Определение сопротивления по полоскам. Тест-полоски MIC для определения чувствительности бактерий к антибиотикам: принцип работы и применение

Что такое тест-полоски MIC и как они работают. Как правильно использовать тест-полоски MIC для определения чувствительности бактерий к антибиотикам. Какие преимущества и недостатки имеют тест-полоски MIC по сравнению с другими методами.

Содержание

Что представляют собой тест-полоски MIC и для чего они используются

Тест-полоски MIC (Minimum Inhibitory Concentration) — это специальные диагностические инструменты, используемые в микробиологических лабораториях для определения минимальной ингибирующей концентрации антибиотиков против бактерий. Они позволяют количественно оценить чувствительность микроорганизмов к различным антимикробным препаратам.

Основные цели применения тест-полосок MIC:

Определение оптимальной дозировки антибиотика для лечения конкретной инфекции
Выявление устойчивых штаммов бактерий
Мониторинг развития антибиотикорезистентности
Подбор наиболее эффективного антибиотика для терапии

Тест-полоски MIC позволяют быстро и точно оценить чувствительность бактерий к антибиотикам, что крайне важно для назначения эффективного лечения инфекционных заболеваний.

Принцип работы тест-полосок MIC

Как устроены и функционируют тест-полоски MIC? Принцип их работы основан на градиенте концентрации антибиотика:

Полоска представляет собой тонкую пластиковую ленту
На одной стороне нанесена шкала концентраций антибиотика
На другой стороне создан стабильный градиент концентрации препарата
При помещении на агар антибиотик диффундирует в среду
Формируется эллипс ингибирования роста бактерий
Точка пересечения края эллипса и шкалы показывает значение MIC

Таким образом, тест-полоски позволяют визуально определить минимальную концентрацию антибиотика, подавляющую рост бактерий. Это дает количественную оценку чувствительности микроорганизма к препарату.

Процедура проведения теста с использованием MIC-полосок

Как правильно выполнить исследование с помощью тест-полосок MIC? Процедура включает следующие основные этапы:

Приготовление суспензии тестируемых бактерий
Нанесение суспензии на поверхность агара
Аккуратное размещение MIC-полоски на засеянном агаре
Инкубация в течение 18-24 часов
Считывание результатов по шкале на полоске

При проведении теста важно соблюдать стерильность и точно следовать протоколу. Правильная техника нанесения полоски обеспечивает формирование четкого эллипса ингибирования и получение достоверных результатов.

Интерпретация результатов теста с MIC-полосками

Как правильно расшифровать результаты, полученные с помощью тест-полосок MIC? Основные принципы интерпретации:

Значение MIC определяется в точке пересечения края зоны ингибирования и шкалы на полоске

Чем ниже значение MIC, тем выше чувствительность бактерий к антибиотику
Полученное значение MIC сравнивают с пороговыми концентрациями для данного препарата
На основе сравнения определяют категорию чувствительности: чувствительный, промежуточный или устойчивый штамм

Важно учитывать особенности роста конкретных видов бактерий при интерпретации. Для корректной оценки результатов необходим опыт работы с MIC-полосками.

Преимущества и недостатки метода тест-полосок MIC

Какие плюсы и минусы имеет метод определения чувствительности с помощью MIC-полосок по сравнению с другими подходами?

Основные преимущества:

Простота и удобство использования
Быстрое получение результатов (18-24 часа)
Возможность количественной оценки чувствительности
Высокая воспроизводимость результатов
Экономия реагентов и материалов

Основные недостатки:

Высокая стоимость тест-полосок
Ограниченный набор тестируемых антибиотиков
Сложность интерпретации для некоторых комбинаций бактерия-антибиотик
Меньшая точность по сравнению с методом микроразведений

Несмотря на определенные ограничения, тест-полоски MIC остаются удобным и широко применяемым методом оценки антибиотикочувствительности в клинических лабораториях.

Сравнение тест-полосок MIC с другими методами определения чувствительности

Как соотносятся результаты, полученные с помощью MIC-полосок, с данными других методов? Проведенные исследования показывают:

Хорошая корреляция с референтным методом микроразведений в бульоне (>90% согласия)
Более высокая точность по сравнению с диско-диффузионным методом
Сопоставимые результаты с автоматизированными системами определения чувствительности
Возможны расхождения для отдельных комбинаций бактерия-антибиотик

При этом тест-полоски MIC обеспечивают оптимальное сочетание простоты использования и точности результатов для рутинного применения в клинических лабораториях.

Области применения тест-полосок MIC в клинической практике

Где наиболее эффективно использование метода MIC-полосок в реальной клинической практике? Основные области применения включают:

Диагностика инфекций, вызванных полирезистентными бактериями
Подбор терапии при тяжелых и хронических инфекциях
Мониторинг антибиотикорезистентности в стационаре
Исследование новых антибактериальных препаратов
Определение чувствительности медленно растущих бактерий

Тест-полоски MIC особенно полезны в случаях, когда требуется точная количественная оценка чувствительности или при работе с проблемными штаммами бактерий.

Перспективы развития метода тест-полосок MIC

Какие тенденции наблюдаются в совершенствовании технологии MIC-полосок? Основные направления развития метода:

Расширение спектра тестируемых антибиотиков
Создание комбинированных тест-полосок для оценки синергизма
Разработка экспресс-форматов с сокращенным временем инкубации
Автоматизация учета и интерпретации результатов
Интеграция с системами поддержки принятия клинических решений

Дальнейшее совершенствование технологии MIC-полосок позволит повысить эффективность и расширить возможности их применения в клинической микробиологии.

Тест-полоска

MIC | Этест | Принцип

Francais

Полоски MIC позволяют количественно определять минимальные ингибирующие концентрации (MIC) антибиотиков/противогрибковых препаратов против бактерий/грибков, а также обнаруживать механизмы резистентности.

Полоски для МИК представляют собой специальные бумажные полоски, пропитанные предопределенными градиентами концентрации антибиотика (охватывающие 15 двойных разведений, как для традиционных методов МИК).

Principle

Это тонкая, инертная, непористая пластиковая полоска со шкалой МИК в г/мл на одной стороне и заданным градиентом антибиотика на другой стороне.

При нанесении на засеянную поверхность агара предварительно сформированный градиент антибиотика немедленно переносится на агар, образуя стабильный, непрерывный и экспоненциальный градиент концентрации антибиотика под полоской.

Пример:

Etest® : разработан компанией AB Biodisk, Сольна, Швеция, и в настоящее время продается компанией bioMérieux,
Тест-полоска MIC Test Strip® : разработана LIOFILCHEM, Италия

Процедура

должны быть получены после инкубации).

❷ Окуните стерильный тампон в суспензию инокулята и прижмите его к стенке пробирки, чтобы удалить лишнюю жидкость.

❸ Дайте лишней влаге впитаться, чтобы поверхность полностью высохла (15–20 минут) перед нанесением полосок CMI.

❹ Нанесите полоску на поверхность агара шкалой вверх и кодом полоски, обращенным к внешней стороне планшета, прижимая ее стерильными щипцами к поверхности агара и обеспечивая полный контакт градиента антибиотика по всей длине. с агаровой поверхностью. После нанесения не двигайте ленту.

❺ Если под полоской остались пузырьки воздуха, осторожно переместите их к краю с помощью стерильных щипцов, стараясь не перемещать полоску по агару. При удалении пузырьков воздуха начните с самой низкой концентрации и постепенно увеличивайте ее.

❻ Инкубируйте чашки с агаром в перевернутом положении при 35 ± 2 °C.

❼ После 18 часов инкубации или более формируется симметричный эллипс ингибирования с центром вдоль полоски. МИК считывается непосредственно со шкалы г/мл в точке, где край эллипса ингибирования пересекает тест-полоску МИК.

Чтение полосок CMI

После 18 часов инкубации или более формируется симметричный эллипс ингибирования с центром вдоль полоски. МИК считывается непосредственно со шкалы г/мл в точке, где край эллипса ингибирования пересекает тест-полоску МИК.

Считайте большее значение между двумя

Влажная поверхность, деформированный эллипс, повторите тест

В случае неравномерных результатов. Прочитайте верхнее значение. Повторить тест, если разница составляет > 1 разведения

Игнорировать линию роста вдоль полоски

Считать, если изолированные резистентные колонии полностью подавлены spp : игнорировать гемолиз

Полоска перевернута : Недействительно (повторите тест)

сообщите об этом объявлении

Ссылки:

— Журнал клинической микробиологии : Первая всесторонняя оценка устройства для оценки МИК

— Технический лист тест-полоски МИК GRD — MTS28 — Ред. 2.1 / 11.04.2016

— ETEST® РУКОВОДСТВО ДЛЯ ЧТЕНИЯ: AB BIODISK

— Полоски Thermo Scientific™ Oxoid™ M. I.C.Evaluator™ (M.I.C.E.™) Пошаговое руководство

— Тест-полоска MIC Патент Италии №. 1395483, заявка на международный патент

сообщите об этом объявлении

— www.biomerieux-usa.com • @biomerieuxUSA

— Тест-полоска MIC для определения чувствительности к противомикробным препаратам энтеробактерии

Сохранить цитату в файл

Формат: Резюме (текст)PubMedPMIDAbstract (текст)CSV

Добавить в коллекции

Создать новую коллекцию
Добавить в существующую коллекцию

Назовите свою коллекцию:

Имя должно содержать менее 100 символов

Выберите коллекцию:

Невозможно загрузить вашу коллекцию из-за ошибки
Повторите попытку

Добавить в мою библиографию

Моя библиография

Не удалось загрузить делегатов из-за ошибки
Повторите попытку

Ваш сохраненный поиск

Название сохраненного поиска:

Условия поиска:

Тестовые условия поиска

Эл. адрес: (изменить)

Который день? Первое воскресеньеПервый понедельникПервый вторникПервая средаПервый четвергПервая пятницаПервая субботаПервый деньПервый будний день

Который день? ВоскресеньеПонедельникВторникСредаЧетвергПятницаСуббота

Формат отчета: SummarySummary (text)AbstractAbstract (text)PubMed

Отправить максимум: 1 шт. 5 шт. 10 шт. 20 шт. 50 шт. 100 шт. 200 шт.

Отправить, даже если нет новых результатов

Необязательный текст в электронном письме:

Создайте файл для внешнего программного обеспечения для управления цитированием

Полнотекстовые ссылки

Эльзевир Наука

Полнотекстовые ссылки

2022 авг;28(8):1156.e1-1156.e5.

doi: 10.1016/j.cmi.2022.04.013. Epub 2022 6 мая.

Реми А. Боннен ¹ , Сесиль Эмеро ² , Аньес Б. Жуссе ² , Тьерри Наас ² , Лоран Дорте ³

Принадлежности

¹ Команда «Resist» UMR1184 «Иммунология вирусных, аутоиммунных, гематологических и бактериальных заболеваний (IMVA-HB), INSERM, Университет Париж-Сакле, медицинский факультет, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция; Associated French Национальный справочный центр по устойчивости к антибиотикам: энтеробактерии, продуцирующие карбапенемазы, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция.
² Команда «Resist» UMR1184 «Иммунология вирусных, аутоиммунных, гематологических и бактериальных заболеваний (IMVA-HB), INSERM, Университет Париж-Сакле, медицинский факультет, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция; ассоциированный французский национальный справочник Центр антибиотикорезистентности: энтеробактерии, продуцирующие карбапенемазы, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция, Отделение бактериологии и гигиены, больница Бисетр, Служба общественной помощи парижских госпиталей, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция 9.0027
³ Команда «Resist» UMR1184 «Иммунология вирусных, аутоиммунных, гематологических и бактериальных заболеваний (IMVA-HB), INSERM, Университет Париж-Сакле, медицинский факультет, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция; ассоциированный французский национальный справочник Центр антибиотикорезистентности: энтеробактерии, продуцирующие карбапенемазы, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция; Отделение бактериологии и гигиены, Больница Бисетр, Служба общественной помощи парижских больниц, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция Электронный адрес: laurent. [email protected]

PMID: 35533970
DOI: 10.1016/j.cmi.2022.04.013

Реми А. Боннин и др. Клин Микробиол Инфект. 2022 авг.

. 2022 авг;28(8):1156.e1-1156.e5.

doi: 10.1016/j.cmi.2022.04.013. Epub 2022 6 мая.

Авторы

Реми А. Боннен ¹ , Сесиль Эмеро ² , Аньес Б. Жуссе ² , Тьерри Наас ² , Лоран Дорте ³

Принадлежности

¹ Команда «Resist» UMR1184 «Иммунология вирусных, аутоиммунных, гематологических и бактериальных заболеваний (IMVA-HB), INSERM, Университет Париж-Сакле, медицинский факультет, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция; Associated French Национальный справочный центр по устойчивости к антибиотикам: энтеробактерии, продуцирующие карбапенемазы, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция.
² Команда «Resist» UMR1184 «Иммунология вирусных, аутоиммунных, гематологических и бактериальных заболеваний (IMVA-HB), INSERM, Университет Париж-Сакле, медицинский факультет, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция; ассоциированный французский национальный справочник Центр антибиотикорезистентности: энтеробактерии, продуцирующие карбапенемазы, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция, Отделение бактериологии и гигиены, больница Бисетр, Служба общественной помощи парижских госпиталей, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция 9.0027
³ Команда «Resist» UMR1184 «Иммунология вирусных, аутоиммунных, гематологических и бактериальных заболеваний (IMVA-HB), INSERM, Университет Париж-Сакле, медицинский факультет, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция; ассоциированный французский национальный справочник Центр антибиотикорезистентности: энтеробактерии, продуцирующие карбапенемазы, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция; Отделение бактериологии и гигиены, Больница Бисетр, Служба общественной помощи парижских больниц, Ле-Кремлен-Бисетр, Франция Электронный адрес: laurent. [email protected]

PMID: 35533970
DOI: 10.1016/j.cmi.2022.04.013

Абстрактный

Цели: Цефидерокол представляет собой катехол-замещенный цефалоспорин, предназначенный для лечения инфекций, вызванных грамотрицательными палочками с множественной лекарственной устойчивостью. Тест на чувствительность к цефидероколу может быть сложным. Мы сравнили методы тестирования чувствительности к цефидероколу на соответствующей коллекции устойчивых к карбапенемам энтеробактерий.

Методы: CE-IVD (европейская маркировка CE, необходимая для всех диагностики in vitro (IVD)) планшет для микроразбавления бульона (BMD) (ThermoFisher, Уолтем, Массачусетс, США) с использованием обычного бульона Мюллера-Хинтона, тест-полоски MIC (Liofilchem, Teramo, Италия), и дисковую диффузию (Liofilchem) сравнивали с замороженным планшетом BMD, приготовленным с обедненным железом бульоном Мюллера-Хинтона. Сначала для сравнения этих методов использовали коллекцию из 100 полностью секвенированных устойчивых к карбапенемам энтеробактерий. Затем было проведено проспективное сравнение дисковой диффузии и МПК CE-IVD на 827 последовательных нечувствительных к карбапенему энтеробактериях, включая 634 продуцента карбапенемазы.

Результаты: По сравнению с эталонным методом пластина CE-IVD BMD дала 95,0% (95% ДИ, 88,8-97,9) согласие классификации (CA), 2,8% (95% ДИ, 0,4-14,2) очень большие ошибки (VME) и 1,6% ( 95% ДИ, 0,3-8,7) основные ошибки (ME) с высокой воспроизводимостью. Полоска МИК дала только 63% (95% ДИ, 53,2–71,8) ХА и 94,9% (95% ДИ, 83,1–98,6) ВМЭ из-за критической недооценки МИК. Дисковая диффузия дала 77% (95% ДИ, 67,9-84,2) CA с дополнительными 8% изолятов в области технической неопределенности 18-22 мм. Перспективно дисковая диффузия дала 81,7% (95% ДИ, 79,0–84,2) СА, 23,3% (95% ДИ, 15,1–34,2%) ВМЭ и 4,9% (95% ДИ, 3,6–6,7) МЭ. Кроме того, 21,3% (95% ДИ, 18,6-24,2) CRE находились в области технической неопределенности.

Обсуждение: Коммерческий CE-IVD BMD (ThermoFisher) является точным для определения МИК цефидерокола у трудно поддающихся лечению энтеробактерий, тогда как тест-полоски МИК (Liofilchem), которые были разработаны только для Pseudomonas aeruginosa, следует избегать. Дисковое распространение может быть полезно для скрининга, но многие из этих CRE должны быть повторно протестированы с использованием BMD для оценки окончательной категоризации.

Ключевые слова: карбапенемаза; грамотрицательные; КПК; НДМ; ОХА-48; тестирование чувствительности; ВИМ.

Цитируется

Анализ активности цефидерокола in vitro в отношении устойчивых к карбапенему грамотрицательных бацилл методом микроразведений в бульоне и методом диффузии в диск: одноцентровое исследование в Одише, Индия.
Наяк Г., Бехера Б., Моханти С., Кар П., Джена Дж. Наяк Г. и соавт. Заразить устойчивостью к наркотикам. 2022 10 октября; 15: 5887-5897. doi: 10.2147/IDR.S378579. Электронная коллекция 2022. Заразить устойчивостью к наркотикам. 2022. PMID: 36237292 Бесплатная статья ЧВК.
Антибактериальный спектр цефидерокола.
Хихон Кордеро Д., Кастильо-Поло Х.А., Руис-Гарбахоса П., Кантон Р. Хихон Кордеро Д. и др. Преподобный Эсп Кимиотер. 2022 Сентябрь; 35 Дополнение 2 (Приложение 2): 20-27. doi: 10.37201/req/s02.03.2022. Epub 2022 4 октября. Преподобный Эсп Кимиотер. 2022. PMID: 36193981 Бесплатная статья ЧВК. Обзор.
Фаговые плазмиды распространяют гены устойчивости к антибиотикам посредством инфекции и лизогенной конверсии.
Пфайфер Э., Боннин Р.А., Роча Е.П.С. Пфайфер Э. и др. мБио. 2022 26 октября; 13 (5): e0185122. doi: 10.1128/mbio.01851-22. Epub 2022 26 сентября. мБио. 2022. PMID: 36154183 Бесплатная статья ЧВК.