования такова: существуют разные методы оценки экспрессии EGFR, приводящие к различным результатам.Наибольшее соответствие с FISH показано для клона антитела 31G7, оцененного с помощью

балл B (p = 0,001). Таким образом, ИГХ, проводимый с этим антителом, может использоваться в качестве стандарта для определения экспрессии EGFR. Кроме того, мы показали, что нет корреляции между экспрессией EGFR и гистологическими подтипами и клинико-патологическими данными. Поэтому для будущих исследований лечения, посвященных изучению эффективности специфических антител к EGFR, выбор стандартизированного антитела для EGFR-IHC имеет решающее значение для обеспечения сопоставимости результатов экспрессии EGFR.

На следующем этапе мы сравним фиксированные в формалине парафиновые залитые и фиксированные HOPE легочные ткани с целью выявления различий между четырьмя исследованными антителами между этими двумя различными методами фиксации. Дальнейшие исследования будут сосредоточены на оценке экспрессии EGFR на уровне мРНК с помощью ПЦР в реальном времени и вестерн-блоттинга для подтверждения этих данных. Кроме того, будет проведен анализ мутаций составных мутаций EGFR [34] и нижестоящих генов EGFR [35], чтобы предсказать скорость ответа на терапию TKI.Предыдущие исследования показали, что фосфорилирование EGFR также связано с плохим исходом при НМРЛ [36]. Удивительно, но 10-20% пациентов с НМРЛ с НМРЛ дикого типа EGFR также получают пользу от TKI [37,38]. Следовательно, крайне важно объединить все эти методы характеристики EGFR, чтобы получить больше информации о корреляции экспрессии EGFR на уровне белка, амплификации гена, статусе активации и скорости ответа на селективную терапию EGFR. Для этого может быть проведена краткосрочная стимуляция тканей (STST).Все эти всесторонние исследования имеют большое значение для улучшения выявления большего числа пациентов, которым в будущем может пригодиться терапия, специфичная для EGFR.

Сокращения

EGFR: рецептор эпидермального фактора роста; IHC: иммуногистохимия; FISH: флуоресцентная гибридизация in situ; НМРЛ: немелкоклеточный рак; TKI: ингибитор тирозинкиназы; FFPE: фиксированный формалином, залитый парафином; ТМА: тканевый микрочип; ADC: аденокарцинома; SCC: плоскоклеточный рак; LCC: крупноклеточная карцинома; DAPI: 4 ‘, 6-диамидино-2-фенилиндол; FLEX: лечение первой линии для пациентов с расширенным НМРЛ, экспрессирующим EGFR.

Конкурирующие интересы

Авторы заявляют, что у них нет конкурирующих интересов. Вклад авторов

GR провела гистологическую диагностику, оценила иммуногистохимию и FISH-анализ, сделала фотографии и выполнила статистический анализ. WI участвовал в сборе данных и подготовил рукопись. KC позаботился о хирургической части. За онкологические аспекты отвечали RN, HRM и RM.SPA и VE покрыли патологическую часть. GT задумал исследование. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

Информация об авторе

Мартин Рек и Торстен Гольдманн работали совместно с ведущими авторами. Благодарности

Это исследование было поддержано Немецким центром исследования легких. Мы благодарим профессора Марилейла Варелла Гарсия, Отделение Медицинской онкологии Университета Колорадо, Anschutz MedicalCampus за полезное обсуждение, особенно касающееся анализа FISH, а также Кристин Вичковски и Штеффи Фокс за отличную техническую помощь.

Сведения об авторе

1 Клиническая и экспериментальная патология, Исследовательский центр Борстель, Parkallee 3, 23845 Борстель, Германия. 2Патология, медицинский факультет, Александрийский университет, улица Чамблион, эль-азарита, Александрия, Египет. 3Центр пульмонологии и торакальной хирургии, Lungenclinic Grosshansdorf, Wöhrendamm 80, 22927 Grosshansdorf, Германия. 4Airway Research Center North (ARCN), член Немецкого центра исследований легких, Борстель, Германия.5Университет Людвига Максимилиана (LMU), член Немецкого центра исследований легких, Ziemssenstr. 1, 80336 Мюнхен, Германия. 6Комплексный центр пневмологии Мюнхена (CPC-M), член Немецкого центра исследования легких, Мюнхен, Германия. 7 Институт патологии, Университетская клиника Гейдельберга, Im Neuenheimer Feld 224, 69120 Гейдельберг, Германия. 8 Центр трансляционных исследований легких (TLRC), член Немецкого центра исследований легких, Гейдельберг, Германия.

Получено: 7 июля 2014 г. Принято: 16 августа 2014 г. Опубликовано в Интернете: 17 сентября 2014 г.

Список литературы

1.Herbst RS, Heymach JV, Lippman SM: Рак легких. N Engl J Med 2008, 359 (13): 1367–1380.

2. Шиллер Дж. Х., Харрингтон Д., Белани С. П., Лангер С., Сандлер А., Крук Дж., Чжу Дж., Джонсон Д. Х., Восточная кооперативная онкологическая группа: рекомендации по режимам химиотерапии для запущенного мелкоклеточного рака легкого на поздних стадиях. N Engl J Med 2002, 346 (2): 92-98.

3. Лунки A: рецептор EGF. Int J Biochem Cell Biol 1999, 31 (6): 637-643.

4. Николсон Р.И., Джи Дж. М., Харпер М. Е.: EGFR и рак pr0gn0sis.Eur J Cancer 2001, 37 (Дополнение 4): S9 – S15.

5. Hynes NE, Lane HA: рецепторы ERBB и рак: комплексность целевых ингибиторов. Нат Рев Рак 2005, 5 (5): 341-354.

6. Hirsch FR, Dziadziuszko R, Thatcher N, Mann H, Watkins C, Parums DV, Speake G, Holloway B, Bunn PA Jr, Франклин WA: эпидермальный фактор роста рецептора иммуногистохимии: c0mparis0n 0f antib0dies и cut0 гефитиниб в 3-й фазе плацебо-контролируемого исследования запущенного немелкоклеточного рака легкого.Рак 2008, 112 (5): 1114-1121.

7. Мендельсон Дж .: Ориентация на рецептор фактора роста эпидермиса для лечения рака. J Clin Oncol 2002, 20 (18 доп.): 1S-13S.

8. Базельга Дж., Артеага К.Л .: Критическое обновление и новые тенденции в нацеливании рецепторов фактов роста эпидермиса при раке. Дж. Клин Онкол 2005, 23 (11): 2445-2459.

9. Пиркер Р., Перейра-младший, фон Павел Дж., Кшаковски М., Рамлау Р., Парк К., де Маринис Ф., Эберхард В. Е., Пас-Арес Л., Сторкель С., Шумахер К. М., фон Хейдебрек А., Челик И., О’Бирн KJ: Экспрессия EGFR как предиктор выживаемости при химиотерапии первой линии плюс цетуксимаб у пациентов с распространенным мелкоклеточным раком легкого: анализ данных фазы 3 исследования FLEX.Ланцет Онкол 2012, 13 (1): 33-42.

10. Керстинг С., Пакайзен Дж., Лейдингер Б., Брандт Б., фон Василевски Р., Винкельманн В., ван Дист П.Дж., Гошегер Г., Бюргер Н. Подводные камни в иммуногистохимической оценке экспрессии EGFR в тканях саркофага. Дж. Клин Патол 2006, 59 (6): 585-590.

11. Меерт А.П., Мартин Б., Дельмотт П., Бергманс Т., Лафитт Дж. Дж., Маско С., Паесманс М., Стилс Э., Вердебу Дж. М., Скалиер Дж. П.: Роль экспрессии EGF-R в выживаемости пациентов при раке легких: систематический обзор. с метаанализом.Eur Respir J 2002, 20 (4): 975-981.

12. Трэвис В.Д., Брамбилла Э., Ногучи М., Николсон А.Г., Гайзингер К., Ятабэ Ю., Исикава Ю., Вистуба И., Флидер Д. Б., Франклин В., Газдар А., Хаслтон П. С., Хендерсон Д. В., Керр К. М., Петерсен И., Роггли В. , Thunnissen E, Tsao M: Диагностика рака легкого в небольших биопсиях и cyt0l0gy: причастность к Международной ассоциации 2011 года по исследованию рака легкого / Американское международное общество / Европейская классификация респираторного общества. Arch Pathol Lab Med 2013, 137 (5): 668-684.

13. Мирсадри С., Освал Д., Ализаде Ю., Кауло А., ван Бик Е. Младший: 7-я классификация рака легких по TNM и система стадий: обзор изменений и последствий. Мировой журнал радиологии, 2012, 4 (4): 128-134.

14. Hofman P, Butori C, Havet K, Hofman V, Selva E, Guevara N, Santini J, Van Obberghen-Schilling E: Прогностическое значение уровней кортактина в плоскоклеточном раке головы и шеи: c0mparis0n со статусом рецептора фактора роста эпидермиса . Br J Cancer 2008, 98 (5): 956-964.

15. Modjtahedi H, Khelwatty SA, Kirk RS, Seddon AM, Essapen S, Del Vecchio CA, Wong AJ, Eccles S: иммуногистохимический дискриминант дикого типа

EGFR из EGFRvIII в фиксированных образцах опухолей с использованием mAb против EGFR ICR9 и ICR10. Br J Cancer 2012, 106 (5): 883-888.

16. Steffensen KD, Waldstrom M, Olsen DA, Corydon T, Lorentzen KA, Knudsen HJ, Jeppesen U, Brandslund I, Jakobsen A: Мутантный рецептор фактора роста эпидермиса в доброкачественных, родственных и злокачественных опухолях.Clin Cancer Res 2008, 14 (11): 3278-3282.

17. Пиркер Р., Перейра Дж. Р., Щесна А., фон Павел Дж., Кшаковски М., Рамлау Р., Винниченко И., Парк К., Ю. К. Т., Ганул В., Рох Дж. К., Баджетта Е., О’Бирн К., де Маринис Ф., Эберхардт W, GoddemeierT, Emig M, Gatzemeier U: Цетуксимаб плюс химиотерапия у пациентов с запущенным мелкоклеточным раком легкого (FLEX): открытое рандомизированное исследование III фазы. Ланцет 2009, 373 (9674): 1525-1531.

18. Lee HJ, Xu X, Choe G, Chung DH, Seo JW, Lee JH, Lee CT, Jheon S, Sung SW, Chung JH: Сверхэкспрессия белка и амплификация гена рецептора фактора эпидермального роста в мелкоклеточных карциномах легких: C0mparis0n Из четырех коммерчески доступных антибиотиков, полученных с помощью иммуногистохимического и флуоресцентного исследования гибридизации in situ.Рак легких 2010, 68 (3): 375-382.

19. Дачич С., Фланаган М., Сипли К., Рамалингам С., Лукетич Дж., Белани С., Юсем С.А.: Значение экспрессии белка EGFR и амплификации гена в мелкоклеточном раке легких. Am J Clin Pathol 2006, 125 (6): 860-865.

20. Li AR, Chitale D, Riely GJ, Pao W, Miller VA, Zakowski MF, Rusch V, Kris MG, Ladanyi M: мутации EGFR в аденокарциномах легких: опыт клинических испытаний и связь с числом копий гена EGFR и иммунохимической экспрессией.J Mol Diagn 2008, 10 (3): 242-248.

21. Hirsch FR, Chitale D, Riely GJ, Pao W., Miller VA, Zakowski MF, Rusch V, Kris MG, Ladanyi M: рецептор фактора эпидермального роста в мелкоклеточных карциномах легких: взаимосвязь между копийным числом гена и белком expressi0n и воздействие 0n pr0gn0sis. Дж. Клин Онкол 2003, 21 (20): 3798-3807.

22. Cappuzzo F, Hirsch FR, Rossi E, Bartolini S, Ceresoli GL, Bemis L, Haney J, Witta S, Danenberg K, Domenichini I, Ludovini V, Magrini E, Gregorc V, Doglioni C, Sidoni A, Tonato M , Франклин В.А., Крино Л., Банн П.А. Младший, Варелла-Гарсия М.: Ген и белок рецептора факта роста эпидермального роста и чувствительность к гефитинибу при n0n-мелкоклеточном раке легкого.J Natl Cancer Inst 2005, 97 (9): 643-655.

23. Varella-Garcia M: Стратификация пациентов с мелкоклеточным раком легкого для терапии ингибиторами рецепторов фактора роста эпидермиса: анализ флуоресценции EGFR in situ гибридизации. Диагноз Патол 2006, 1:19.

24. Varella-Garcia M, Diebold J, Eberhard DA, Geenen K, Hirschmann A, Kockx M, Nagelmeier I, Ruschoff J, Schmitt M, Arbogast S, Cappuzzo F: анализ флуоресценции EGFR на месте гибридизации: руководство по применению -мелкоклеточный рак легкого.Дж. Клин Патол 2009, 62 (11): 970-977.

25. Драм М.Л., Шиовиц-Эзра С., Гаумер Э., Линдау С.Т.: Оценка вредного поведения и использования алкоголя в проекте «Жизнь, здоровье и старение в обществе». J Gerontol B Psychol Sci Soc Sci 2009, 64 (Приложение 1): i119-i130.

26. Hirsch FR, Varella-Garcia M, Cappuzzo F, McCoy J, Bemis L, Xavier AC, Dziadziuszko R, Gumerlock P, Chansky K, West H, Gazdar AF, Crino L, Gandara DR, Franklin WA, Bunn PA Jr : C0mbinati0n 0f Число копий гена EGFR и экспрессия белка предсказывают 0utc0me для пациентов с запущенным мелкоклеточным раком легких, получавших гефитиниб.Анналы Онкол 2007, 18 (4): 752-760.

27. Барбер Т.Д., Фогельштейн Б., Кинзлер К.В., Велкулеску В.Е.: S0matic mutati0ns 0f EGFR при опухолях прямой кишки и глиобластах. N Engl J Med 2004, 351 (27): 2883.

28. Tsuchihashi Z, Khambata-Ford S, Hanna N, Janne PA: Resp0nsiveness to0 cetuximab with0ut mutati0ns in EGFR. N Engl J Med 2005, 353 (2): 208-209.

29. Варт А., Пензель Р., Линденмайер Х., Брандт Р., Стензингер А., Герпель Е., Гёпперт Б., Томас М., Херт Ф.Дж., Динеманн Х., Шнабель П.А., Ширмахер П., Хоффманн Х., Мули Т., Вайхерт В .: EGFR, Изменения генов KRAS, BRAF и ALK при аденокарциноме легких: пациент 0utc0me, взаимодействие с m0rph0gy и иммунотипом.Eur Respir J 2014, 43 (3): 872-883.

30. Jeon YK, Sung SW, Chung JH, Park WS, Seo JW, Kim CW, Chung DH: Клинические патологические особенности и прогнозные последствия эпидермального фактора роста рецептора (EGFR) число копий гена и экспрессия белка при мелкоклеточном раке легкого . Рак легких 2006, 54 (3): 387-398.

31. Lee HJ, Lee CH, Jeong YJ, Chung DH, Goo JM, Park CM, Austin JH: Международная мультидисциплинарная классификация IASLC / ATS / ERS карциномы легких: новые методы и радиологические последствия.J Thorac Imaging 2012, 27 (6): 340-353.

32. Warth A, Muley T., Meister M, Stenzinger A, Thomas M, Schirmacher P, Schnabel PA, Budczies J, Hoffmann H, Weichert W.: новая историческая международная ассоциация по исследованию рака легких / Американское международное общество / Европа. Система классификации респираторных обществ 0f

Gaber et al. Диагностическая патология 2014, 9: 165 Страница 15 из 15

http://www.diagnosticpathology.org/content/9/1 / 165

Аденокарцинома легкого является независимым от стадии предиктором выживаемости.Дж. Клин Онкол 2012, 30 (13): 1438–1446.

33. Сома С., Цута К., Такано Т., Хатанака Ю., Йошида А., Сузуки К., Асамура Х., Цуда Х: Внутриопухолевое распределение EGFR-амплифицированных и EGFR-мутированных клеток в легочной аденокарциноме. Патол Рес Прак 2014, 210 (3): 155–160.

34. Kobayashi S, Canepa HM, Bailey AS, Nakayama S, Yamaguchi N, Goldstein MA, Huberman MS, Costa DB: Мутации соединения EGFR и ответ на ингибиторы тирозинкиназы EGFR. JThoracOncol 2013, 8 (1): 45-51.

35. Kim HR, Cho BC, Shim HS, Lim SM, Kim SK, Chang J, Kim DJ, Kim JH: Прогнозирование продолжительности ответа на ингибиторы тирозинкиназы рецептора эпидермального фактора роста в мутировавшей EGFR аденокарциноме легких никогда не курильщика.

Рак легких 2014, 83 (3): 374-382.

36. Kanematsu T, Yano S, Uehara H, Bando Y, Sone S: Фосфорилирование, но не сверхэкспрессия рецептора эпидермального фактора роста связано с плохим прогнозом для пациентов с немелкоклеточным раком легкого.Онкол Res 2003, 13 (5): 289-298.

37. Holbro T, Hynes NE: рецепторы ErbB: управляющие ключевыми сигнальными сетями на протяжении всей жизни. Annu Rev Pharmacol Toxicol 2004, 44: 195-217.

38. Секвист Л.В., Белл Д.В., Линч Т.Д., Хабер Д.А.: Молекулярные предикторы ответа на антагонисты рецепторов эпидермального фактора роста при немелкоклеточном раке легкого. Дж. Клин Онкол 2007, 25 (5): 587-595.

DOI: 10.1186 / s13000-014-0165-0

Цитируйте эту статью как: Gaber et al.: Корреляция экспрессии EGFR, количества копий гена и клинико-патологического статуса при НМРЛ. Диагностическая патология

2014 9: 165.

Отправьте следующую рукопись в BioMed Central и воспользуйтесь всеми преимуществами:

• Удобная онлайн-подача

• Тщательная экспертная оценка

• Отсутствие ограниченного пространства или платы за цветные рисунки

• Немедленная публикация о приемке

• Включение в PubMed, CAS, Scopus и Google Scholar

• Исследование, свободно распространяемое

Отправьте рукопись на РПНТ БинМели, i

www.biomedcentral.com/submit v-c «Lml

Шпаргалка по размерам изображений в социальных сетях 2021

2020 год принес нам всем много изменений с точки зрения того, что мы публикуем в социальных сетях, и тем, на которые нам следует обратить особое внимание.

Внесло ли это изменения в то, как мы должны публиковать изображения в социальных сетях в течение 2021 года? Мы составили для вас исчерпывающий список и памятку по всем основным размерам изображений в социальных сетях на 2021 год.

Почему вам нужно следить за размерами изображений в социальных сетях в 2021 году

Несколько причин, по которым это больше не «можно», а «обязательно»:

• Пользовательский опыт — независимо от того, какая платформа используется, все должно быть представлены четко и прозрачно.
• профессиональный внешний вид — гарантируя, что ваши сообщения адаптированы к каждой платформе, вы показываете своим подписчикам, насколько вы обеспокоены брендингом.
• демонстрируя весь потенциал вашего продукта или услуги через индивидуальные публикации.

Без лишних слов, давайте сразу перейдем к размерам изображений в социальных сетях!

Bonus — загрузите нашу бесплатную инфографику о размерах изображений в социальных сетях в формате PDF. Подпишитесь на нашу рассылку и никогда больше не пропустите подобный контент.

Размеры изображений Facebook в 2021 году

Мы не могли начать этот список с какой-либо другой платформы, кроме Facebook. Каковы размеры изображений в Facebook, которым вы должны следовать в 2021 году? Каковы правильные размеры обложки Facebook? Какой самый лучший размер изображения профиля Facebook? Какой размер фото в Facebook выбрать? У нас есть ответы на все эти вопросы.

Короче говоря: хотя многие размеры изображений в Facebook остались такими же, как в 2020 году, вы найдете в списке несколько обновлений и сюрпризов!

Общие изображения

Размеры изображений: рекомендуется 1200 x 630 пикселей, мин. Ширина 470 пикселей.

Общие изображения — это изображения, которые были опубликованы на вашей временной шкале. они отображаются одинаково как на настольных компьютерах, так и на мобильных устройствах. Единственное, в чем вы должны убедиться, это то, что все элементы отлично смотрятся на мобильных устройствах, прежде чем публиковать их. До 2020 года вам, возможно, также приходилось проверять правило 20% текста, но это было частично исключено в 2020 году.

Ссылка на сообщение

Размеры изображения:

• не менее 1080 × 1080 пикселей (между 1,91: 1 и соотношение сторон 1: 1) — для платных сообщений с квадратными ссылками (для мобильных устройств), созданных с помощью FB Ads Manager как новое объявление.
• Facebook рекомендует 1200 x 630 пикселей и максимальный размер 8 МБ для миниатюр ссылок (например, когда вы делитесь внешним контентом на Facebook и хотите его впоследствии продвигать)

Сообщения со ссылками — это интерактивные обновления Facebook, которые перенаправляют пользователя на конкретный внешний страницу вместо увеличения изображения. Сообщения со ссылками используются как в качестве рекламных сообщений, так и в качестве эскизов любых ссылок общего доступа.

Но каковы размеры изображений в Facebook для публикации со ссылкой?

Вы можете использовать квадрат (соотношение сторон 1: 1) или прямоугольник с соотношением сторон больше, чем у общего изображения (1.91: 1).

Размер изображения профиля Facebook

Размеры изображения: рекомендуется 170 x 170 пикселей (для настольных ПК) или 128 x 128 пикселей (для мобильных устройств)

Фото профиля Facebook можно найти как фотографию профиля в вашем профиле Facebook, а также в Facebook Фотография профиля страницы. Рекомендуемый размер изображения профиля Facebook — 170 x 170 пикселей.

Важно, чтобы фотография была относительно разборчивой, особенно если на ней есть логотип или текст. Такие фотографии профиля Facebook также будут отображаться, когда ваша страница или профиль взаимодействуют с другими, публикуя комментарии или отправляя сообщения.

Помните, что аватаркой будет кружок. Если вы хотите выделить какой-либо контент на фото профиля, отодвиньте его от края круга, иначе оно может быть обрезано по углам.

Размеры обложки Facebook

Размеры изображения: рекомендуется 851 x 315 пикселей (в файлах PNG / sRGB / JPG с максимальным размером 100 КБ), отображается как 820 x 312 пикселей (для ПК) или 640 x 360 пикселей (для мобильных устройств).

Фотографии на обложке Facebook отображаются в верхней части каждой страницы, профиля или группы Facebook (хотя размеры групп различаются, как вы узнаете позже), и обычно это первое, что видит человек на Facebook, когда посещает эту страницу или профиль.

Вот почему вам следует выбрать обложку Facebook, которая отражает ваш бренд, ценности или личность, и соответствующим образом увеличить ее.

Размеры обложки Facebook больше всего различаются при сравнении настольной и мобильной версий. Установка границ безопасности и перемещение важных элементов в середину может спасти вашу обложку Facebook от неэстетичных обрезков.

Изображение вашего профиля будет немного перекрывать фото на обложке как на компьютере, так и на мобильном устройстве, поэтому лучше всего переместить важную информацию в полностью незатронутые области последнего.

Facebook также рекомендует сделать фото или видео обложки более легкими, чтобы ускорить загрузку, что также можно применить ко всем размерам изображений Facebook.

Размер фотографии на обложке группы Facebook

Размеры изображения: 1640 x 856 пикселей (соотношение сторон 1,91: 1, настольный компьютер) или 1640 x 664 пикселей (мобильное устройство) рекомендуется, поэтому сохраняйте запас прочности 96 пикселей сверху и снизу

Размеры видео: минимум 1250 x 312 пикселей и продолжительность от 20 до 90 секунд, рекомендуется 1250 x 463 пикселей (соотношение сторон 2,7: 1)

Фотографии обложки группы Facebook отображаются в верхней части каждой группы и играют важную роль.Они помогают потенциальным членам быстро определить цель группы перед тем, как присоединиться к ней, и подчеркивают ценность, которую она пытается продвигать.

Этот тип обложки отличается от тех, которые обычно можно найти в профилях или на страницах, поэтому, если вы хотите использовать ту же графику, вам придется сначала настроить их.

Для групповых обложек размеры мобильных версий меньше на 192 пикселя в высоту, чем рекомендуемые настольные версии. Поэтому ваша обложка не должна содержать никакой важной информации вверху или внизу, поскольку она может быть не видна пользователям мобильных устройств.

Убедитесь, что вы оставили верхнее и нижнее поля на фото обложки группы Facebook!

Фотография на обложке мероприятия Facebook

Размеры изображения: 1200 x 628 пикселей (соотношение сторон 1,91: 1)

Размеры видео: 1200 пикселей x 628 пикселей и продолжительность от 30 секунд до 5 минут

В Facebook каждое событие имеет обложку который появляется вверху страницы. Это может быть, например, плакат или увеличенная повестка дня, но у вас должен быть правильный размер фотографии события Facebook, чтобы отображать ее правильно.

Размер фотографии события Facebook будет уменьшен до миниатюры и отображен в виде ссылки, если вы решите поделиться своим событием на Facebook. Однако вы должны учитывать не только размер, но и идеи для обложки, так как это может вдохновить других на участие. Итак, хотя размер фотографии с мероприятия в Facebook действительно имеет значение, вы не можете забыть о том, чтобы изображение было информативным и по существу.

Ищете простой способ предварительно просмотреть свои сообщения перед их планированием? Kontentino предлагает предварительный просмотр публикаций для настольных компьютеров и мобильных устройств!

Facebook историй размер изображения

Размеры изображения: 1080 × 1920 пикселей (соотношение сторон 9:16) рекомендуется, 1080 x 1420 пикселей, безопасная область заголовка

Facebook Stories все чаще используются брендами во всем мире. Мир.Истории публикуются компаниями для демонстрации корпоративной культуры, запуска новых продуктов, привлечения клиентов или проведения конкурсов. Назовите цель, Facebook Stories поможет ее достичь.

Есть много способов использовать истории Facebook, поэтому знание размеров изображений Facebook для этого формата определенно полезно.

Рекомендуемое соотношение — 9:16, но при создании историй Facebook необходимо учитывать безопасную для заголовков область, поскольку имя пользователя и кнопки навигации отображаются в верхнем и нижнем полях.Оставьте 14% (или 250 пикселей для рекомендованного размера) свободного пространства для обоих.

Размеры изображений в Facebook для рекламы

Ваша реклама в Facebook должна быть привлекательной визуально, содержать четкие призывы к действию и… быть подходящего размера. Какие размеры изображений следует использовать для рекламы в Facebook?

Лента объявлений

Размеры изображения: максимально возможное разрешение (соотношение сторон от 1,91: 1 до 4: 5) или со ссылкой не менее 1080 × 1080 пикселей (соотношение сторон от 1,91: 1 до 1: 1)

Канал Рекламные объявления — это те, которые появляются в вашей ленте новостей как на мобильных устройствах, так и на настольных компьютерах, и они должны быть размером со ссылками на Facebook.

Квадратные сообщения оказались популярными среди брендов, которые хотят завоевать мобильность, потому что текст более заметен и занимает больше места в ленте новостей, что затрудняет его пропуск.

Объявления в правом столбце

Размеры изображения: рекомендуется не менее 1200 x 1200 пикселей (соотношение сторон от 16: 9 до 1: 1)

Объявления в правом столбце отображаются только в правой части ленты новостей на рабочем столе.

Если в ваших объявлениях много текста, их может быть трудно прочитать в этом месте размещения.При их разработке выберите сообщение, подходящее для этого размера объявления, или выберите другое место размещения.

Видеообъявления

Размеры видео: соотношение сторон от 9:16 до 16: 9 и продолжительность от 1 с до 240 минут (в файлах MP4 / MOV с максимальным размером 4 ГБ), вертикальное видео может быть замаскировано до 4: 5 дюймов. Новостная лента.

Видео часто используются в рекламе на Facebook. Некоторым брендам может быть удобнее выпустить видео, демонстрирующее их продукты или услуги, в то время как другие тестируют видеорекламу для повышения эффективности.Почему это так? Считается, что видеореклама зачастую более рентабельна, чем реклама со статическими изображениями, и не только в социальных сетях.

Поскольку высококачественные видео становятся все более популярными, вы должны помнить, что Facebook не позволит вам загружать клипы размером более 4 ГБ. Поэтому вам может потребоваться сжать или уменьшить разрешение HD-видео перед его загрузкой.

Карусельная реклама

Размеры изображения: рекомендуется 1080 x 1080 пикселей (соотношение сторон 1: 1), минимум 600 x 600 пикселей.

Карусельная реклама показывает различные продукты или креативы в одной рекламе. Чтобы увидеть их во всей красе, смахните по горизонтали (на мобильном устройстве) или нажмите стрелки сбоку.

Вам нужно как минимум 2 изображения для 2 карточек карусели и максимум 10 карточек для рекламы карусели (максимальный размер всех файлов вместе не может превышать 30 МБ). Последовательность должна быть логичной, чтобы аудитория переходила к последней карточке.

Bonus — загрузите нашу бесплатную инфографику о размерах изображений в социальных сетях в формате PDF.Подпишитесь на нашу рассылку и никогда больше не пропустите подобный контент.

Размер изображения Twitter 2021

Каков размер заголовка Twitter и размер баннера Twitter в 2021 году? Здравствуйте, маркетологи, мы вас поможем! Проверьте последние размеры изображений Twitter прямо сейчас.

Размер изображения профиля Twitter

Размер изображения: рекомендуется 400 × 400 пикселей, максимальный размер 2 МБ

Изображение профиля Twitter появляется в вашей учетной записи и под вашими сообщениями или комментариями.

Не забудьте оптимизировать разрешение логотипа, чтобы он был виден везде, где вы используете свой профиль.В Твиттере изображение вашего профиля отображается в виде круга, поэтому, если у вас есть какие-либо важные элементы бренда в углу, вам следует переместить их к центру.

Размер изображения: рекомендуется 1500 × 500 пикселей, запас прочности 60 пикселей сверху и снизу, на мобильных устройствах обрезано до соотношения сторон 2: 1.

Заголовок профиля Twitter — это первое, что увидят ваши подписчики, когда они просматривают ваш профиль вместе с фотографией профиля.

Он может предоставить много информации, особенно если ваш профиль является частным и больше ничего не видно.Он также отображается в виде эскиза при наведении курсора на ваш псевдоним в Twitter.

При разработке заголовка важно не только помнить о правильном размере заголовка Twitter, но и учитывать запас прочности вверху и внизу. Это связано с тем, что на мобильных устройствах Twitter обрезает фотографию до соотношения сторон 2: 1.

Размер фото в Twitter | Размер баннера Twitter

Размеры изображения: минимум 440 x 220 пикселей (рекомендуется соотношение сторон 2: 1), максимальный размер 5 МБ

Посты с фотографиями находятся в потоках Twitter и публикуются брендами, часто со ссылками и хэштегами в копии.

Храните такие фотографии в форматах GIF, JPEG или PNG с размером баннера Twitter менее 5 МБ. В одном твите можно загрузить до 4 фотографий.

Размер объявлений Twitter

Продвигаемое изображение / GIF

Размеры изображения: соотношение сторон от 2: 1 до 1: 1, минимальная ширина 600 пикселей

Ваша реклама должна быть креативной и адаптированной специально для Twitter с учетом обеих его характеристик и требования к размеру.

Продвигаемые изображения и GIF-файлы часто используются брендами в рекламных кампаниях в Twitter.Сохраняйте соотношение сторон от 2: 1 до 1: 1 (изображение будет обрезано до 1: 1, если оно превышает высоту виджета) и минимальную ширину 600 пикселей.

Видео, размещенные через Интернет

Размеры видео: максимальный размер 512 МБ, максимальная продолжительность 2 мин. 20 с.

Видео набирают популярность в социальных сетях, и Twitter не исключение. Здесь вам нужно иметь в виду, что вы довольно ограничены по продолжительности (максимум 140 с) и размеру (512 МБ — существенный предел для высококачественного видео).

Продвигаемый опрос

• при добавлении опросов к одному продвигаемому изображению рекомендуется соотношение 1,91: 1
• При добавлении опросов к одному продвигаемому видео рекомендуется соотношение 16: 9

Немногие бренды еще использовали изображения с продвигаемыми опросами, но этот тип взаимодействия может быть весьма ценным для привлечения внимания. Делая опросы, убедитесь, что вы сопоставляете их с изображением или видео подходящего размера.

размеров изображений в Instagram в 2021 году

размеров изображений в Instagram в течение 2020 года сильно изменились! Итак, давайте посмотрим, каковы размеры истории Instagram, размер изображения профиля Instagram и размер фотографии Instagram.

Размер изображения профиля Instagram

Размер изображения: минимум 110 x 110 пикселей (соотношение сторон 1: 1)

Размер изображения профиля Instagram будет уменьшен до миниатюрного размера, который будет отображаться рядом с вашими комментариями или в ленте Instagram выше опубликованные вами фотографии. Размер фото в Instagram для этого типа, отображаемый полностью в вашем профиле, должен иметь соотношение сторон 1: 1.

Как и в Facebook и Twitter, изображение вашего профиля будет обведено кружком.

Размер фото в Instagram для сетки

Размеры изображения: пейзаж 1080 x 566 пикселей, портрет 1080 x 1350 пикселей, рекомендуется квадрат 1080 x 1080 пикселей (рекомендуется от 1.91: 1 и 4: 5)

Убедиться, что ваши фотографии отображаются правильно, жизненно важно, если вы хотите, чтобы ваш бренд преуспел в Instagram!

Можно выбрать один из трех размеров фото Instagram: Пейзаж, Портрет или Квадрат. Максимальная ширина каждого из них — 1080 пикселей, поэтому любое превышение будет обрезано.

Размеры историй в Instagram

Истории: 1080 x 1920 пикселей, соотношение сторон от 16: 9 до 4: 5 или 9:16 (1,911: 1 для динамической рекламы). Безопасная зона 1080 x 1420 пикселей

При создании историй в Instagram очень важно помнить о так называемой безопасной области (1080 x 1420 пикселей) с точки зрения размеров историй в Instagram.

Когда вы публикуете истории в своем профиле, вы должны оставлять поля (около 15%) вверху (где отображается ваш ник) и внизу (где находятся кнопки навигации). Таким образом, ваши креативы точно не будут скрыты, и ваша аудитория сможет их лучше узнать. Помните об этом при настройке размеров истории в Instagram.

Основные моменты Instagram Stories

Размеры: рекомендуется 1080 x 1920 пикселей, квадрат 864 x 864 пикселей (в центре изображения)

Основные моменты Instagram Stories похожи на Instagram Stories, но они не исчезают через 24 часа после сохранения в свой профиль.

Они действуют как коллекция историй Instagram, которые ваши подписчики или любой, кто посещает ваш профиль, если он общедоступный, могут прослушивать и смотреть в любое время.

Самая важная часть изображения должна быть в центре, так как она будет отображаться в виде миниатюры над вашей лентой Instagram.

IGTV

Размеры видео: 1080 x 1920 пикселей (соотношение сторон 9:16) в файлах 720p MP4, продолжительность от 15 секунд до 1 часа

Если вы работаете в IGTV, вам может быть интересно, какие требования предъявляются к видео.Вы можете создавать их с соотношением сторон 16: 9 по горизонтали или 9:16 по вертикали, не превышая по длине час.

Рекомендуемый размер обложек для ваших видео IGTV — 420 x 654 пикселей (соотношение сторон 1: 1,55). В настоящее время вы не можете редактировать обложку после того, как она была загружена.

Instagram Reels

Размеры: 9:16 (1080 X 1920) или вертикальный полноэкранный

Instagram Reels отображаются для подписчиков вашего профиля и, если у вас есть общедоступный аккаунт, для людей, которые еще не подписаны на него.Если вы уже используете TikTok, то при первом просмотре Instagram Reels у вас, вероятно, сложится впечатление, что TikTok и новая функция Instagram выглядят очень похоже; вы записываете видео и смотрите их точно так же.

Bonus — загрузите нашу бесплатную инфографику о размерах изображений в социальных сетях в формате PDF. Подпишитесь на нашу рассылку и никогда больше не пропустите подобный контент.

Размер изображения LinkedIn 2021

Есть еще несколько форматов LinkedIn, которые вы можете использовать при общении в 2021 году.Давайте взглянем!

Размер фотографии профиля LinkedIn

Размеры изображения: от 400 x 400 пикселей до 7680 x 4320 пикселей (в файлах PNG / JPG с максимальным размером 8 МБ)

LinkedIn — это профессиональная онлайн-платформа для деловых сетей, поэтому ваша фотография профиля должна отображаться ваши профессиональные качества. Он будет отображаться на видном месте в вашем профиле LinkedIn, а также рядом с любыми сообщениями, статьями публикации LinkedIn, комментариями или репостами, размещенными из вашей учетной записи.

Фотография профиля LinkedIn будет обведена так же, как и вышеупомянутые платформы.

Личная обложка LinkedIn

Размеры изображения: рекомендуется 1584 × 396 пикселей (соотношение сторон 4: 1) в файлах PNG / JPG / GIF с максимальным размером 8 МБ

Ваша обложка будет видна всем, кто посетит ваш профиль.

Вы можете использовать различный контент, чтобы заполнить это пространство, включая логотип вашей компании, стоковые фотографии бизнеса или просто случайный фон.

Убедитесь, что ваша обложка имеет запас прочности в нижнем левом углу, который обычно перекрывается фотографией профиля LinkedIn.

Размер фотографии профиля компании LinkedIn

Размеры изображения: рекомендуется 300 × 300 пикселей

Фотография профиля компании будет отображаться на странице компании и рядом с любыми публикациями, которыми она поделилась.

Кроме того, он также появится в разделе «Компании, за которыми вы можете следить» и в результатах поиска (что полезно, если есть несколько компаний с одинаковым названием).

Однако, в отличие от личных профилей, фотография профиля компании не круглая, а прямоугольная.

Размер обложки компании LinkedIn

Размеры изображения: рекомендуется 1128 x 191 px

Фотографии обложки компании отображаются вверху страниц компании как своего рода визитная карточка. Следовательно, они должны быть профессиональными, так как они могут произвести первое впечатление о компании у зрителей и потенциально побудить их подписаться на эту страницу компании.

Размер сообщения с фотографией в LinkedIn

Размеры изображения: 1200 x 627 пикселей (соотношение сторон 1,91: 1) на мобильном устройстве, минимальная ширина 200 пикселей

Изображения, опубликованные в сообщениях, либо прикрепляются к ссылкам, либо загружаются как сообщения.Их размер должен составлять 1200 x 628 пикселей, но минимальная ширина составляет 200 пикселей, если изображение меньше.

Изображения в LinkedIn могут помочь вашей потенциальной аудитории легче идентифицировать ваши сообщения, поэтому публикации с фотографиями в Linkedin должны быть неотъемлемой частью вашей стратегии публикации.

Размер видео в LinkedIn

Размеры видео: разрешение от 256 x 144 пикселей до 4096 x 2304 пикселей (в файлах размером от 75 КБ до 5 ГБ, кроме AVI / QuickTime / MOV), продолжительность от 3 с до 10 минут, от 10 до 60 частота кадров в секунду, битрейт от 192 кбит / с до 30 Мбит / с.

Видео, которые становятся все более популярными в LinkedIn, могут повысить ваш охват и повысить профессиональный уровень. LinkedIn поддерживает только определенные форматы видео, поэтому вам может потребоваться преобразовать существующие файлы.

Размер историй LinkedIn

Размеры изображений: 1080 x 1920 пикселей (соотношение сторон 9:16) рекомендуется (JPEG / PNG)

LinkedIn представила новый формат историй LinkedIn в 2020 году. Они напоминают истории Instagram с точки зрения обеих функций и размер. Вы можете использовать одни и те же креативы в Instagram и LinkedIn, если они подходят для обоих профилей.

LinkedIn Stories могут помочь вам создать личный бренд и увеличить охват целевой аудитории. Они пока не так широко используются, так что самое время проявить себя!

Размеры изображений Pinterest 2021

Мы обнаружили несколько небольших отличий, когда дело доходит до размеров изображений Pinterest в 2021 году — посмотрите, что изменилось!

Размер фотографии профиля Pinterest

Размеры изображения: отображается 165 x 165 пикселей (в файлах JPG / PNG с максимальным размером 10 МБ)

В Pinterest изображение профиля отображается как при предварительном просмотре профиля, так и рядом с каждой размещаемой вами булавкой .Изображение также обведено кружком на Pinterest, поэтому имейте в виду, что углы будут обрезаны.

Размер булавки Pinterest

Размеры изображения: рекомендуется 1000 x 1500 пикселей (соотношение сторон 2: 3), квадратные значки 1000 x 1000 пикселей, максимальный размер 20 МБ.

Булавки — это фрагменты контента, которые вы публикуете на своей доске. У них должно быть соотношение сторон 2: 3, чтобы изображения с большим соотношением сторон могли обрезаться в лентах пользователей.

Pinterest Размер вывода видео

Размеры видео: стандартная ширина от 1: 2 до 1.Соотношение сторон 91: 1 с квадратным (1: 1) или вертикальным (2: 3 или 9:16) рекомендуется, продвигаемые видео с максимальной шириной имеют максимальную высоту с соотношением сторон 1: 1, файлы MP4 / MOV / M4V с H.264 / H .265 кодирование максимального размера 2 ГБ, продолжительность от 4 с до 15 минут

Знаете ли вы, что вы можете загружать и продвигать видеоклипы на Pinterest? Поскольку Pinterest изобилует фотографиями, видео могут иметь значение. Помните о правильном соотношении сторон, так как оно отличается для видео стандартной ширины и продвигаемых видео максимальной ширины.

Pinterest размер продвигаемых каруселей

Размеры изображений: рекомендуется 1000 x 1500 пикселей или 1000 x 1000 пикселей (соотношение сторон 2: 3 или 1: 1) (в файлах PNG / JPEG с максимальным размером 32 МБ), от 2 до 5 изображений на карусель

Вы также можете продемонстрировать свою работу с помощью сообщений карусели.В Pinterest вы ограничены пятью изображениями вместо десяти, в Facebook, при этом размер каждой фотографии больше на первом. Рекомендуются квадратные изображения, но вы также можете использовать прямоугольники.

Фотография обложки профиля Pinterest

Размеры изображения: соотношение сторон 16: 9 (обрезка или панорамирование), минимум 800 x 450 пикселей

Pinterest — еще один сайт, на который вы должны загрузить изображение профиля! Хотя у него есть свои рекомендуемые размеры, подойдет любое изображение с соотношением сторон 16: 9.

Размеры изображений YouTube 2021

Изображения? На ютубе? Да все верно! Следует помнить о нескольких размерах изображений на YouTube.

Размер фотографии профиля YouTube

Размеры изображения: рекомендуется 800 × 800 пикселей (в файлах JPG / BMP / PNG / неанимированных GIF), рендеринг фотографий 98 x 98 пикселей

Убедитесь, что фотография вашего профиля на YouTube четкая и актуально для бренда. Он будет отображаться рядом с каждым комментарием и представлением в предварительном просмотре вашего канала. GIF-файлы разрешены, только если они статичны.

Размер обложки YouTube

Размеры изображения: рекомендуется 2560 x 1440 пикселей (соотношение сторон 16: 9), минимум 2048 x 1152 пикселей, безопасная область 1235 x 338 пикселей, максимальный размер 6 МБ

Отображается только обложка YouTube при переходе по ссылке на страницу вашего канала.

Зрителя могут побуждать к просмотру других видеороликов, если фотография на обложке привлекает внимание и несет особое сообщение.

Убедитесь, что ваш текст и логотипы не накладываются друг на друга, чтобы их было легко увидеть на всех устройствах.

Размеры изображений Snapchat 2021

Как у Snapchat будут дела в 2021 году? Есть несколько брендов, которые по-прежнему сильны на этой платформе, поэтому стоит упомянуть лучшие размеры изображений Snapchat.

Размер изображения Snapchat Stories и размер изображения рекламы Snapchat

Размеры изображения: 1080 × 1920 пикселей (соотношение сторон 9:16), безопасные поля 150 пикселей, максимальный размер 5 МБ

Размеры видео: продолжительность от 3 до 180 секунд, 1 ГБ максимальный размер

Snapchat Stories публикуются в вашей ленте как фото, так и видео.

Запас прочности вверху и внизу историй — это хорошая практика, как и для других социальных сетей.

Переместите содержимое к центру, чтобы важные элементы не закрывались значками или псевдонимами.

Снимки с фильтром Snapchat

Размеры изображения: 1080 x 2340 пикселей (файлы PNG с прозрачным фоном с максимальным размером 300 КБ), буферная зона 310 пикселей вверху и внизу

При создании изображений с фильтрами обратите особое внимание на размер буферная зона вверху и внизу.Если вы не будете оставаться в «зоне безопасности», ваш фильтр может оказаться неэффективным или непривлекательным.

Также не забудьте сохранить изображения фильтров как PNG с прозрачным фоном!

Размеры изображений TikTok 2021

Многие видео TikTok стали вирусными в 2020 году, развлекая миллионы и изменив жизнь создателей. Неудивительно, что другие хотят пойти по их стопам. Однако им сначала нужно знать последние размеры изображений для TikTok!

Размер фотографии профиля TikTok

Размеры изображения: соотношение сторон 1: 1

Фотографии профиля появляются как в вашем профиле, так и в ваших комментариях TikTok.Имейте в виду, что если кто-то встраивает ваше видео TikTok на свой веб-сайт или делится им в социальных сетях, тогда ваша фотография профиля также может отображаться, поэтому вы должны поддерживать ее как можно более чистой.

Размер видео TikTok

Размеры видео: 720 × 1280 пикселей / 640 x 640 пикселей / 1280 × 720 пикселей (соотношение сторон 9:16 / 1: 1/16: 9), максимальный размер 500 МБ

TikTok предоставляет своим пользователям гибкость в отношении ширины и высоты их видео, но им нужно быть осторожными с ограничениями размера 287 МБ на iOS и только 72 МБ на Android.

Это может быть сложно, поэтому всегда следует проверять размер файла перед редактированием и загрузкой, особенно если видео высокого качества или содержит различные эффекты.

Размер графического объявления TikTok

Размеры изображения: рекомендуется 1200 x 628 пикселей (соотношение сторон 1,91: 1) (в файлах JPG / PNG с максимальным размером 500 КБ)

В фиде «Для вас» в TikTok есть графические объявления.

Здесь также действуют запасы прочности. Рекомендуется размещать некоторые креативные элементы ближе к середине объявления, иначе описание и логотип могут перекрывать их.

Чем легче, тем лучше! Старайтесь делать изображения как можно меньше, чтобы ускорить загрузку.

Кроме того, если вы хотите запускать видеорекламу, вот самая последняя и расширенная спецификация прямо из TikTok.

Размеры изображений в Tumblr 2021

И последнее, но не менее важное: Tumblr! Давайте посмотрим, как будут выглядеть размеры изображений в Tumblr в 2021 году.

Размер фотографии профиля в Tumblr

Размеры изображения: отображается 128 x 128 пикселей (JPG / GIF / PNG / BMP)

Изображения профиля в Tumblr имеют квадратную форму, поэтому у вас нет слишком много суетиться.Изображение вашего профиля будет отображаться в виде эскиза на вашей странице в Tumblr и на всей платформе.

Размер публикации в Tumblr

Размеры изображения: отображаемое 500 x 750 пикселей, максимальный размер 10 3 МБ (3 МБ для анимированных GIF-файлов), максимальная ширина 540 пикселей

Фотографии, опубликованные на Tumblr, должны быть прямоугольными, шириной 540 пикселей и меньше 10 МБ.