Стабилитрон Д817В: характеристики, применение и аналоги

Каковы основные параметры стабилитрона Д817В. Для чего используется этот стабилитрон. Какие есть аналоги Д817В. Как правильно применять стабилитрон Д817В в схемах.

Основные характеристики стабилитрона Д817В

Стабилитрон Д817В относится к кремниевым диффузионно-сплавным стабилитронам средней мощности. Основные параметры данного стабилитрона:

• Напряжение стабилизации: 74-90 В при токе стабилизации 50 мА
• Максимальный ток стабилизации: 60 мА
• Минимальный ток стабилизации: 5 мА
• Максимальная рассеиваемая мощность: 5 Вт
• Дифференциальное сопротивление: не более 45 Ом
• Температурный коэффициент напряжения: 0,14%/°C
• Рабочий диапазон температур: от -60°C до +120°C

Стабилитрон выпускается в металлостеклянном корпусе с жесткими выводами. Масса прибора с комплектующими деталями не превышает 6 г.

Назначение и область применения Д817В

Основное назначение стабилитрона Д817В — стабилизация напряжения в различных электронных схемах. Наиболее часто он используется в следующих случаях:

• Параметрические стабилизаторы напряжения
• Источники опорного напряжения
• Ограничители амплитуды сигналов
• Генераторы стабильного напряжения
• Схемы защиты от перенапряжений

Благодаря высокой стабильности параметров, Д817В часто применяется в измерительной аппаратуре, системах автоматики и контрольно-измерительных приборах.

Особенности применения стабилитрона Д817В

При использовании стабилитрона Д817В необходимо учитывать следующие особенности:

• Корпус стабилитрона является катодом, поэтому его следует изолировать от шасси
• Требуется обеспечить эффективный теплоотвод, например, при помощи радиатора
• Не допускается превышение максимально допустимого тока стабилизации
• Рекомендуется использовать последовательно включенный токоограничивающий резистор
• При параллельном соединении стабилитронов необходимо применять выравнивающие резисторы

Правильное применение этих рекомендаций позволит обеспечить надежную и долговременную работу стабилитрона в схеме.

Аналоги стабилитрона Д817В

Среди отечественных стабилитронов близкими аналогами Д817В являются:

• Д817Б — напряжение стабилизации 61-75 В
• Д817Г — напряжение стабилизации 90-110 В
• 2С168А — напряжение стабилизации 75-85 В

Из импортных стабилитронов можно отметить следующие аналоги:

• 1N4040 — американский аналог с аналогичными параметрами
• BZX79-C82 — стабилитрон на напряжение 82 В
• 1N5378B — стабилитрон на 87 В

При замене Д817В на аналог необходимо тщательно сверить основные электрические и тепловые параметры приборов.

Типовая схема включения Д817В

Рассмотрим простейшую схему параметрического стабилизатора напряжения на стабилитроне Д817В:

«` graph LR A[Вход +U] —> B[R1] B —> C[Д817В] C —> D[Выход Uст] D —> E[Нагрузка RL] E —> F[Общий] C —> F A —> G[Uвх = 100-120 В] D —> H[Uвых = 82 В] B —> I[R1 = 1 кОм] «`

В данной схеме:

• R1 — токоограничивающий резистор
• Д817В — стабилитрон
• RL — нагрузка

При входном напряжении 100-120 В на выходе схемы формируется стабилизированное напряжение около 82 В. Ток через стабилитрон не должен превышать 60 мА.

Измерение параметров стабилитрона Д817В

Для проверки работоспособности и измерения основных параметров стабилитрона Д817В можно использовать следующую методику:

1. Измерение напряжения стабилизации при номинальном токе 50 мА
2. Проверка минимального и максимального токов стабилизации
3. Измерение дифференциального сопротивления
4. Проверка температурного коэффициента напряжения
5. Контроль обратного тока утечки

Все измерения следует проводить с соблюдением мер электробезопасности, не превышая предельно допустимых значений тока и напряжения.

Маркировка и внешний вид Д817В

Стабилитрон Д817В выпускается в цилиндрическом металлостеклянном корпусе. На корпусе нанесена следующая маркировка:

• Тип прибора — Д817В
• Код даты изготовления
• Цветовая маркировка катода

Габаритные размеры корпуса:

• Диаметр — 9 мм
• Высота — 14 мм
• Длина выводов — 30 мм

Вывод катода обычно короче анодного вывода и имеет цветовую маркировку.

Надежность и срок службы

Стабилитрон Д817В отличается высокой надежностью при правильной эксплуатации. Основные показатели надежности:

• Минимальная наработка — 15000 часов
• Срок сохраняемости — 25 лет
• Интенсивность отказов — не более 3·10^-6 1/ч

Для обеспечения длительного срока службы необходимо:

• Не превышать максимально допустимых электрических режимов
• Обеспечить эффективный теплоотвод
• Защитить прибор от воздействия влаги и агрессивных сред
• Исключить механические воздействия на выводы и корпус

При соблюдении указанных требований стабилитрон Д817В способен надежно работать в течение длительного времени.

Стабилитрон Д817 Д817А, Д817Б, Д817В, Д817Г

Поиск по сайту

Стабилитрон Д817 (Д817А, Д817Б, Д817В, Д817Г) — диффузионно-сплавной, кремниевый, большой и средней мощности. Основное назначение — стабилизация напряжений в диапазоне от 56 В до 100 В. Ток стабилизации имеет диапазон от 5 мА до 90 мА. Имеет жёсткие выводы и металлостеклянный корпус. На корпусе стабилитрона наносится его тип и цоколёвка. В рабочем режиме корпус стабилитрона является катодом (отрицательным выводом). С комплектующими деталями стабилитрон весит 6 г. Электрические параметры Д817 (Д817А, Д817Б, Д817В, Д817Г) Напряжение стабилизации стабилитрона Д817: при Iст = 50 мА: Д817А 50,5…56…61,5 В Д817Б 61…68…75 В Д817В 74…82…90 В Д817Г 90…100…110 В Временна´я нестабильность напряжения стабилизации, не более: при Iст = 50 мА 6 % Постоянное напряжение (прямое) при Iпр = 0,5 А, не более 1,5 В Постоянное напряжение (обратное) при Iобр = 50 мкА, не более Д817А 39 В Д817Б 47 В Д817В 57 В Д817Г 70 В Дифференциальное сопротивление, не более: при Iст = 50 мА и Т = +25°C: Д817А 35 Ом Д817Б 40 Ом Д817В 45 Ом Д817Г 50 Ом при Iст = 5 мА и Т = +25°C: Д817А, Д817Б 200 Ом Д817В, Д817Г 300 Ом при Iст = 5 мА и Т = -60 и +120°C: Д817А, Д817Б 400 Ом Д817В 600 Ом Д817Г 800 Ом Предельные характеристики стабилитрона Д817 Минимальный ток стабилизации: 5 мА Максимальный ток стабилизации: При Т ≤ +75°C: Д817А 90 мА Д817Б 75 мА Д817В 60 мА Д817Г 50 мА При Тк = +130°C: Д817А 35 мА Д817Б 30 мА Д817В, Д817Г 25 мА Прямой ток (постоянный) 1 А Перегрузка по току стабилизации в течение 1 с: При Т ≤ +75°C: Д817А 180 мА Д817Б 150 мА Д817В 120 мА Д817Г 100 мА При Тк = +130°C: Д817А 70 мА Д817Б 60 мА Д817В, Д817Г 50 мА Рассеиваемая мощность: при Т ≤ +75°C: 5 Вт при Тк = +130°C: 2 Вт Температура корпуса 130 °C Рабочая температура (окружающей среды) -60. ..+120°C

Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП

Все картинки в новостях кликабельные, то есть при нажатии они увеличиваются. Стабилитроны кремниевые диффузионные: Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП. Выпускаются в металлостеклянном корпусе с жёсткими выводами. У стабилитронов, в обозначении которых отсутствует буква П, корпус является отрицательным электродом. У стабилитронов, имеющих в обозначении букву П, полярность обратная. Масса стабилитрона не более 6 граммов. Характеристика. Чертёж стабилитрона Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП Электрические параметры Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП. Напряжение стабилизации номинальное при 24,85°С при Iст.ном=50 мА Д817А, Д817АП 56 В Д817Б, Д817БП 68 В Д817В, Д817ВП 82 В Д817Г, Д817ГП 100 В Разброс напряжения стабилизации при 24,85°С Iст=Iст.ном Д817А, Д817АП От 50,5 до 61,5 В Д817Б, Д817БП От 61 до 75 В Д817В, Д817ВП От 74 до 90 В Д817Г, Д817ГП От 90 до 110 В Средний температурный коэффициент напряжения стабилизации при температуре от -60,15 до 124,85°С, не более Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП, 0,140 %/К Временна́я нестабильность напряжения стабилизации, не более Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП, 6 % Постоянное прямое напряжение при 24,85°С, Iпр=500 мА, не более 1,5 В Постоянное обратное напряжение при 24,85°С, Iобр=50 мкА, не более Д817А, Д817АП 39 В Д817Б, Д817БП 47 В Д817В, Д817ВП 57 В Д817Г, Д817ГП 70 В Дифференциальное сопротивление, не более при 24,85°С, Iст=Iст. ном Д817А, Д817АП 35,0 Ом Д817Б, Д817БП 40,0 Ом Д817В, Д817ВП 45,0 Ом Д817Г, Д817ГП 50,0 Ом при 24,85°С, Iст=5 мА Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП 200 Ом Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП 300 Ом при -60,15 и 119,85°С, Iст=5 мА Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП 400 Ом Д817В, Д817ВП 600 Ом Д817Г, Д817ГП 800 Ом Предельные эксплуатационные данные Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП. Минимальный ток стабилизации Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП 5 мА Максимальный ток стабилизации при Тк≤74,85°С Д817А, Д817АП 90 мА Д817Б, Д817БП 75 мА Д817В, Д817ВП 60 мА Д817Г, Д817ГП 50 мА при Тк=129,85°С Д817А, Д817АП 35 мА Д817Б, Д817БП 30 мА Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП 25 мА Постоянный прямой ток 1 А Перегрузка по току стабилизации в течение 1 секунды при Тк≤74,85°С Д817А, Д817АП 180 мА Д817Б, Д817БП 150 мА Д817В, Д817ВП 120 мА Д817Г, Д817ГП 100 мА при Тк=129,85°С Д817А, Д817АП 70 мА Д817Б, Д817БП 60 мА Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП 50 мА Рассеиваемая мощность при Тк≤74,85°С Д817А, Д817АП, Д817Б, Д817БП, Д817В, Д817ВП, Д817Г, Д817ГП, 5 Вт при Тк=129,85°С 2 Вт Температура окружающей среды минимальная -60,15°С Температура перехода 139,85°С Температура корпуса 129,85°С Зависимость дифференциального сопротивления от тока Зависимость дифференциального сопротивления от тока.

Стабилитрон Д817В

Количество драгоценных металлов в стабилитроне Д817В согласно документации производителя. Справочник массы и наименований ценных металлов в советских стабилитронах Д817В.

Стабилитрон Д817В количество содержания драгоценных металлов:
Золото: 0,0004 грамм.
Серебро: 0 грамм.
Платина: 0 грамм.
Палладий: 0 грамм.
Согласно данным: .

Справочник содержания ценных металлов из другого источника:

Стабилитроны Д817В теория

Полупроводниковый стабилитрон, или диод Зенера — полупроводниковый диод, работающий при обратном смещении в режиме пробоя. До наступления пробоя через стабилитрон протекают незначительные токи утечки, а его сопротивление весьма высоко. При наступлении пробоя ток через стабилитрон резко возрастает, а его дифференциальное сопротивление падает до величины, составляющей для различных приборов от долей Ома до сотен Ом. Поэтому в режиме пробоя напряжение на стабилитроне поддерживается с заданной точностью в широком диапазоне обратных токов.

 

Прежде всего, не следует забывать, что стабилитрон работает только в цепях постоянного тока. Напряжение на стабилитрон подают в обратной полярности, то есть на анод стабилитрона будет подан минус “-“. При таком включении стабилитрона через него протекает обратный ток (I обр) от выпрямителя. Напряжение с выхода выпрямителя может изменяться, будет изменяться и обратный ток, а напряжение на стабилитроне и на нагрузке останется неизменным, то есть стабильным. На следующем рисунке показана вольт-амперная характеристика стабилитрона.

Основное назначение стабилитронов — стабилизация напряжения. Серийные стабилитроны изготавливаются на напряжения от 1,8 В до 400 В. Интегральные стабилитроны со скрытой структурой на напряжение около 7 В являются самыми точными и стабильными твердотельными источниками опорного напряжения: лучшие их образцы приближаются по совокупности показателей к нормальному элементу Вестона. Особый тип стабилитронов, высоковольтные лавинные диоды («подавители переходных импульсных помех», «суппрессоры», «TVS-диоды») применяется для защиты электроаппаратуры от перенапряжений.

Стабилитроны Д817В Принцип действия

Советские и импортные стабилитроны

Полупроводниковый стабилитрон — это диод, предназначенный для работы в режиме пробоя на обратной ветви вольт-амперной характеристики. В диоде, к которому приложено обратное, или запирающее, напряжение, возможны три механизма пробоя: туннельный пробой, лавинный пробой и пробой вследствие тепловой неустойчивости — разрушительного саморазогрева токами утечки. Тепловой пробой наблюдается в выпрямительных диодах, особенно германиевых, а для кремниевых стабилитронов он не критичен. Стабилитроны проектируются и изготавливаются таким образом, что либо туннельный, либо лавинный пробой, либо оба эти явления вместе возникают задолго до того, как в кристалле диода возникнут предпосылки к тепловому пробою. Серийные стабилитроны изготавливаются из кремния, известны также перспективные разработки стабилитронов из карбида кремния и арсенида галлия.

Первую модель электрического пробоя предложил в 1933 году Кларенс Зенер, в то время работавший в Бристольском университете. Его «Теория электического пробоя в твёрдых диэлектриках» была опубликована летом 1934 года. В 1954 году Кеннет Маккей из Bell Labs установил, что предложеный Зенером туннельный механизм действует только при напряжениях пробоя до примерно 5,5 В, а при бо́льших напряжениях преобладает лавинный механизм. Напряжение пробоя стабилитрона определяется концентрациями акцепторов и доноров и профилем легирования области p-n-перехода. Чем выше концентрации примесей и чем больше их градиент в переходе, тем больше напряжённость электрического поля в области пространственного заряда при равном обратном напряжении, и тем меньше обратное напряжение, при котором возникает пробой:

Туннельный, или зенеровский, пробой возникает в полупроводнике только тогда, когда напряжённость электрического поля в p-n-переходе достигает уровня в 106 В/см. Такие уровни напряжённости возможны только в высоколегированных диодах (структурах p+-n+-типа проводимости) с напряжением пробоя не более шестикратной ширины запрещённой зоны (6 EG ≈ 6,7 В), при этом в диапазоне от 4 EG до 6 EG (4,5…6,7 В) туннельный пробой сосуществует с лавинным, а при напряжении пробоя менее 4 EG (≈4,5 В) полностью вытесняет его. С ростом температуры перехода ширина запрещённой зоны, а вместе с ней и напряжение пробоя, уменьшается: низковольтные стабилитроны с преобладанием туннельного пробоя имеют отрицательный температурный коэффициент напряжения (ТКН).

В диодах с меньшими уровнями легирования, или меньшими градиентами легирующих примесей, и, как следствие, бо́льшими напряжениями пробоя наблюдается лавинный механизм пробоя. Он возникает при концентрациях примесей, примерно соответствующих напряжению пробоя в 4 EG (≈4,5 В), а при напряжениях пробоя выше 4 EG (≈7,2 В) полностью вытесняет туннельный механизм. Напряжение, при котором возникает лавинный пробой, с ростом температуры возрастает, а наибольшая величина ТКН пробоя наблюдается в низколегированных, относительно высоковольтных, переходах.

Механизм пробоя конкретного образца можно определить грубо — по напряжению стабилизации, и точно — по знаку его температурного коэффициента. В «серой зоне» (см. рисунок), в которой конкурируют оба механизма пробоя, ТКН может быть определён только опытным путём. Источники расходятся в точных оценках ширины этой зоны: С. М. Зи указывает «от 4 EG до 6 EG» (4,5…6,7 В), авторы словаря «Электроника» — «от 5 до 7 В»8, Линден Харрисон — «от 3 до 8 В»26, Ирвинг Готтлиб проводит верхнюю границу по уровню 10 В9. Низковольтные лавинные диоды (LVA) на напряжения от 4 до 10 В — исключение из правила: в них действует только лавинный механизм.

Оптимальная совокупность характеристик стабилитрона достигается в середине «серой зоны», при напряжении стабилизации около 6 В. Дело не столько в том, что благодаря взаимной компенсации ТКН туннельного и лавинного механизмов эти стабилитроны относительно термостабильны, а в том, что они имеют наименьший технологический разброс напряжения стабилизации и наименьшее, при прочих равных условиях, дифференциальное сопротивление. Наихудшая совокупность характеристик — высокий уровень шума, большой разброс напряжений стабилизации, высокое дифференциальное сопротивление — свойственна низковольтным стабилитронам на 3,3—4,7 В.

Область применения стабилитрона Д817В

Основная область применения стабилитрона — стабилизация постоянного напряжения источников питания. В простейшей схеме линейного параметрического стабилизатора стабилитрон выступает одновременно и источником опорного напряжения, и силовым регулирующим элементом. В более сложных схемах стабилитрону отводится только функция источника опорного напряжения, а регулирующим элементом служит внешний силовой транзистор.

Прецизионные термокомпенсированные стабилитроны и стабилитроны со скрытой структурой широко применяются в качестве дискретных и интегральных источников опорного напряжения (ИОН), в том числе в наиболее требовательных к стабильности напряжения схемах измерительных аналого-цифровых преобразователей. C середины 1970-х годов и по сей день (2012 год) стабилитроны со скрытой структурой являются наиболее точными и стабильными твердотельными ИОН. Точностные показатели лабораторных эталонов напряжения на специально отобранных интегральных стабилитронах приближаются к показателям нормального элемента Вестона.

Особые импульсные лавинные стабилитроны («подавители переходных импульсных помех», «суппрессоры», «TVS-диоды») применяются для защиты электроаппаратуры от перенапряжений, вызываемых разрядами молний и статического электричества, а также от выбросов напряжения на индуктивных нагрузках. Такие приборы номинальной мощностью 1 Вт выдерживают импульсы тока в десятки и сотни ампер намного лучше, чем «обычные» пятидесятиваттные силовые стабилитроны. Для защиты входов электроизмерительных приборов и затворов полевых транзисторов используются обычные маломощные стабилитроны. В современных «умных» МДП-транзисторах защитные стабилитроны выполняются на одном кристалле с силовым транзистором.

Маркировка стабилитронов Д817В

Маркировка стабилитронов

 

Есть информация о стабилитроне Д817В – высылайте ее нам, мы ее разместим на этом сайте посвященному утилизации, аффинажу и переработке драгоценных и ценных металлов.

Фото Стабилитрон Д817В:

Предназначение Стабилитрон Д817В.

Характеристики Стабилитрон Д817В:

Купить или продать а также цены на Стабилитрон Д817В (стоимость, купить, продать):

Отзыв о стабилитроне Д817В вы можете в комментариях ниже:

Д817В Стабилитрон 5W 74… 90 В при Iст 50 мА. Корпус КДЮ11-3

Стабилитроны Д817В кремниевые, диффузионно-сплавные, средней мощности. 
Предназначены для стабилизации напряжения. 
Выпускаются в металлостеклянном корпусе с жесткими выводами. 
Тип стабилитрона приводится на корпусе. 
Корпус стабилитрона в рабочем режиме служит отрицательным электродом (катодом).
Масса стабилитрона с комплектующими деталями не более 6 г.
Технические условия: УЖ3.362.027ТУ.

Основные технические параметры стабилитрона Д817В:
• Разброс напряжения стабилизации: 74… 90 В при Iст 50 мА;
• Температурный коэффициент напряжения стабилизации: 0,14 %/°С;
• Временная нестабильность напряжения стабилизации: ± 6 %;
• Постоянное прямое напряжение: 1,5 В при Iпр 500 мА;
• Дифференциальное сопротивление стабилитрона : 45 Ом;
• Минимально допустимый ток стабилизации: 5 мА;
• Максимально допустимый ток стабилизации: 60 мА;
• Максимально-допустимая рассеиваемая мощность на стабилитроне: 5 Вт;
• Рабочий интервал температуры окружающей среды: -60… +120 °С

Технические характеристики стабилитронов Д817А, Д817Б, Д817В, Д817Г:

Тип стабилитрона	Uст.				αUст.	Uпр. (при Iпр.)	rст.	Iст.		Рmax	Тк.max (Тп.)	Т окр.
	мин	ном	макс	Iст.ном.				мин	макс
	В	В	В	мА	%/С	В (мА)	Ом	мА	мА	Вт	°С	°С
Д817А	50,5	56	61,5	50	0,14	1,5 (500)	35	5	90	5	130	-60… +120
Д817Б	61	68	75	50	0,14	1,5 (500)	40	5	75	5	130	-60… +120
Д817В	74	82	90	50	0,14	1,5 (500)	45	5	60	5	130	-60… +120
Д817Г	90	100	110	50	0,14	1,5 (500)	50	5	50	5	130	-60… +120

Условные обозначения электрических параметров стабилитронов:

 

  • Uст.  — напряжение стабилизации стабилитрона;
  • αUст. — температурный коэффициент напряжения стабилизации стабилитрона;
  • Uпр. — постоянное прямое напряжение;
  • Iпр. — постоянный прямой ток;
  • rст. — дифференциальное сопротивление стабилитрона;
  • Iст. — ток стабилизации стабилитрона;
  • Рmax — рассеиваемая мощность стабилитрона;
  • Тк. мах — максимально-допустимая температура корпуса стабилитрона;
  • Тп. мах — максимально-допустимая температура перехода стабилитрона;
  • Т окр. — температура окружающей среды.

Стабилитрон Д817 — DataSheet

Корпус стабилитронов Д817, Д817, Д817

 

Описание

Стабилитроны кремниевые, диффузионно-сплавные, средней и большой мощности. Предназначены для стабилизации номинального напряжения 5, 6…100 В в диапазоне токов стабилизации 5 мА…1,4 А. Выпускаются в металлостеклянном корпусе с жесткими выводами. Тип стабилитрона приводится на корпусе. Корпус стабилитрона в рабочем режиме служит отрицательным электродом (катодом). Масса стабилитрона с комплектующими деталями не более 6 г.

Стабилитрон должен крепиться к теплоотводящему радиатору, обеспечивающему сохранение температуры корпуса при работе не выше +130 °С Рекомендуется применение алюминиевого радиатора черного цвета толщиной 3…4 мм, площадью не менее 100 см². При креплении стабилитрона к радиатору крутящий момент, воздействующий на вывод катода, не должен превышать 1,17 Н·м. Запрещается прилагать к анодному выводу растягивающую силу более 14,7 Н и изгибающее усилие, превышающее 7,35 Н·м в месте просечки.

Пайка анодного вывода допускается не ближе 5 мм от корпуса; время пайки не более 3 с при температуре жала паяльника не выше +280 °С.

Допускается последовательное соединение любого числа стабилитронов. Параллельное включение стабилитронов разрешается при условии, что суммарная рассеиваемая на всех стабилитронах мощность не превышает допустимую для одного стабилитрона.

 

«>

Характеристики стабилитрона Д817

Обозначение		Значение для:				Ед. изм.
		Д817А	Д817Б	Д817В	Д817Г
Аналог		—	—	—	—	—
Uст	мин.	50.5	61	74	90	В
	ном.	—	—	—	—
	макс.	61.5	75	90	110
	при Iст	50	50	«>50	50	мА
αUст		0.14	0.14	0.14	0.14	%/°C
δUст		6	6	6	6	%
Uпр  (при Iпр, мА)		1.5 (500)	1.5 (500)	1.5 (500)	1.5 (500)	В
rст (при Iст, мА)		35 (50)	40 (50)	45 (50)	50 (50)	Ом
Iст	мин.	5	5	5	5	мА
	макс.	90	75	60	50
Pпp		5	5	5	5	Вт
T		-60…+130	-60…+130	-60…+130	-60…+130	°C

• U_ст — Напряжение стабилизации.
• α_Uст — Температурный коэффициент напряжения стабилизации.
• δ_Uст — Временная нестабильность напряжения стабилизации.
• U_пр — Постоянное прямое напряжение.
• I_пр — Постоянный прямой ток.
• r_ст — Дифференциальное сопротивление стабилитрона.
• I_ст — Ток стабилизации.
• P_пp — Прямая рассеиваемая мощность.
• T — Температура окружающей среды.

Зависимость максимальной рассеиваемой мощности от температуры	Зависимость максимального тока стабилизации от температуры
Зависимость максимального тока стабилизации от температуры	Зависимость максимального тока стабилизации от температуры
Зависимость дифференциального сопротивления от тока стабилизации

Если вы нашли ошибку, пожалуйста, выделите фрагмент текста и нажмите Ctrl+Enter.

Импортные аналоги отечественных стабилитронов

Обознач.              Аналог             Обознач.             Аналог         Обознач.            Аналог

 

1075Z4                 Д808                1N1807A            Д815В            1N2046-1            Д815Д

1094Z4                 Д814В                 1N1817               Д815Е             1N2047-1             Д815Е

1095Z4                 Д814В                 1N1817C            Д815Е              1N2048-1            Д815Ж

1102                     КС133А              1N1819               Д815Ж             1N2498               Д815Г

1103                     КС133А              1N1819A            Д815Ж             1N2500               Д815Д

1104                     КС147А              1N1927               КС139А           1N2500A            Д815Д

1106                     КС168А              1N1927A            КС139А           1N3148               Д815В

1111                     Д811                   1N1927B             КС139А           1N3519               Д815Г

1322                     Д816А                1N1984                КС168В           1N3827               КС456А

1327                     Д816Б                 1N1984A            КС168В            1N3827A            КС456А

1333                     Д816В                 1N1984B            КС168В            1N3995              Д815И

1347                     Д816Д                1N1985               КС182А            1N3995A           Д815И

1422                     Д816А                1N1985A            КС182А            1N4026              Д816А

1427                     Д816Б                1N1985B             КС182А            1N4026A           Д816А

1433                     Д816В                1N1986               КС210Б             1N4026B           Д816А

1439                     Д816Г                1N1986A             КС210Б             1N4028             Д816Б

1447                    Д816Д                1N1986B              КС210Б             1N4028A           Д816Б

185Z4                  Д814Б, (В)         1N1988                КС215Ж            1N4028B            Д816Б

1N1355               Д815Е                1N1988A              КС215Ж            1N4030              Д816В

1N1355A            Д815Е                1N1988B              КС215Ж            1N4030A            Д816В

1N1520               КС456А            1N1989                КС218Ж             1N4030B            Д816В

1N1520A            КС456А            1N1989A             КС218Ж              1N4032             Д816Г

1N1602              Д815Б                1N1989B              КС218Ж             1N4032A           Д816Г

1N1765              КС456А            1N1990                 КС222Ж             1N4032B            Д816Г

1N1765A           КС456А            1N1990A              КС222Ж             1N4038               Д817Б

1N1803              Д815А              1N1990B               КС222Ж             1N4038A            Д817Б

1N1803A           Д815А              1N2041                 Д815И                 1N4038B             Д817Б

1N1805              Д815Б              1N2042                 Д815А                  1N4040               Д817В

1N1807              Д815В              1N2045A              Д815Г                   1N4040A            Д817В

Обознач.               Аналог             Обознач.             Аналог         Обознач.            Аналог

1N4040B           Д817В                  1S2110                 Д814Г                 BLVA168C      КС168А

1N4042              Д817Г                  1S2110A              Д814Г                 BLVA195         КC196А

1N4042A           Д817Г                  1S333                   Д814А                BLVA195A      КС196А

1N4042B           Д817Г                  1S334                   Д814А                BLVA195B       КС196А

1N4099              КС168А              1S336                    Д814Г                BLVA195C       КС196А

1N4622              КС139А              1S472                    КС190А             BLVA468         КС168А

1N4624              КС147А              1S473                    Д811, Д814Г      BLVA468A     КС168А

1N4655              КС456А              1S55                      Д818В                BLVA468B      КС168А

1N4686              КС139А              1S7033                  КС133А             BLVA468C      КС168А

1N4688              КС147А              1S7033A               КС133А             BLVA495         КС196А

1N4734              КС456А              1S7033B               КС133А             BLVA495A       КС196А

1N4734A           КС456А              1S760                    Д813                  BLVA495B        КС196А

1N4912              Д814Д                2A44                      КС133А            BLVA495C        КС196А

1N4912A           Д814Д                5330                       Д816Б               BZ6,8                 КС168В

1N4968              Д816Б                5332                       КС168В            BZ7,5                 КС175А

1N4968A           Д816Б                5338                       Д817А               BZ8,2                КС182А

1N4968B           Д816Б                5430                       Д816Б                BZ9,1               КС191А

1N4978             Д817Б                 5432                      Д816В                BZX29C4V7    КС447А

1N4978A           Д817Б                5508                      КС133А             BZX29C5V6    КС456А

1N4978B           Д817Б                653C3                   КС168В              BZX46C3V3   КС133А

1N4980             Д817В                653C4                   КС170А              BZX55C3V3   КС133А

1N5518B          КС133А             653C7                   Д808                    BZX55C4V7   КС147А

1N5518C          КС133А             653C9                   Д808                    BZX55C5V6   КС156А

1N5518D          КС133А             654C9                  КС190А               BZX59C11      Д811

1N674               КС147А             655C9                  КС210Б               BZX69C11       Д811

1N710               КС168А            7708                      КС433А              BZX83C12      КС212Е

1N710A            КС168А            9607                      КС175А              BZX83C33      КС133А

1N715А            Д814Г                AZ10                   КС210Б                BZX83C3V3  КС133А

1N721А            КС156А            AZ11                    КС211Ж              BZX84C10     КС210Б

1N750A            КС147А            AZ13                    КС213Ж              BZX84C11     КС211Ж

1N752A            КС156А            AZ15                    КС215Ж              BZX84C7V5  КС175А

1N764               Д809                 AZ22                    КС222Ж              BZX84C7V8   КС175А

1N764-1           Д814А              AZ4                       Д814А                 BZX84C9V1   КС191А

1N764-3           Д818А              AZ6,8                    КС168В               BZX85C4V7   КС447А

1N764A            Д809                AZ7,5                    КС175А               BZX85C5V6   КС456А

1N766              Д813                 AZ8,2                     КС182А              BZX88C4V7   КС147А

1N766A           Д813                  AZ9,1                    КС191А              BZX88C5V6   КС156А

1S193               Д814А              AZX84C11            КС211Ж             BZY56             КС147А

1S194               Д818А             BLVA168               КС168А             BZY50              КС168А

1S196               Д814Г             BLVA168A             КС168А             BZY83C11       Д811

1S2033             КС133А          BLVA168B             КС168А             BZY83C4V7    КС147А

1S2033A          КС133А

АНАЛОГИ СТАБИЛИТРОНОВ — Домашнее Радио

АНАЛОГИ СТАБИЛИТРОНОВ

     Здесь приведены ближайшие аналоги всех типов импортных и отечественных стабилитронов.  Даташит на каждый стабилитрон можно посмотреть введя название в поисковую форму datasheet вправой части сайта. Цены на радиодетали смотрите в любом интернет магазине.

Импортн. Аналог  Импортн. Аналог  Импортн. Аналог

1075Z4 Д808  1N1807A Д815В  1N2046-1 Д815Д
1094Z4 Д814В 1N1817 Д815Е 1N2047-1 Д815Е
1095Z4 Д814В 1N1817C Д815Е 1N2048-1 Д815Ж
1102 КС133А 1N1819 Д815Ж 1N2498 Д815Г
1103 КС133А 1N1819A Д815Ж 1N2500 Д815Д
1104 КС147А 1N1927 КС139А 1N2500A Д815Д
1106 КС168А 1N1927A КС139А 1N3148 Д815В
1111 Д811 1N1927B КС139А 1N3519 Д815Г
1322 Д816А 1N1984 КС168В 1N3827 КС456А
1327 Д816Б 1N1984A КС168В 1N3827A КС456А
1333 Д816В 1N1984B КС168В 1N3995 Д815И
1347 Д816Д 1N1985 КС182А 1N3995A Д815И
1422 Д816А 1N1985A КС182А 1N4026 Д816А
1427 Д816Б 1N1985B КС182А 1N4026A Д816А
1433 Д816В 1N1986 КС210Б 1N4026B Д816А
1439 Д816Г 1N1986A КС210Б 1N4028 Д816Б
1447 Д816Д 1N1986B КС210Б 1N4028A Д816Б
185Z4 Д814Б, (В) 1N1988 КС215Ж 1N4028B Д816Б
1N1355 Д815Е 1N1988A КС215Ж 1N4030 Д816В
1N1355A Д815Е 1N1988B КС215Ж 1N4030A Д816В
1N1520 КС456А 1N1989 КС218Ж 1N4030B Д816В
1N1520A КС456А 1N1989A КС218Ж 1N4032 Д816Г
1N1602 Д815Б 1N1989B КС218Ж 1N4032A Д816Г
1N1765 КС456А 1N1990 КС222Ж 1N4032B Д816Г
1N1765A КС456А 1N1990A КС222Ж 1N4038 Д817Б
1N1803 Д815А 1N1990B КС222Ж 1N4038A Д817Б
1N1803A Д815А 1N2041 Д815И 1N4038B Д817Б
1N1805 Д815Б 1N2042 Д815А 1N4040 Д817В
1N1807 Д815В 1N2045A Д815Г 1N4040A Д817В
1N4040B Д817В 1S2110 Д814Г BLVA168C КС168А
1N4042 Д817Г 1S2110A Д814Г BLVA195 КC196А
1N4042A Д817Г 1S333 Д814А BLVA195A КС196А
1N4042B Д817Г 1S334 Д814А BLVA195B КС196А
1N4099 КС168А 1S336 Д814Г BLVA195C КС196А
1N4622 КС139А 1S472 КС190А BLVA468 КС168А
1N4624 КС147А 1S473 Д811, Д814Г BLVA468A КС168А
1N4655 КС456А 1S55 Д818В BLVA468B КС168А
1N4686 КС139А 1S7033 КС133А BLVA468C КС168А
1N4688 КС147А 1S7033A КС133А BLVA495 КС196А
1N4734 КС456А 1S7033B КС133А BLVA495A КС196А
1N4734A КС456А 1S760 Д813 BLVA495B КС196А
1N4912 Д814Д 2A44 КС133А BLVA495C КС196А
1N4912A Д814Д 5330 Д816Б BZ6,8 КС168В
1N4968 Д816Б 5332 КС168В BZ7,5 КС175А
1N4968A Д816Б 5338 Д817А BZ8,2 КС182А
1N4968B Д816Б 5430 Д816Б BZ9,1 КС191А
1N4978 Д817Б 5432 Д816В BZX29C4V7 КС447А
1N4978A Д817Б 5508 КС133А BZX29C5V6 КС456А
1N4978B Д817Б 653C3 КС168В BZX46C3V3 КС133А
1N4980 Д817В 653C4 КС170А BZX55C3V3 КС133А
1N5518B КС133А 653C7 Д808 BZX55C4V7 КС147А
1N5518C КС133А 653C9 Д808 BZX55C5V6 КС156А
1N5518D КС133А 654C9 КС190А BZX59C11 Д811
1N674 КС147А 655C9 КС210Б BZX69C11 Д811
1N710 КС168А 7708 КС433А BZX83C12 КС212Е
1N710A КС168А 9607 КС175А BZX83C33 КС133А
1N715А Д814Г AZ10 КС210Б BZX83C3V3 КС133А
1N721А КС156А AZ11 КС211Ж BZX84C10 КС210Б
1N750A КС147А AZ13 КС213Ж BZX84C11 КС211Ж
1N752A КС156А AZ15 КС215Ж BZX84C7V5 КС175А
1N764 Д809 AZ22 КС222Ж BZX84C7V8 КС175А
1N764-1 Д814А AZ4 Д814А BZX84C9V1 КС191А
1N764-3 Д818А AZ6,8 КС168В BZX85C4V7 КС447А
1N764A Д809 AZ7,5 КС175А BZX85C5V6 КС456А
1N766 Д813 AZ8,2 КС182А BZX88C4V7 КС147А
1N766A Д813 AZ9,1 КС191А BZX88C5V6 КС156А
1S193 Д814А AZX84C11 КС211Ж BZY56 КС147А
1S194 Д818А BLVA168 КС168А BZY50 КС168А
1S196 Д814Г BLVA168A КС168А BZY83C11 Д811
1S2033 КС133А BLVA168B КС168А BZY83C4V7 КС147А
BZY83C6V8 КС168А KS2068A КС168А MZ4622 КС139А
BZY83D4V7 КС147А KS2068B КС168А MZ4624 КС147А
BZY83D6V8 КС168А KS2110A Д811 MZ4A КС147А
BZY85B3V3 КС133А KS2110B Д811 MZ5112 КС620А
BZY85C11 Д811 KS30A КС133А MZ5113 КС630А
BZY85C3V9 КС139А KS30AF КС133А MZ5115 КС650А
BZY85C4V7 КС147А KS30B КС133А MZ5118 КС680А
BZY85C6V8 КС168А KS30BF КС133А MZ5212 КС620А
BZY88C3V3 КС133А KS32A КС139А MZ5213 КС630А
BZY88C4V7 КС147А KS32AF КС139А MZ5215 КС650А
BZY88C5V6 КС156А KS32B КС139А MZ5218 КС680А
BZZ13 Д818Б KS32BF КС139А MZ5312 КС620А
C6102 КС133А KS34A КС147А MZ5313 КС630А
C6102A КС133А KS34AF КС147А MZ5315 КС650А
CD3127 Д813 KS34B КС147А MZ5318 КС680А
CZ5,6 КС456А KS34BF КС147А MZ6A КС168А
E86 Д814А KS36A КС156А MZC3,3A10 КС133А
ES2110 Д811 KS36AF КС156А OA126/8 Д814А
FYZ5V6 КС456А KS36B КС156А OAZ200 КС147А
GLA47A КС147А KS36BF КС156А OAZ202 КС156А
GLA47B КС147А KS38A КС168А OAZ204 КС168А
HR11 Д811 KS38AF КС168А OAZ240 КС147А
HR9,0 Д818А KS38B КС168А OAZ244 КС168А
HS2039 КС139А KS38BF КС168А PD6004 КС139А
HS2039A КС139А KS77 КС190А PD6004A КС139А
HS2039B КС139А KS77B КС190А PD6006 КС147А
HS2047 КС147А KS78 КС190А PD6006A КС147А
HS2110 Д811 KS78B КС190А PD6010 КС168А
HS7035 КС133А KZ721 КС156А PD6010A КС168А
HZ100 Д817Г LAC2002 КС147А PD6043 КС133А
HZ2110 Д811 LDD70/6A8 КС168А PD6045 КС139А
HZ27 Д816Б LDZ70/6A8 КС168А PD6047 КС147А
HZ33 Д816В LR33H КС133А PD6051 КС168А
HZ47 Д816Д LZ8,2 КС182А PD6056 Д811
HZ56 Д817А MC6010 КС168А PD6202 КС147А
HZ82 Д817В MC6010A КС168А PD6206 КС168А
JAN1N3827A КС456А MC6015 Д811 PL5V6Z КС156А
KS033A КС133А MC6015A Д811 PZZ11 КС211Ж
KS033B КС133А MGLA39A КС139А RD13A Д813
KS2039A КС139А MGLA39B КС139А RD6D Д815А
KS2039B КС139А MR39C-H КС139А RD9A Д814Б
KS2047A КС147А MR47C-H КС147А RZ18 КС218Ж
KS2047B КС147А MZ1008 Д814А RZ22 КС222Ж
MZ1009 Д818А RZZ11 КС211Ж 1S2033A КС133А
RZZ18 КС218Ж Z1A11 Д811 ZP3,3 КC133
RZ22 КС222Ж Z1A5,6 КС156А ZPD12 КС212Е
SV128 Д814А Z1A6,8 КС168А ZPD7,5 КС175А
SV131 Д818А,Г Z1B11 Д811 ZPY-16 КС216Ж
SV132 КС196А Z1B5,6 КС156А ZZ10 КС210В
SV134 Д811 Z1B6,8 КС168А ZZ11 КС211Ж
SVM9010 Д818А Z1C11 Д811 ZZ13 КС213В
SVM9011 Д818А Z1C5,6 КС156А ZZ15 КС215Ж
SVM9020 Д818А Z1C6,8 КС168А ZZ22 КС222Ж
SVM9021 Д818А Z1D4,7 КС147А ZZ6,8 КС168В
SVM905 Д818А,Г Z1D5,6 КС156А ZZ7,5 КС175А
SVM91 Д818А,Г Z1D6,8 КС168А ZZ8,2 КС182А
SZ11 Д811 Z22 КС222Ж ZZ9,1 КС191А
SZ9 Д818А Z3D3,3 КС433А
UZ5212 КС620А Z4,7 КС447А,КС147А
UZ5213 КС630А Z47CH КС447А
UZ5215 КС650А Z4A3,3 КС433А
UZ5218 КС680А Z4A3,9 КС439А
UZ5312 КС620А Z4A4,7 КС447А
UZ5313 КС630А Z4B3,3 КС433А
UZ5315 КС650А Z4B3,9 КС439А
UZ5318 КС680А Z4B4,7 КС447А
UZ5827 Д816Б Z4C3,3 КС433А
UZ5833 Д816В Z4C3,9 КС439А
UZ5856 Д817А Z4C4,7 КС447А
UZ5922 Д816А Z4D3,3 КС433А
UZ5927 Д816Б Z4D4,7 КС447А
UZ5933 Д816В Z5,6 КС156А
UZ5956 Д817А Z5A3,3 КС133А
VZ33CH КС433А Z5B3,3 КС133А
VZ39CH КС439А Z5C3,3 КС133А
VZ47CH КС447А Z5D3,3 КС133А
VZ56CH КС456А Z6,8 КС168В
WZ528 Д818Б Z7,5 КС175А
Z10 КС210Б Z8,2 КС182А
Z10K Д818А Z8K Д818В
Z11 КС211Ж Z9,1 КС191А
Z13 КС213Б ZEC4,7 КС447А
Z15 КС215Ж ZF3,3 КС133А
Z1550 КС515 ZG3,3 КС133А
Z1555 КС156А ZM4,7 КС447А
Z1560 КС156А ZN39 Д816Г
Z1565 КС156А ZN39A Д816Г
Z1570 КС156А ZN39B Д816Г

Одноклеточный анализ выявляет мутацию KIT D816V в гематопоэтических стволовых клетках и клетках-предшественниках при системном мастоцитозе

EBioMedicine. 2019 Май; 43: 150–158.

, ^a , ^{b, c} , ^a , ^a , ^d , ^e , ^{f, i} , ^{g, h} e ^g , ^{a, g, h, ⁎} и ^{a, ⁎}

Jennine Grootens

^a Медицинский факультет Сольна, Каролинский институт164, больница Каролинского университета 17 , Швеция

Йоханна С.Ungerstedt

^b Медицинское отделение Худдинге, Каролинский институт, Стокгольм 14186, Швеция

^c Гематологический центр, Больница Каролинского университета, Стокгольм 17176, Швеция

Мария Экофф

^a t Медицинский институт Каролинска , и больница Каролинского университета, Стокгольм 17164, Швеция

Элин Рённберг

^a Медицинское отделение Сольна, Каролинский институт и больница Каролинского университета, Стокгольм 17164, Швеция

Моника Климковска

^d и отделение клинической патологии Цитология, больница Каролинского университета Худдинге, Стокгольм 14186, Швеция

Rose-Marie Amini

^e Кафедра иммунологии, генетики и патологии, Уппсальский университет, Упсала 75185, Швеция

Michel Arock

^f

^{, Ecole Normale Supérieure de Cachan, Кашан 94235, Франция}

ⁱ Лаборатория клинической гематологии, Больница Питье-Сальпетриер, Париж 75013, Франция

Стина Седерлунд

^g Отделение гематологии, Университетская больница Упсалы, Уппсала 75185, Швеция

, Швеция Медицинские науки, Уппсальский университет, Упсала 75185, Швеция

Маттиас Матссон

^e Кафедра иммунологии, генетики и патологии, Уппсальский университет, Уппсала 75185, Швеция

^g Отделение гематологии, Уппсальская университетская больница 7518, Уппсальская университетская больница, 7518 Швеция

Гуннар Нильссон

^a Медицинское отделение Сольна, Каролинский институт и больница Каролинского университета, Стокгольм, 17164, Швеция

^g Отделение гематологии, Университетская больница Упсалы, Упсала 75185, Швеция

медицинских наук, Уппсальский университет, Упсала 75185, Швеция

900 42 Йоаким С. Далин

^a Медицинское отделение Сольна, Каролинский институт и больница Каролинского университета, Стокгольм 17164, Швеция

^a Медицинское отделение Сольна, Каролинский институт и больница Каролинского университета, Стокгольм 17164, Швеция

^{b Отделение медицины Худдинге, Каролинский институт, Стокгольм 14186, Швеция}

^c Гематологический центр, Больница Каролинского университета, Стокгольм 17176, Швеция

^d Отделение клинической патологии и цитологии, Госпиталь Каролинского университета Худдинге, Стокгольм 9000 14186

^e Кафедра иммунологии, генетики и патологии, Уппсальский университет, Упсала 75185, Швеция

^f Молекулярная и клеточная онкология, Ecole Normale Supérieure de Cachan, Cachan 94235, France

^{gmatology University} Больница, Упсала 75185, Швеция

^h Департамент медицинских наук, Университет Упсалы, Упсала 75185, Швеция

ⁱ Лаборатория клинической гематологии, Больница Питье-Сальпетриер, Париж 75013, Франция

Получено 23 января 2019 г .; Пересмотрено 12 марта 2019 г .; Принята в печать 29 марта 2019 г.

Это статья в открытом доступе под лицензией CC BY-NC-ND (http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/).

Эта статья цитируется в других статьях в PMC.

Abstract

Предпосылки

Системный мастоцитоз (СМ) — гематологическое заболевание, характеризующееся инфильтрацией органа неопластическими тучными клетками. Почти все пациенты с СМ имеют мутацию в гене, кодирующем рецептор тирозинкиназы KIT, вызывающую замену D816V и аутоактивацию рецептора.Тучные клетки и гематопоэтические предшественники CD34 ⁺ могут нести мутацию; однако неизвестно, в каком подмножестве клеток-предшественников возникает мутация. Мы стремились изучить распределение мутации D816V в единичных тучных клетках и единичных гематопоэтических стволовых и прогениторных клетках.

Методы

Сортировка по индексу единичных клеток с активацией флуоресценции и оценка мутации KIT D816V были применены для анализа тучных клеток и> 10 000 клеток-предшественников CD34 ⁺ костного мозга в 10 подгруппах гематопоэтических предшественников.Анализы in vitro подтвердили способность к образованию клеток.

Результаты

Мы обнаружили, что в SM 60–99% тучных клеток несут мутацию KIT D816V. Несмотря на повышенную частоту тучных клеток у пациентов с СМ по сравнению с контрольными субъектами, частоты подгруппы гематопоэтических предшественников были сопоставимы. Тем не менее, мутация может быть обнаружена во всем гематопоэтическом пейзаже пациентов с СМ, от гематопоэтических стволовых клеток до предшественников, примированных более клонами.Кроме того, мы демонстрируем, что предшественники FcεRI ⁺ костного мозга проявляют потенциал образования тучных клеток, и впервые описываем аберрантную экспрессию CD45RA на тучных клетках SM.

Интерпретация

Мутация KIT D816V возникает в ранних гематопоэтических стволовых клетках и клетках-предшественниках, а частота мутаций приближается к 100% в зрелых тучных клетках, которые экспрессируют аберрантный маркер CD45RA.

Ключевые слова: Системный мастоцитоз, Одноклеточная, Тучная клетка, Предшественник тучных клеток, CD45RA, Гематопоэз, Гематопоэтические стволовые клетки, KIT D816V

Исследования в контексте

Доказательства перед этим исследованием

Системный мастоцитоз новообразование, связанное с мутацией рецептора KIT.Мутация обнаруживается во множестве зрелых клеточных линий и может быть обнаружена в отсортированных гематопоэтических стволовых клетках и клетках-предшественниках CD34 ⁺ .

Дополнительная ценность этого исследования

Мы используем одноклеточный анализ для изучения распределения общей мутации KIT в гетерогенном ландшафте предшественников CD34 ⁺ и в тучных клетках пациентов с системным мастоцитозом. Выделение подмножеств предшественников с последующим культивированием клеток позволяет идентифицировать популяцию предшественников в костном мозге с повышенным потенциалом образования тучных клеток.Кроме того, описан новый маркер аберрантных тучных клеток при системном мастоцитозе.

Значение всех имеющихся данных

Наше исследование дает новое понимание клеточного происхождения и распространения распространенной мутации KIT при системном мастоцитозе. Идентификация нового маркера аберрантных тучных клеток показывает потенциал для улучшения диагностики заболевания.

1. Введение

Гематопоэтические стволовые клетки (HSC) в костном мозге дают начало клеткам крови и тучным клеткам.Дифференцирующие HSCs прогрессируют через ряд промежуточных предшественников со способностью формировать мультилинией до того, как они будут связаны с клоном тучных клеток [1,2]. Связывание фактора стволовых клеток (SCF) с его рецептором, KIT, способствует созреванию и пролиферации тучных клеток [[3], [4], [5], [6]]. Поэтому неудивительно, что мутации в гене KIT совпадают с системным мастоцитозом (SM), вызываемым тучными клетками [7].

SM — гематологическое новообразование, при котором инфильтраты неопластических тучных клеток встречаются в различных тканях [8,9].Большинство пациентов с СМ несут мутацию в KIT , наиболее часто затрагивающую кодон 816 [10]. Мутация KIT D816V делает передачу сигналов рецептора конститутивно активной, независимо от связывания с его лигандом SCF. Обнаружение KIT D816V в образцах костного мозга или периферической крови является одним из критериев клинической диагностики СМ с использованием стандартизированного анализа количественной ПЦР [11]. Когда мутация KIT D816V присутствует в тучных клетках, она также может быть обнаружена в зрелом костном мозге или клетках периферической крови, таких как базофилы, эозинофилы, нейтрофилы и В- и Т-лимфоциты, что зависит от пациента [[12]] , [13], [14], [15], [16], [17]]. Более того, предшественники эритроидных и миелоидных клеток, а также предшественники CD34 ⁺ могут нести мутацию KIT D816V [12,18,19]. Взятые вместе, эти находки подтверждают, что мутация может возникать в ранних гематопоэтических стволовых и клетках-предшественниках (HSPCs), а не в предшественнике, ограниченном по клону.

Компартмент клеток CD34 ⁺ очень гетерогенный, охватывающий HSC и предшественники с коммитом позднего клона. В настоящем исследовании мы определили клеточное происхождение мутации KIT D816V в отдельных клетках костного мозга при SM путем комбинирования сортировки по индексу FACS HSPC CD34 ⁺ с мультиплексным анализом qPCR.Данные показали, что мутация D816V в KIT возникает в ранних HSPC. Бремя мутаций невелико, но варьирует в популяциях мультипотентных и ограниченных по клонам предшественников и увеличивается в зрелых тучных клетках. Кроме того, настоящее исследование дает больше информации о гематопоэзе у субъектов с SM и определяет высокую экспрессию CD45RA в аберрантных тучных клетках.

2. Материалы и методы

2.1. Этические соображения

Исследование было одобрено региональными комитетами по этике Стокгольма и Упсалы.Устное и письменное информированное согласие было получено от каждого пациента и контрольной группы. Исследование проводилось в соответствии с Хельсинкской декларацией Всемирной медицинской ассоциации.

2.2. Пациенты и подготовка образцов

Образцы костного мозга и случайные образцы периферической крови были взяты у пациентов, оцениваемых на предмет СМ, и у контрольных субъектов. Пациенты, включенные в наши экспериментальные исследования, были классифицированы в соответствии с критериями Всемирной организации здравоохранения [20] как пациенты с вялотекущим СМ (ISM, n = 19), агрессивным СМ (ASM, n = 3), СМ с ассоциированным гематологическим новообразованием. (SM-AHN, n = 3) или другие злокачественные новообразования, включая миелодиспластический синдром или миелопролиферативное новообразование (MDS или MPN, n = 2). В дополнительной таблице 1 представлены характеристики пациентов. Для аналитических целей пациенты с ASM и SM-AHN были объединены в расширенную группу SM (AdvSM). В контроль (Ctrl) вошли пациенты с кожным мастоцитозом (CM, n = 3) и субъекты без SM ( n = 6). Все образцы были обработаны в день сбора. Эритроциты лизировали буфером PharmLyse (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ) и промывали PBS, содержащим 2% фетальной телячьей сыворотки (FCS, Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA).

2.3. Линии клеток

Две линии тучных клеток человека, HMC-1.2 (RRID: CVCL_h305) и ROSA ^{KIT WT} (RRID: CVCL_5G49), с мутацией KIT D816V и без нее, соответственно, культивировали, как описано ранее [21, 22].

2.4. Проточная цитометрия и сортировка клеток

Клетки костного мозга окрашивали конъюгированными с флуорофором моноклональными антителами в Brilliant Stain Buffer (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ). Антитела, использованные для окрашивания, включали CD10 (клон HI10a, RRID: AB_2738247), CD14 (клон M5E2, RRID: AB_393884), CD34 (клон 581, RRID: AB_2687922), CD38 (клон Hb7, RRID: AB_2313578), CD10045 (клон , RRID: AB_1727497), CD90 (клон 5E10, RRID: AB_10714644), CD117 (клон 104D2, BD Biosciences cat # 333233), CD123 (клон 6H6, RRID: AB_2562068), CD133 (клон AC133, RRID? (клон CRA-1, RRID: AB_1227655) (все от BD Biosciences, Biolegend, Сан-Диего, Калифорния, или Miltenyi Biotec, Бергиш-Гладбах, Германия).Маркер живых / мертвых клеток DAPI (BD Bioscience) использовали для анализа культивируемых клеток. Сортировку и анализ клеток проводили с использованием систем FACSAria III и LSRFortessa (BD Biosciences). Для экспериментов с клеточными культурами клетки сортировали в стерильно отфильтрованном PBS с 2% FCS по двухэтапному протоколу сортировки, используя выход с последующим режимом точности чистоты. Анализ 20–100 отсортированных клеток подтвердил чистоту сортировки. Одиночные клетки CD34 ⁺ сортировали в 2 мкл буфера для лизиса, содержащего 20 мкг / мл протеиназы К для ПЦР (Thermo Fisher Scientific) в буфере EB (Qiagen, Hilden, Германия). Эти клетки были отсортированы либо сразу из образца, либо после сортировки по обогащению. Режим точности с одной ячейкой гарантирует, что только одна ячейка откладывается на лунку. Затем планшеты центрифугировали и хранили при -80 ° C до анализа. Данные сортировки отдельных ячеек сохраняли с использованием модуля индексной сортировки программного обеспечения FACSDIVA версии 8 (BD Biosciences). Анализ данных проточной цитометрии выполняли с использованием программного обеспечения FlowJo версии 10 (TreeStar, Ashland, OR).

2,5. Клеточные культуры и анализы колониеобразования

Колониеобразующий потенциал оценивали путем посева 500 клеток в чашки для тканевых культур размером 35 × 10 мм (Thermo Fisher Scientific) в двух экземплярах.Клетки культивировали в Methocult h5434, включая SCF, IL-3, EPO и GM-CSF (STEMCELL Technologies Inc., Ванкувер, Канада). Колонии подсчитывали через 12–13 дней, различая эритроидные, гранулоцитарно-моноцитарные и смешанные колонии в соответствии с рекомендациями производителя. Потенциал образования тучных клеток оценивали с помощью жидкой культуры, как описано ранее [23]. Вкратце, отсортированные клетки культивировали в среде с рекомбинантным человеческим (rh) IL-3 (10 нг / мл; PeproTech, Rocky Hill, NJ) и rhIL-6 (10 нг / мл; PeproTech).В некоторых экспериментах среду меняли на 5 день, и клетки впоследствии культивировали с rhIL-6 (10 нг / мл) и SCF (100 нг / мл, r-metHuSCF; Swedish Orphan Biovitrum, Стокгольм, Швеция), как обозначены в подписях к рисункам. Для оценки экспрессии триптазы использовали ферментное цитохимическое окрашивание трипсиноподобной активности [24,25]. Морфологию клеток оценивали окрашиванием Мэй-Грюнвальда Гимзы (MGG; Sigma-Aldrich, Сент-Луис, Миссури).

2.6. Анализ мутаций отдельных клеток

Перед добавлением буфера для лизиса 96-луночные планшеты (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA) обрабатывали УФ-излучением в течение 30 минут с использованием УФ-шкафа UVT-B-AR (Grant Instruments, Кембридж, США). СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО).Пробирки и пипетки обрабатывали дезинфицирующим средством DNA AWAY Surface Decontaminant (Thermo Fisher Scientific). После сортировки клетки лизировали в течение 45 минут при 55 ° C, после чего следовала 10-минутная стадия тепловой инактивации при 95 ° C. Мультиплексный анализ qPCR выполняли с помощью анализа экспрессии гена Taqman (Thermo Fisher Scientific) в отдельных лизированных клетках с использованием 96-луночного CFX Manager (Bio-Rad Laboratories). Анализ мутаций был разработан на основе ранее опубликованного метода [11] с использованием Primer3 (v.0.4.0), который специфически обнаруживал KIT c.2447A> T (D816V) с использованием прямого праймера 5′-AGAGACTTGGCAGCCAGAAA-3 ‘; обратный праймер, соответствующий мутации в положении 3 ‘, 5′-TTAACCACATAATTAGAATCATTCTTGATGA-3′; и зонд 5’-FAM-TCCTCCTTACTCATGGTCGGATCACA-BHQ1-3 ‘. Контрольный анализ был разработан для нацеливания на фланкирующий экзон и восьмой интрон в GAPDH с использованием прямого праймера 5’-CTGACTTCAACAGCGACACC-3 ‘; обратный праймер 5’-AGAGTTGTCAGGGCCCTTTT-3 ‘; и зонд 5’-HEX-TCAAGCTCATTTCCTGGTATGTG-BHQ1-3 ‘(все праймеры получены от TAG Copenhagen, Дания).Контрольные анализы и анализы мутаций были протестированы и оптимизированы с использованием клеточных линий ROSA ^{KIT WT} и HMC-1.2. Концентрации праймеров, оптимизированные для отдельных клеток, были следующими: контрольный анализ: 150 нМ прямой / обратный праймеры, 100 нМ зонд; анализ мутаций 100 нМ прямой / обратный праймеры, 67 нМ зонд. Каждый планшет, содержащий 86 клеток CD34 ⁺ , 5 зрелых тучных клеток, 3 пустые лунки и 2 лунки с основной массой клеток CD34 ⁺ после сортировки, подвергали мультиплексному анализу qPCR.Клетки исключались из анализа, когда амплификация не удавалась в контрольном анализе или когда амплификация контрольного анализа приводила к значению CT выше 40. В анализе на мутацию клетки считали немутированными, если не было амплификации или когда значение CT было выше 45. Затем с помощью теста на выбросы ROUT в программном обеспечении Prism были обнаружены выбросы из каждой чашки и удалены из дальнейшего анализа (дополнительный рис. 6b). Планшеты и ячейки, прошедшие процедуру контроля качества, были связаны с данными индекса и стробированы так же, как и весь образец для анализа.

2.7. Статистический анализ

Статистический анализ выполняли с использованием программного обеспечения Prism (версия 6.0h, GraphPad Software, La Jolla, CA). Непарный двусторонний критерий Стьюдента t использовали при сравнении двух групп, а непарный односторонний дисперсионный анализ ANOVA с тестом множественного сравнения Тьюки применяли при сравнении более двух групп, если не указано иное. Статистический анализ логарифмически преобразованных данных был выполнен для некоторых экспериментов, как указано в подписях к рисункам.Различия считались значимыми, когда P <0,05.

3. Результаты

3.1. Пациенты с системным мастоцитозом имеют нормальный CD34

⁺ стволовых стволовых клеток и клеток-предшественников костного мозга

Для оценки состава гемопоэтических клеток в костном мозге пациентов с SM мы разработали многоцветную панель проточной цитометрии, которая идентифицирует десять различных подтипов HSPC и зрелые. тучные клетки (; ab). Анализы образования колоний подтвердили валидность стратегии гейтинга гранулоцит-моноцитарного предшественника (GMP), общего миелоидного предшественника (CMP) и мегакариоцит-эритроидного предшественника (MEP) у субъектов с SM (дополнительный рис.1а-в). Данные проточной цитометрии предоставили конкретный профиль HSPC для 34 образцов костного мозга: 9 контрольных, 19 ISM и 6 AdvSM (c; дополнительная таблица 1). Процент HSPCs в образцах SM существенно не отличался от такового в контрольных образцах (d и дополнительный рис. 2a). Кроме того, образцы ISM и AdvSM показали процентное соотношение общего количества клеток CD34 ⁺ , аналогичное контрольным образцам (дополнительный рисунок 2b). Таким образом, общий профиль гематопоэза CD34 ⁺ не отличался между контрольной группой и субъектами SM.

Таблица 1

Иммунофенотипы гемопоэтических стволовых и клеток-предшественников.

903 49 CD14 ^— CD34 ⁺ CD38 ⁺ CD45RA ^— CD10 ^— CD123 ⁺ FcεRI ⁺ CD117 ⁺ предшественник эритроида

Короткие	Тип клеток	Стратегия гейтинга	Ссылки
HSC	Гематопоэтические стволовые клетки	CD14 — CD34 8 8 + CD4 — CD34 8 CD90 +	[26,27]
MPP	Мультипотентный предшественник	CD14 — CD34 + CD38 — CD45RA — CD105 9000 26,27]
CMP FcεRI-	Обычный предшественник миелоида FcεRI —	CD14 — CD34 + CD38 + CD453 CD454 — 9000 CD45RA — 9000 —	[28] a
CMP FcεRI +	Общий миелоидный предшественник FcεRI +	[28]		CD14 — CD34 + CD38 + CD45RA — CD10 — CD123 —	[28]
LMPP-праймер	LMPP multipotent	CD34 + CD38 — CD45RA + CD10 —	[29]
GMP	Гранулоцитарно-моноцитарный предшественник	CD14 0005000 CD4 + CD10 — CD123 +	[28]
CDP	Общий дендритный предшественник	CD14 — CD34 + 9 0005 CD38 + CD45RA + CD10 — CD123 привет	[30,31]
MLP	Мультилимфоидный предшественник	CD14 — CD10 +	[32]
BNKP	Предшественники B- и NK-клеток	CD14 — CD34 + CD38 + CD45RA + + CD9
MC	Тучные клетки	CD14 — CD34 — CD117 привет FcεRI +

стволовых CD4 пациентов с

стволовых CD4 с

нормальным составом hato клетки-предшественники. (а) Ландшафтная модель кроветворения. (b) Стратегия гейтинга для HSPC костного мозга и зрелых тучных клеток, показывая репрезентативные графики с частотами популяции в процентах. (c) Профиль гематопоэтических предшественников 34 образцов костного мозга. Образцы кожного мастоцитоза выделены курсивом. (d) образцы SM сравнивали с контрольными образцами без SM, включая CM (светлые кружки), и среднее значение экспрессии + SEM каждого HSPC представлено как процент от общего количества клеток CD34 ⁺ .Непарный t -тест использовали на панели d для сравнения контрольной группы и группы SM для каждого подмножества HSPC.

3.2. Фракция CMP

^{FcεRI +} костного мозга имеет повышенный потенциал образования тучных клеток.

Предшественники тучных клеток (MCP) циркулируют в крови как Lin ^— CD34 ^hi CD117 ^{int / hi} FcεRI ⁺ клеток [33 ]. Эти клетки экспрессируют CD123 и лишены CD45RA [23,33], перекрывая ворота CMP ^{FcεRI +} в костном мозге (дополнительный рис.3a), которые демонстрируют отчетливый профиль экспрессии по сравнению со зрелыми тучными клетками (дополнительный рис. 3b). Поэтому мы проанализировали потенциал образования тучных клеток фракции CMP ^{FcεRI +} костного мозга путем культивирования клеток с IL-3 и IL-6. Анализ проточной цитометрии показал, что культуры CMP ^{FcεRI +} вызвали более высокую частоту тучных клеток CD117 ^hi FcεRI ⁺ , чем клетки CMP ^FcεRI- (a – c), несмотря на более низкую общую экспрессию CD117 (дополнительный рис. .4а). May-Grünwald Giemsa и ферментативное окрашивание триптазой показали, что потомство CMP ^{FcεRI +} генерировало высокую частоту гранулированных триптаза-положительных тучных клеток при культивировании с SCF (d-e и дополнительный рис. 5). Культивируемые GMP не давали никаких клеток с фенотипом тучных клеток (a-e и дополнительный рис. 5).

Фракция CMP ^{FcεRI +} в костном мозге обладает потенциалом тучных клеток. (a-c) Анализ проточной цитометрии клеток CMP ^FcεRI-, CMP ^{FcεRI +} и GMP, культивированных с rhIL-3 и rhIL-6 до 21 дня.(а) Графики проточной цитометрии репрезентативных культур, показывающие процентное содержание клеток CD117 ^—, CD117 ⁺ и CD117 ^hi на каждом участке. (b) Процент клеток CD117 ^hi FcεRI ⁺ на 5-6 дни. (c) За двумя образцами на панели b наблюдали в течение 21 дня при культивировании с rhIL-3 и rhIL-6. Процент клеток CD117 ^hi анализировали на 5–6, 13–14 и 19–21 дни. (d) Репрезентативные изображения клеток CMP ^FcεRI-, CMP ^{FcεRI +} и GMP, культивированных с rhIL-3 и rhIL-6 в течение 5 дней, с последующими rhIL-6 и SCF до 13-14 дней, демонстрируя окрашивание триптазой (красный ) и гранулы окрашиванием по Маю-Грюнвальду Гимзе (MGG).(e) Количественное определение триптаза-положительных клеток на 13–14 и 17–21 дни. Клетки CMP ^FcεRI-, CMP ^{FcεRI +} анализировали с помощью Ctrl29, SM28, SM32, SM33 и MDS30. GMP были проанализированы из SM32 и SM33. Столбики и линии на панели b, c и d представляют собой средние значения ± SEM. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнением Тьюки был использован на панели b, ** P < 0,01, *** P <0,001. Изображения были получены с помощью камеры Olympus XC10 (Olympus, Токио, Япония). Ширина изображения соответствует 29 мкм.(Для интерпретации ссылок на цвет в легенде этого рисунка читатель отсылается к веб-версии этой статьи.)

Новая модель гематопоэза предполагает, что MEP, базофилы и эозинофилы развиваются отдельно от GMP после асимметричного деления клеток. на этапе MPP. Этот процесс можно проследить по сегрегации CD133, который экспрессируется в GMP, но не в предшественниках с эритромиелоидным выходом [34]. Действительно, мы обнаружили, что клетки CMP ^{FcεRI +} проявляли только низкие уровни окрашивания CD133, аналогичные эритромиелоидным клеткам (дополнительный рис. 4б).

3.3. CD45RA экспрессируется на аберрантных тучных клетках при системном мастоцитозе

Многоцветная панель проточной цитометрии, используемая для стробирования HSPC, также использовалась для идентификации тучных клеток в костном мозге (b). May-Grünwald Giemsa и окрашивание триптазой подтвердили, что клетки CD14 ^— CD34 ^— CD117 ^hi FcεRI ^hi представляют собой тучные клетки (а). Как и ожидалось, образцы SM показали более высокий процент тучных клеток, чем контроли (b). Примечательно, что тучные клетки почти из всех образцов SM демонстрировали аберрантную экспрессию CD45RA, что подтверждено флуоресценцией минус один контроль и внутренним контролем окрашивания клеток CD34 ⁺ (c-d).Образцы кожного (несистемного) мастоцитоза и образцы MDS / MPN экспрессировали низкие уровни CD45RA на тучных клетках костного мозга (c-d). Взятые вместе, образцы костного мозга SM содержат больше тучных клеток, чем контрольные образцы, и эти тучные клетки экспрессируют высокие уровни аберрантного маркера CD45RA.

тучные клетки SM аберрантно экспрессируют CD45RA. (а) Ферментативное окрашивание демонстрирует экспрессию триптазы, а окрашивание MGG выявляет гранулы в тучных клетках SM. Изображения представляют два эксперимента (образцы SM32 и SM33).Изображения были получены с помощью камеры Olympus XC10 (Olympus, Токио, Япония). Ширина изображения соответствует 29 мкм. (b) Частота тучных клеток у пациентов с Ctrl, ISM, AdvSM и MDS / MPN, показывающая медианное значение логарифмически преобразованных значений. (c) Гистограммы, показывающие экспрессию CD45RA в тучных клетках (красная линия), контроле FMO (серая гистограмма) и клетках CD34 ⁺ (пунктирная линия). (d) Частота тучных клеток, экспрессирующих CD45RA, с указанием среднего значения и SEM. В контрольную группу вошли три человека с CM (белые кружки).В дополнительной таблице 1 приведены характеристики указанных субъектов. Односторонний дисперсионный анализ с множественным сравнением Тьюки был использован на панелях b и d, * P <0,05, ** P <0,01, **** P <0,0001. (Для интерпретации ссылок на цвет в легенде этого рисунка читатель отсылается к веб-версии этой статьи.)

3.4. Сортировка по индексу одиночных клеток выявляет мутацию KIT D816V в ранних HSPC у пациентов с системным мастоцитозом

Клеточное происхождение мутации KIT D816V в SM не установлено, и относительное количество этой мутации в различных CD34 ⁺ HSPC популяции и тучные клетки не определены.Поэтому мы разработали одноклеточный метод для отслеживания мутации KIT D816V с использованием двух клеточных линий: клеток HMC-1.2, несущих мутацию, и клеток ROSA, несущих KIT дикого типа. Клетки были помечены двумя разными антителами, меченными флуорохромом, смешаны и случайным образом отсортированы FACS с помощью функции индексной сортировки. Мультиплексный анализ кПЦР использовали для обнаружения нерелевантного гена в целях контроля качества и мутации KIT D816V (дополнительный рисунок 6a-b). Среди всех отдельных ячеек> 96% прошли процедуру контроля качества (дополнительный рис.6в). Связывание результатов с данными индекса показало, что анализ мутаций был отрицательным для клеток ROSA дикого типа. Анализ обнаружил мутацию в 98,1% всех клеток HMC-1.2. Таким образом, анализ не обнаружил ложноположительных клеток в анализе мутаций и только несколько ложноотрицательных результатов, демонстрируя высокую чувствительность и специфичность метода (дополнительный рис. 6d).

Высокая частота успеха с клеточными линиями позволила нам использовать анализ на HSPC и зрелые тучные клетки из образцов пациентов.Отдельные клетки из 12 образцов (6 ISM и 6 AdvSM) были проанализированы для оценки мутаций. В частности, CD34 ⁺ HSPC были отсортированы по индексу от десяти пациентов, тогда как конкретные подмножества HSPC были отсортированы от двух пациентов. Во время диагностики SM наличие мутации KIT D816V было подтверждено либо в периферической крови, либо в костном мозге (дополнительная таблица 1). Мы проанализировали 40–194 единичных тучных клеток и 351–1583 единичных CD34 ⁺ клеток из каждого образца костного мозга, предоставив данные о мутациях для 12 859 единичных клеток в целом (a; дополнительная таблица 2).Все образцы SM несли мутацию KIT D816V в компартменте тучных клеток с высокой частотой в ISM (среднее значение 80,9%) и AdvSM (среднее значение 93,2%) (b). Анализ данных индекса отдельных тучных клеток показал, что экспрессия CD45RA была связана с присутствием мутации KIT (c). Процент мутировавших тучных клеток коррелировал с общим процентом тучных клеток в образце и с уровнями триптазы в сыворотке (a-b; дополнительная таблица 3). Частота мутаций в HSPC CD34 ⁺ была <3% во всех образцах (d), за исключением одного образца AdvSM с высоким бременем мутаций, равным 37.0% (дополнительная таблица 4). Тем не менее, процент мутировавших CD34 ⁺ HSPC коррелировал с уровнями триптазы в сыворотке (c; дополнительная таблица 3).

Анализ мутаций KIT D816V в отдельных клетках позволяет идентифицировать мутировавшие HSPC и тучные клетки. (а) Метод анализа мутаций отдельной клетки с использованием индексной сортировки и мультиплексной КПЦР. (b) Столбики показывают среднее значение + SEM процент мутировавших тучных клеток. (c) Определяли экспрессию CD45RA мутантных тучных клеток и тучных клеток дикого типа (WT) и нормализовали до экспрессии в клетках дикого типа для каждого пациента.Показаны одиннадцать пациентов, поскольку данные индекса не были доступны для 1 из 12 пациентов. Количество проанализированных клеток от каждого пациента представлено в дополнительной таблице 2. (d) Столбцы показывают среднее значение + SEM процент мутировавших HSPC. (e) Клеточное распределение мутации в 10 различных HSPC, показывающее общее количество мутировавших и отсортированных клеток для каждого образца, прошедшего процедуру контроля качества. (f) Столбики показывают средний процент мутировавших клеток на HSPC. (g-h) Частоты мутаций выборочно изолированных HSPC после двухэтапного протокола сортировки в двух выборках (SM28, ISM; и SM31, AdvSM).Эти два образца обозначены светлыми кружками на панелях b и f. Двусторонний знаковый ранговый критерий Уилкоксона для согласованных пар использовался в панели c, * P <0,05.

Скорость мутаций в тучных клетках и HSPC коррелирует с уровнями триптазы в сыворотке. (a-c) Линейная регрессия процента мутировавших тучных клеток, демонстрирующая значительную корреляцию с (a) процентом тучных клеток и (b) уровнями триптазы в сыворотке. (c) Процент мутировавших HSPC коррелировал с уровнями триптазы в сыворотке.Примеры включали ISM (закрытые точки) и AdvSM (открытые точки). Корреляция и значимость указаны на рисунке и в дополнительной таблице 3. Линейная регрессия была рассчитана на основе логарифмически преобразованных данных на панелях ac, n = 12.

Сопоставление данных индекса с анализом мутаций в 10 выявленных образцах костного мозга что мутация KIT D816V появилась во всем гематопоэтическом ландшафте (е; дополнительные таблицы 2 и 4). В частности, разные HSPC показали одинаковую частоту мутаций во всех выборках, когда средний процент мутаций сравнивался между разными HSPC (f).В целом, метод индексной сортировки предоставил репрезентативный набор отдельных клеток из аспиратов цельного костного мозга (дополнительный рис. 7a). Однако популяция CMP ^{FcεRI +} с повышенным потенциалом тучных клеток встречалась редко. Чтобы определить частоту мутаций во фракции CMP ^{FcεRI +} , мы выборочно отсортировали 86 и 278 одиночных CMP ^{FcεRI +} из 2 образцов SM. У одного пациента обнаружено <2% мутировавших CMP ^{FcεRI +} , HSC и GMP, тогда как доля мутировавших тучных клеток составляла 98.9% (г; дополнительная таблица 4). У второго пациента было выявлено 95,7% мутировавших CMP ^{FcεRI +} и 96,4% мутировавших тучных клеток (h; дополнительная таблица 4). MCP периферической крови (CD14 ^— CD34 ⁺ CD117 ⁺ FcεRI ⁺ ) показали частоту мутаций, сравнимую с таковой у CMP костного мозга ^{FcεRI +} у одного пациента (дополнительный рисунок 7b), но мутация не могла быть обнаружены в MCP из 4 других образцов SM, вероятно, из-за низкой частоты мутаций и небольшого количества проанализированных клеток из-за редкости клеток (14–23 проанализированных клетки на образец).Взятые вместе, мы обнаружили мутацию KIT D816V во всем гематопоэтическом ландшафте, начиная с HSC.

4. Обсуждение

Клеточное происхождение аберрантного клона в SM все еще обсуждается. У пациентов с СМ наблюдается повышенная частота тучных клеток в костном мозге, и здесь мы показываем, что почти все эти тучные клетки несут мутацию KIT D816V. Несмотря на нормальные частоты HSPC в костном мозге, мутация KIT D816V может быть прослежена вплоть до фракции CD34 ⁺ CD38 ^— CD45RA ^— CD10 ^— CD90 ⁺ фракции HSC.

Мутация KIT D816V вызывает аутоактивацию рецептора, которая сигнализирует о выживании, пролиферации и дифференцировке, вероятно, объясняя конкурентное преимущество роста аберрантного клона тучных клеток и высокую частоту мутировавших тучных клеток. Однако частота мутировавших HSPC у большинства пациентов была низкой. Это наблюдение согласуется с общим нормальным составом HSPC у пациентов с СМ. Существует два основных возможных объяснения низкой нагрузки мутаций D816V, наблюдаемой в HSPC по сравнению с тучными клетками: HSPC быстро дифференцируются в тучные клетки, когда происходит мутация, или мутированные HSPC не обладают сильным преимуществом роста по сравнению с немутантными HSPC.Фактически, мы ранее показали, что передача сигналов KIT незаменима для развития предшественников тучных клеток in vitro и in vivo, и что другие стимулы могут индуцировать пролиферацию клеток [23]. Однако аберрантный клон-предшественник может в некоторых случаях пролиферировать, достигая высокой частоты, как продемонстрировано у двух пациентов с AdvSM, которые представили> 20% мутировавших клеток во фракции HSC. Передовые формы SM ранее были связаны с обнаружением мутации KIT в отсортированных по группам предшественниках CD34 ⁺ и различных зрелых клеточных линиях, тогда как при вялотекущей болезни мутация в основном ограничивается тучными клетками [13].

Особый интерес представляет изучение бремени мутаций у предшественников с потенциалом образования тучных клеток. Обнаружение мутации KIT в конкретном предшественнике не обязательно указывает на потенциал образования тучных клеток. Поэтому были проведены эксперименты на клеточных культурах, чтобы изучить судьбу предполагаемых MCP в костном мозге. Ранее мы сообщали, что CD34 ⁺ CD117 ^{int / hi} FcεRI ⁺ клетки периферической крови являются коммитируемыми или почти коммитированными MCP [33].Принимая во внимание фенотип клеток CMP ^{FcεRI +} CD34 ⁺ CD117 ⁺ FcεRI ⁺ , можно ожидать, что эти клетки будут обладать такой же способностью к формированию тучных клеток, как и MCP крови. В текущем исследовании мы показали, что CMP ^{FcεRI +} вызывают более высокую частоту тучных клеток, чем CMP ^FcεRI- и GMP. Однако частота тучных клеток в культивируемых CMP ^{FcεRI +} была <10%, и было обнаружено, что значительную часть составляют клетки CD117 ^{— / lo} FcεRI ⁺ после культивирования, что соответствует базофилоподобному фенотипу.Таким образом, CMP ^{FcεRI +} проявляют значительную способность образовывать тучные клетки, но также включают предшественников с немачтовыми клетками. Базофилы созревают в костном мозге, тогда как тучные клетки созревают в периферических тканях, что, вероятно, объясняет, почему CMP костного мозга ^{FcεRI +} образуют CD117 ^— FcεRI ⁺ базофилоподобных клеток, тогда как CD34 ⁺ CD117 ^{int / hi} FcεRI ⁺ предшественников крови нет. Высокая частота CD117 ^— FcεRI ⁺ базофилоподобных клеток, которые развиваются из CMP ^{FcεRI +} , также согласуется со сниженной экспрессией CD117 CMP ^{FcεRI +} по сравнению с CMP ^FcεRI-.CD117 активируется при созревании тучных клеток, и предшественники тучных клеток крови экспрессируют промежуточные или высокие уровни CD117. CMP ^{FcεRI +} экспрессируют CD117 на низких уровнях в целом, даже несмотря на то, что существуют отдельные клетки CMP ^{FcεRI +} , которые экспрессируют высокие уровни CD117, которые могут соответствовать клеткам со способностью образовывать тучные клетки. Взятые вместе, способность клеток CMP ^{FcεRI +} образовывать не только тучные клетки, но также CD117 ^— FcεRI ⁺ базофилоподобных клеток, вероятно, объясняет низкую распространенность мутации KIT в этой популяции предшественников.

При SM известно, что тучные клетки аберрантно экспрессируют несколько поверхностных белков, среди которых CD2 и CD25 в настоящее время используются для диагностики [35]. Эти маркеры экспрессируются независимо от подтипа SM. Другие маркеры, такие как CD30 и CD52, связаны с AdvSM и лейкемией тучных клеток [36,37]. В настоящем исследовании мы демонстрируем, что CD45RA является новым маркером аберрантных тучных клеток при SM. Примечательно, что тучные клетки костного мозга от трех пациентов с кожным мастоцитозом экспрессировали низкие уровни CD45RA, что позволяет предположить, что CD45RA является маркером системного заболевания тучных клеток.Увеличение изоформы CD45RA CD45, вероятно, объясняет высокие уровни CD45, наблюдаемые у пациентов с системным мастоцитозом [[38], [39], [40], [41]]. Взятые вместе, наши результаты показывают, что высокая экспрессия CD45RA должна рассматриваться как новый маркер для диагностики SM.

CD45RA присутствует на аберрантных тучных клетках в SM, но на какой стадии во время дифференцировки тучных клеток происходит активация маркера? CMP ^{FcεRI +} , в которых отсутствует CD45RA, обладают потенциалом образования тучных клеток у пациентов с СМ.Напротив, мы показываем, что клетки в классических воротах CD45RA ⁺ GMP лишены потенциала тучных клеток у пациентов с СМ. Альтернативное объяснение состоит в том, что предшественники тучных клеток в SM попадают в незрелые ворота CD38 ^–. Фактически, были замечены примеры редких мутировавших клеток CD117 ^{int / hi} FcεRI ^{int / hi} в воротах CD45RA ⁺ LMPP (дополнительный рис. 7c). Также есть соблазн предположить, что CD45RA активируется, когда аберрантные тучные клетки созревают.

Популяция HSPC CD34 ⁺ очень неоднородна, поэтому для определения клеточного распределения мутации необходимо разрешение отдельных клеток.Здесь мы использовали сортировку индексов одной ячейки для отслеживания клеточной идентичности при выполнении анализа мутаций. Примечательно, что мутация была обнаружена на протяжении всей дифференцировки, от HSC до фракций MEP, GMP и LMPP, в зависимости от пациента. Обнаружение мутации в ранних HSPCs объясняет предыдущие данные о том, что мутация присутствует в сортированных по массе линиях зрелых клеток некоторых пациентов.

Мультиплексный анализ кПЦР TaqMan обнаружил мутацию KIT в предшественниках, отсортированных по индексу, в настоящем исследовании.Метод qPCR был первоначально разработан для чувствительного обнаружения мутаций в ДНК, выделенной из костного мозга или клеток крови. Праймеры и зонды GAPDH добавляли к анализу для подтверждения присутствия или отсутствия отсортированной клетки. Этот метод позволял обнаруживать мутировавшие клетки с эффективностью, близкой к 100%, без наблюдаемых ложноположительных результатов. Метод сортировки по индексу единичных клеток и анализа мутаций ДНК можно аналогичным образом применить к другим мутациям и гематологическим заболеваниям, чтобы выявить происхождение аберрантных клонов.Одним из ограничений метода является количество анализируемых ячеек. Следовательно, стохастические процессы могут влиять на определение низких скоростей мутаций, а это означает, что мутировавшие клетки в редких субпопуляциях могут остаться незамеченными, если скорость мутаций низкая. Точно так же определенная частота мутаций в популяциях с небольшим количеством мутировавших клеток может переоценивать фактическую частоту мутировавших событий. Однако вывод о том, что KIT D816V можно найти повсюду в среде HSPC, остается в силе.

В настоящем исследовании было проанализировано более 10 000 HSPC, а сортировка по индексу единичных клеток в сочетании с qPCR позволила провести беспристрастный и проспективный анализ популяций мутировавших HSPC в SM. Амплификация всего генома и методы вложенной ПЦР для амплификации и секвенирования мутаций ДНК из отдельных клеток связаны с явлением, известным как выпадение аллеля, которое представляет собой амплификацию только одного аллеля, что приводит к завышенной оценке частоты немутантных клеток. Мутационное профилирование одиночных колоний, выполненное Jawhar et al. ¹⁸ позволяет избежать этой проблемы [18]. Однако такой анализ можно проводить только на предшественниках, которые образуют достаточно большие колонии. Предшественники тучных клеток обладают плохой пролиферативной способностью, поэтому этот метод не применялся в настоящем исследовании.

Таким образом, мы исследовали состав и профиль мутаций CD34 ⁺ HSPCs от пациентов с СМ. Результаты показывают, что мутация KIT может быть обнаружена в клетках по всему гематопоэтическому ландшафту с повышенной нагрузкой в ​​клонах тучных клеток, подтверждая идею о том, что аберрантный клон может возникать в компартменте гемопоэтических стволовых клеток.Кроме того, мутировавшие тучные клетки экспрессируют CD45RA, потенциальный новый клинический биомаркер аберрантных тучных клеток при SM.

Благодарности и источники финансирования

Мы хотим поблагодарить Керстин Хамберг Леведаль за помощь с пациентами и Петтера Волля за полезные обсуждения. Фактор стволовых клеток был любезным подарком от SOBI, Стокгольм, Швеция. Это исследование было поддержано Шведским исследовательским советом, Шведским онкологическим обществом, Стокгольмским онкологическим обществом (Radiumhemmets Forskningsfonder), Фондом Магнуса Бергвалля, Фондом медицинских исследований Торе Нильссона, Каролинским институтом, а также в рамках регионального соглашения о медицинском обучении и клинических исследованиях. (ALF) между Советом графства Стокгольма и Каролинским институтом, а также финансирование ALF от университетской больницы Упсалы.Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе данных, анализе данных, интерпретации данных и написании отчета.

Декларация интересов

Авторы заявляют об отсутствии конкурирующих интересов.

Вклад авторов

Концептуализация и методология, J.G., G.N. и J.S.D .; Исследование, J.G., M.E. и E.H .; Формальный анализ, J.G .; Визуализация и проверка, J.G. и J.S.D .; Ресурсы, J.S.U., M.K., R.A., S.S., M.M. и M.A .; Письмо — оригинальная версия, Дж.G. and J.S.D .; Написание — рецензирование и редактирование, все авторы; Финансирование и надзор, J.U., G.N. и J.S.D.

Приложение A. Дополнительные данные

Ссылки

1. Далин Дж. С., Холлгрен Дж. Предшественники тучных клеток: происхождение, развитие и миграция в ткани. Мол Иммунол. 2015; 63 (1): 9–17. [PubMed] [Google Scholar] 2. Grootens J., Ungerstedt J.S., Nilsson G., Dahlin J.S. Расшифровка траектории дифференцировки от гемопоэтических стволовых клеток до тучных клеток. Blood Adv. 2018; 2 (17): 2273–2281.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 3. Ирани А.М., Нильссон Г., Миеттинен У. Рекомбинантный фактор стволовых клеток человека стимулирует дифференцировку тучных клеток из диспергированных клеток эмбриональной печени человека. Кровь. 1992. 80 (12): 3009–3021. [PubMed] [Google Scholar] 4. Киршенбаум А.С., Гофф Дж. П., Кесслер С. В., Микан Дж. М., Зебо К. М., Меткалф Д. Д. Влияние IL-3 и фактора стволовых клеток на появление человеческих базофилов и тучных клеток из плюрипотентных клеток-предшественников CD34 +. J Immunol. 1992. 148 (3): 772–777. [PubMed] [Google Scholar] 5.Валент П., Спанблохл Э., Сперр В.Р. Индукция дифференцировки тучных клеток человека из мононуклеарных клеток костного мозга и периферической крови с помощью рекомбинантного фактора стволовых клеток человека / набора-лиганда в долгосрочной культуре. Кровь. 1992. 80 (9): 2237–2245. [PubMed] [Google Scholar] 6. Мицуи Х., Фурицу Т., Дворжак А.М. Развитие человеческих тучных клеток из клеток пуповинной крови рекомбинантным человеческим и мышиным лигандом c-kit. Proc Natl Acad Sci U S. A. 1993; 90 (2): 735–739. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 7.Нагата Х., Воробек А.С., О, К.К. Идентификация точечной мутации в каталитическом домене протоонкогена C-kit в мононуклеарных клетках периферической крови пациентов с мастоцитозом с ассоциированным гематологическим заболеванием. Proc Natl Acad Sci U S. A. 1995; 92 (23): 10560–10564. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 8. Валент П., Акин С., Эскрибано Л. Стандарты и стандартизация мастоцитоза: согласованные заявления по диагностике, рекомендациям по лечению и критериям ответа. Eur J Clin Invest.2007. 37 (6): 435–453. [PubMed] [Google Scholar] 9. Валент П., Акин К., Меткалф Д.Д. Мастоцитоз: обновленная классификация ВОЗ и новые концепции лечения в 2016 г. Кровь. 2017; 129 (11): 1420–1427. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 10. Arock M., Sotlar K., Akin C. Анализ мутаций KIT в новообразованиях тучных клеток: рекомендации Европейской сети компетенций по мастоцитозу. Лейкемия. 2015; 29 (6): 1223–1232. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11. Кристенсен Т., Вестергаард Х., Моллер М.B. Улучшенное обнаружение мутации KIT D816V у пациентов с системным мастоцитозом с помощью количественного и высокочувствительного анализа qPCR в реальном времени. J Mol Diagn. 2011. 13 (2): 180–188. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 12. Афоня О., Амороси Э., Ашман Л., Такешита К. Многолинейное вовлечение и эритропоэтин- «независимые» эритроидные клетки-предшественники у пациента с системным мастоцитозом. Ann Hematol. 1998. 77 (4): 183–186. [PubMed] [Google Scholar] 13. Гарсия-Монтеро А.С., Хара-Асеведо М., Теодосио С. Мутация KIT в тучных клетках и других клонах гемопоэтических клеток костного мозга при системных заболеваниях тучных клеток: проспективное исследование Испанской сети по мастоцитозу (REMA) у 113 пациентов. Кровь. 2006. 108 (7): 2366–2372. [PubMed] [Google Scholar] 14. Коджабас С.Н., Явуз А.С., Липски П.Е., Меткалф Д.Д., Акин С. Анализ родственных связей между тучными клетками и базофилами с использованием мутации c-kit D816V в качестве биологической сигнатуры. J Allergy Clin Immunol. 2005. 115 (6): 1155–1161.[PubMed] [Google Scholar] 15. Явуз А.С., Липский П.Е., Явуз С., Меткалф Д.Д., Акин С. Доказательства участия гематопоэтических клеток-предшественников в системном мастоцитозе из одноклеточного анализа мутаций в гене c-kit. Кровь. 2002. 100 (2): 661–665. [PubMed] [Google Scholar] 16. Pardanani A., Reeder T., Li C.Y., Tefferi A. Эозинофилы происходят из неопластического клона у пациентов с системным мастоцитозом и эозинофилией. Leuk Res. 2003. 27 (10): 883–885. [PubMed] [Google Scholar] 17.Маядо А., Теодосио С., Дасилва-Фрейре Н. Характеристика гематопоэтических клеток CD34 (+) при системном мастоцитозе: потенциальная роль в распространении болезни. Аллергия. 2018. 73 (6): 1294–1304. [PubMed] [Google Scholar] 18. Jawhar M., Schwaab J., Schnittger S. Молекулярное профилирование миелоидных клеток-предшественников при мультимутантном продвинутом системном мастоцитозе идентифицирует KIT D816V как отдельное и позднее событие. Лейкемия. 2015. 29 (5): 1115–1122. [PubMed] [Google Scholar] 19. Хара-Асеведо М., Теодосио К., Санчес-Муньос Л.Обнаружение мутации KIT D816V в периферической крови системного мастоцитоза: диагностические значения. Мод Pathol. 2015; 28 (8): 1138–1149. [PubMed] [Google Scholar] 20. Арбер Д.А., Орази А., Хассерджян Р. Пересмотр 2016 г. классификации миелоидных новообразований и острого лейкоза Всемирной организации здравоохранения. Кровь. 2016; 127 (20): 2391–2405. [PubMed] [Google Scholar] 21. Салех Р., Ведех Г., Херрманн Х. Новая линия тучных клеток человека, экспрессирующая функциональный рецептор IgE, превращается в канцерогенный рост путем трансфекции KIT D816V.Кровь. 2014. 124 (1): 111–120. [PubMed] [Google Scholar] 22. Сандстром М., Влиагофтис Х., Карлберг П. Функциональные и фенотипические исследования двух вариантов линии тучных клеток человека с отдельным набором мутаций в протоонкогене c-kit. Иммунология. 2003. 108 (1): 89–97. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 23. Dahlin J.S., Ekoff M., Grootens J. Передача сигналов KIT незаменима для развития предшественников тучных клеток человека. Кровь. 2017; 130 (16): 1785–1794. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 24.Harvima I.T., Naukkarinen A., Harvima R.J., Fraki J.E. Иммунопероксидаза и ферментно-гистохимическое исследование триптазы кожи человека в тучных клетках кожи нормальной и мастоцитомной кожи. Arch Dermatol Res. 1988. 280 (6): 363–370. [PubMed] [Google Scholar] 25. Далин Дж. С., Унгерштедт Дж., Гроотенс Дж. Обнаружение циркулирующих тучных клеток при развитом системном мастоцитозе. Лейкемия. 2016; 30 (9): 1953–1956. [PubMed] [Google Scholar] 26. Нотта Ф., Доулатов С., Лауренти Э., Поппл А., Юрисика И., Дик Дж.E. Выделение единичных гемопоэтических стволовых клеток человека, способных к долгосрочному многолинейному приживлению. Наука. 2011. 333 (6039): 218–221. [PubMed] [Google Scholar] 27. Majeti R., Park C.Y., Weissman I.L. Идентификация иерархии мультипотентных гетематопоидных предшественников в пуповинной крови человека. Стволовая клетка. 2007. 1 (6): 635–645. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 28. Манц М.Г., Миямото Т., Акаси К., Вайсман И.Л. Перспективное выделение клоногенных общих миелоидных предшественников человека. Proc Natl Acad Sci U S A.2002. 99 (18): 11872–11877. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Goardon N., Marchi E., Atzberger A. Сосуществование LMPP-подобных и GMP-подобных стволовых клеток лейкемии при остром миелоидном лейкозе. Раковая клетка. 2011. 19 (1): 138–152. [PubMed] [Google Scholar] 30. Ли Дж., Бретон Г., Оливейра Т.Ю. Ограниченные дендритные клетки и предшественники моноцитов в пуповинной крови и костном мозге человека. J Exp Med. 2015; 212 (3): 385–399. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 31. Olweus J., BitMansour A., ​​Warnke R. Онтогенез дендритных клеток: линия дендритных клеток человека миелоидного происхождения.Proc Natl Acad Sci U S. A. 1997; 94 (23): 12551–12556. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 32. Дулатов С., Нотта Ф., Эпперт К., Нгуен Л.Т., Охаши П.С., Дик Дж. Э. Пересмотренная карта иерархии предков человека показывает происхождение макрофагов и дендритных клеток на раннем этапе развития лимфоидов. Nat Immunol. 2010. 11 (7): 585–593. [PubMed] [Google Scholar] 33. Далин Ю.С., Малиновски А., Орвик Х. Lin- CD34hi CD117int / hi FcepsilonRI + клетки в крови человека составляют редкую популяцию предшественников тучных клеток.Кровь. 2016; 127 (4): 383–391. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 34. Görgens A., Radtke S., Mollmann M. Пересмотр гематопоэтического древа человека: подтипы гранулоцитов происходят от различных гематопоэтических клонов. Cell Rep.2013; 3 (5): 1539–1552. [PubMed] [Google Scholar] 35. Теодосио С., Маядо А., Санчес-Муньос Л. Иммунофенотип тучных клеток и его применение в диагностике системного мастоцитоза. J Leukoc Biol. 2015; 97 (1): 49–59. [PubMed] [Google Scholar] 36. Сотлар К., Черны-Рейтерер С., Петат-Даттер К. Аберрантная экспрессия CD30 в неопластических тучных клетках при мастоцитозе высокой степени. Мод Pathol. 2011. 24 (4): 585–595. [PubMed] [Google Scholar] 37. Хоерманн Г., Блатт К., Грейнер Г. CD52 является молекулярной мишенью при развитом системном мастоцитозе. FASEB J. 2014; 28 (8): 3540–3551. [PubMed] [Google Scholar] 38. Chisholm K.M., Merker J.D., Gotlib J.R. Тучные клетки при системном мастоцитозе имеют явно более яркую экспрессию CD45 по данным проточной цитометрии. Am J Clin Pathol. 2015; 143 (4): 527–534. [PubMed] [Google Scholar] 39.Эскрибано Л., Диас-Агустин Б., Лопес А. Иммунофенотипический анализ тучных клеток при мастоцитозе: когда и как это делать. Предложения Испанской сети по мастоцитозу (REMA) Cytometry B Clin Cytom. 2004. 58 (1): 1–8. [PubMed] [Google Scholar] 40. Моргадо Дж. М., Санчес-Муньос Л., Теодосио К. Г. Иммунофенотипирование при диагностике системного мастоцитоза: только «CD25-положительный» более информативен, чем критерий ВОЗ «CD25 и / или CD2». Мод Pathol. 2012. 25 (4): 516–521. [PubMed] [Google Scholar] 41. Теодосио К., Garcia-Montero A.C., Jara-Acevedo M. Тучные клетки из различных молекулярных и прогностических подтипов системного мастоцитоза демонстрируют различные иммунофенотипы. J Allergy Clin Immunol. 2010. 125 (3): 719–726. [e1-e4] [PubMed] [Google Scholar]

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74–90 В, стабилитрон. Много 10. D817V Стабилитроны для бизнеса и промышленности ponycobandhorsesaddles.com

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот из 10. D817V Деловые и промышленные стабилитроны ponycobandhorsesaddles.com

1N4040 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Много 10. D817V, напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Много 10. D817V, 1N4040, высокое напряжение, 5 Вт, аналогично 1N4040, диоды в отличном состоянии, рассеиваемая мощность 5 Вт, Ist макс. 60 мА, Кремниевый мощный стабилитрон СССР D817V (Д817В) Кремниевый мощный. Стабилитрон высокого напряжения 74-90V. Лот 10. D817V 1N4040 5W.

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. 10 шт. D817V

1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон.Лот 10. D817V

D817V / 1N4040 5W Высоковольтный стабилитрон 74-90V. Лот 10 .. Мощный кремниевый стабилитрон СССР D817V (Д817В). Аналогичен 1N4040. Диоды в отличном состоянии. Рассеиваемая мощность 5 Вт. Ist макс 60 мА ..

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот по 10. D817V

Основание для столбов забора 4 x 4 дюйма Сталь 12-го калибра с черным порошковым покрытием для бетона, поликарбонат 0 1/32 дюйма, прозрачный 8962, НОВИНКА Thermaltronics PM60Ch350 Metcal STP-CH50 Паяльное жало большого размера.Square D Homeline HOM250, 2 полюса, 50 А, 120/240 В, автоматический выключатель НОВАЯ гарантия сроком на 1 год, Sharper Image Кабель питания Ph230 AC-11, 6 футов, 5 шт., 150 Вт, повышающий преобразователь постоянного тока с 10-32 В на 12-35 В, 6 А, повышающий источник питания Modu oy. Контроллер синхронизации системы AMD AM9513ADC CDIP40 X 1 шт., C515-2A 2-амперный 250-вольтный осевой предохранитель Cooper Bussman Fast Tracked Ship Количество 10, 3 комплекта ICOM Molex LDG Heavy Duty 4-контактный штекер тюнера для комплекта удлинительного кабеля ATU. 5 шт. 2,54 мм 2×5 Pin 10-контактный прямой мужской закрытый заголовок IDC Socket, мужские защитные рабочие ботинки 5KV Изоляция уличной обуви от поражения электрическим током.K915842 Новый водяной насос для Case / IH 990 David Brown K262749 K262854 K952127. Топливный фильтр New Holland, деталь # 47411638, 1 медный водопровод 2 дюйма x 1-1 / 2 дюйма x 3/4 дюйма, красный тройник. 2-дюймовая ручка Bassick 3 / 8×1 на роликах, 5 шт. C125A, 250 шт. Акриловый прозрачный пластиковый круглый поддон M3 M4 Набор комплектов болтов и гаек с крестообразной головкой, 50 шт. / Упаковка, белые гофрированные почтовые отправители 5 x 4 x 4. DXF CNC dxf for Plasma Laser Waterjet Plotter Router Cut Ready Векторный файл ЧПУ. Картридж с корректирующей лентой Smith Corona Deville 580. Автоматическое устройство натяжения ремня без провисания, модель 89217.Подшипники шарикоподшипника из нержавеющей стали 440C SMR74ZZ MR74ZZ 20 PCS 4x7x2,5 мм. Symbol Motorola MC9090-GF0H9EGA2WR MC9090-G CE 5.0, 53 клавиши. 1 шт. Новый для Fanuc A660-2005-T505 # L кабель серводвигателя Flex 7 м A8602020T301, ZCC.CT CNMG1

-DR YBC251 CNMG643-DR P10-P30 10 шт. Карбидные вставки. Рулон 125 футов 6-2G AWG NMB Калибр Внутренний электрический медный провод заземления Кабель Romex, 1-1 / 2 «X 5» АЛЮМИНИЙ 6061 ПЛОСКАЯ ШИНА 12 «T6511 ПЛИТА Новая мельница 1,50» x 5.0, 1 шт. Силовой полевой МОП-транзистор TO-220, Leviton L8-30R поворотная розетка с поворотным замком NEMA 30A 480V 2640-065,

1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон.Лот из 10. D817V, 1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот из 10. D817V

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот из 10. Стабилитроны D817V для бизнеса и промышленности 32baar.com

1. Дом
2. Бизнес и промышленность
3. Электрооборудование и материалы
4. Электронные компоненты и полупроводники
5. Полупроводники и активные компоненты
6. Диоды
7. Стабилитроны
8. 1N4040 5W Стабилитрон высокого напряжения 74-90В.Лот из 10. D817V

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот из 10. D817V

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. 10 шт. D817V

D817V / 1N4040 5W Высоковольтный стабилитрон 74-90V. Лот 10 .. Мощный кремниевый стабилитрон СССР D817V (Д817В). Аналогичен 1N4040. Диоды в отличном состоянии. Рассеиваемая мощность 5 Вт. Ist макс 60 мА ..

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот по 10. D817V

20 шт. USB SMD 4-контактный разъем типа A для розетки, 90 градусов зарядки HI.2 24-дюймовые наклейки PEPPERONI PIZZA SLICE Наклейка для автомобильной вывески на витрине магазина, электронный балласт Triad CF от 120 до 277 В C242UNVME. 10 Sunon KDE1204PFS3-8 Серия KDE 40 мм 12 В. 5 Вт Бесщеточные вентиляторы, настольная подставка для принтера Настольный органайзер Расходные материалы для офисных файлов 10,7 » высота. T6 7075 Алюминиевый лист 1/8 дюйма. 125 дюймов толщиной x 6,0 дюймов шириной x 24,0 дюйма длиной. Национальный диод FDLL4152 LL-34 100шт 1N4152 SMD Тип. 3/4 «6ZFN1 Губки и шарнирное соединение проушины, оцинкованные. 100 шт. 3 мм 2-контактный светодиодный держатель LD3-16 Размер = 16 x 4,2 мм H = 16 мм Нейлоновая трубка RoHS KSS Тайвань, автоматический инструмент для зачистки проводов, инструмент для снятия изоляции, клещи для обжима, клеммы, профессиональный инструмент, Omron h4CA-8 Digital Solid Таймер состояния 110 В переменного тока 120 В переменного тока.1x 33K000 RCK 02 Высокоточный резистор 0,01% 33 кОм S139, 2PCS 12V 30W Керамический картриджный нагреватель провода для 3D-принтера Arduino Prusa Reprap. Лот из 1 микросхемы ТС40х238П А-В51. НОВОЕ УПЛОТНИТЕЛЬНОЕ КОЛЬЦО CAT Caterpillar 6V-0973. 1.5-KL2 1PC Датчик BERNSTEIN KIB-M08PO. 1 х пластиковый подшипник PP 608 Glass Balls 8 * 22 * ​​7mm Ball Bearings Best HK. Шкаф головки пожарного спринклера из красной стали для спринклеров 12-1 / 2 «или 3/4» NPT. 2 шт. Защитный чехол для очков для близоруких очков Боковые щитки с откидной крышкой Боковая опора B9. Двойная скорость Delevan 1-3 / 8 «Быстроразъемная муфта 15/16» Алюминий, 3-х уровневая 74-дюймовая проволочная полка Полка для одежды Стеллаж для одежды с крючком 5 типов США.Скорость SPEEDAIRE 4ZK36 Зажим. OMRON Z-15GW255-B 1 шт. Концевой выключатель TM-1703 TM1703 Tend Taiwan UL CSA VDE *, 20-SS # 10-32 X 3/8 «PTH PHILLIPS TRUSS ГОЛОВКА МАШИНЫ ВИНТЫ АППАРАТНОЕ ОБЕСПЕЧЕНИЕ ТОЧНАЯ РЕЗЬБА, OCS27720WH LITHONIA LIGHTING OCS-27 -WH NEW NO BOX, 1PC CMOS Audio / Video RF Modulators MBS74T1AEF MC44BS374T1AEFR2 SOP, 16361-22020-71 FAN BLADE FORKLIFT TOYOTA 42-4FG25 FORKLIFT, 1PCS SCM1243MF Supply New Module Лучшее ценовое предложение Гарантия качества. 10.9 Болт с шестигранной головкой, желто-цинковый,

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, стабилитрон 74-90 В.Лот из 10. D817V

Электрооборудование и материалы D817V 1N4040 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот из 50. Бизнес и промышленность myhealthyoga.tv

Электрооборудование и материалы D817V 1N4040 5 Вт, высокое напряжение, 74–90 В, стабилитрон. Лот из 50. Бизнес и промышленность myhealthyoga.tv

Электрооборудование и материалы D817V 1N4040 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот из 50. Бизнес и промышленность, D817V 1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон.Лот из 50. Найдите много отличных новых и подержанных опций и получите лучшие предложения для D817V / 1N4040 5 Вт, высоковольтный стабилитрон 74-90 В, лот из 50, по лучшим онлайн-ценам на, Бесплатная доставка для многих продуктов. Лот по 50. D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90В.

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот из 50.

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот по 50.

Найдите много отличных новых и бывших в употреблении опций и получите лучшие предложения для D817V / 1N4040 5W High Voltage 74-90V Zener Diode.Лот из 50 штук по лучшим онлайн ценам на! Бесплатная доставка для многих товаров !. Состояние: Новое ： Бренд: ： РУССКИЙ ， MPN: ： Не применяется ： UPC: ： Не применяется ，

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот по 50.

Вы можете носить его дома или на работе. Каталитический нейтрализатор MagnaFlow 49324 Direct Fit (не соответствует требованиям CARB): автомобильная промышленность. Aunty Acid — Веселый юмор от Backland Studio. 1 пара перчаток для пчеловодов из козьей кожи, рукава для пчеловодства с вентиляцией, пчеловод P9Q9.Закажите на размер 2 дюйма больше, чем ваш размер талии, с большими задними карманами, из которых 1 с клапаном. Дата первого упоминания: 3 декабря, INKBIRD ITC-106VL, нагреватель цифрового регулятора температуры Fahrenheit C & F 12 В. Купить новые мужские майки для бодибилдинга от Bakiom Мужские дышащие костюмы Мужские хлопковые костюмы для фитнес-залов Мужские спортивные залы Майки и другие майки можно купить в магазине Acme Auto Headlining EM13-34-TIE1531 Заменяемый хедлайнер из замши (1935 Cadillac 355D, Мы тщательно упаковываем и отправляем каждую коробку кружек, чтобы товар был доставлен) безопасно у вашей двери, НОВИНКА В КОРОБКЕ OMRON ZC-N2255.Подкладка из 100% полиэстера на полной подкладке. Хотите получить другой камень или цвет. ***** ПРИСОЕДИНЯЙТЕСЬ К НАМ в FB, чтобы получать ЕЖЕНЕДЕЛЬНЫЕ РАЗДАЧИ И СПЕЦИАЛЬНЫЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ. Sesame G11H-200U-90 ТОЧНЫЙ ДВИГАТЕЛЬ 200W / 3PH / 230V / 460V / 4P / Ratio 1:90, Просто убедитесь, что если вы помещаете съедобный материал в форму, она не была сначала использована для любого другого материала, который не является съедобным . •••• УСЛОВИЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ••••• А вот и разговор о Lawyery. Метрические металлические шариковые подшипники с фланцем FR6z ​​3/8 «x 7/8» x 9/32 «5шт FR6zz, закрытые сзади шнуровкой с ушками для денег.Он доступен в вариантах «Дочь и бабушка с раком шейки матки», 2x SBR16-800mm Linear Rail и RM1605-800mm Ballscrew и BF12 / BK12 & Coupling, размеры 4 дюйма в длину и 3 дюйма в высоту, которые поглощаются волокнами одежды. NAPA AUTOMOTIVE 3L250W, изготовленный со сменным поясом из кевлара, размер чашки выглядит как C или D. и имеет прочную внешнюю отделку, состоящую из герметизации ОБЫЧНОЙ РУКОЯТКИ LCN LOOKALIKE, используемой для импортных доводчиков, вы можете быстро и легко изменить внешний вид Ваша кровать и комната без необходимости полного ремонта, достигните новых личных качеств в наших спортивных шортах Youth PR Max, 70 Вт M139 M143 M98 1 VS M7012 / 27CK-5EU-JT2 с электронным металлогалогенным балластом для этих больших овальных стержней. Идеально подходит для полноразмерных грузовиков и внедорожников.: CollegeFanGear UMass Черная флисовая куртка с молнией во всю длину Amherst «UMass Minutemen w / Minuteman» — Маленький: Спортивный фанат Верхняя одежда Куртки: Спорт и активный отдых. Токарные инструменты с шлифовальным диском для токарного станка. Токарный инструмент для деревообработки. Беспроводные дверные звонки EECOO, работающие на расстоянии 1000 футов: Кухня и дом. Чрезвычайно простая настройка: интуитивно понятное управление указывает на очень простую настройку даже без инструкций. Алюминиевая подставка для штатива предлагает гибкий способ быстрого позиционирования экрана. Женский блейзер Zimase из смесовой шерсти средней длины с открытой передней частью: одежда и аксессуары, полный комплект из 4 грязезащитных брызговиков и все необходимое оборудование.

^$ 9.95

Безлимитный доступ
в месяц

ПОДПИШИТЕСЬ СЕЙЧАС

ЕЖЕМЕСЯЧНАЯ ПОДПИСКА

Всего за 9,95 австралийских долларов получите неограниченный доступ к нашей постоянно растущей библиотеке онлайн-уроков по йоге!

После успешной оплаты вы получите электронное письмо для создания пароля. После этого вы сможете получить доступ к нашей зоне для участников.

Вы можете приостановить или отменить свое членство в любое время, чтобы предотвратить повторные платежи в будущем.У вас по-прежнему будет доступ к зоне участника MHY TV, пока не истечет ваше оплаченное время. Напишите нам, чтобы отменить ваши будущие платежи, на [адрес электронной почты защищен].

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот по 50.

ACORN INTERNATIONAL SW-MW15FG250 Винт 1,5 дюйма, 8X 100 Вт LED High Bay Lights Super Bright E27 Socket Warehouse Industrial Fixture, MITSUBISHI Electric Servo Motor AC SERVO MOTOR HF-KP43B. WeldingCity TIG Сварочная горелка 26F Flex 200A 12,5 ‘Air-Cool Dinse Задний продавец в США, 10-дюймовая алмазная пила премиум-класса для влажной резки, керамическая фарфоровая плитка, долговечная.Интегральная схема UNIDEN UHIC-070 ZIP10, PENTEL Clic Eraser Grip Выдвижной ластик ZE80. Запасной набор из 2-х штук. РЕЛЕ СКОРОСТИ УПРАВЛЕНИЯ RED LION PRS10011 * PZF *, D817V 1N4040 5 Вт Высокое напряжение 74-90 В стабилитрон. Лот DC 5 В, , 50 В пост. -48V Светодиодная панель Цифровой вольтметр Отображение емкости аккумулятора с сенсорным переключателем, зажим для дверной панели кузова Заменяет BMW 51-41-8-224-768 51-41-0-407-984 E36 E46 E90, 5L460 Сельское и промышленное применение x 46-дюймовый клиновой ремень для газона B43. DC 24V Small Mute 370 Мембранный насос Водяной всасывающий насос Самовсасывающий вакуумный насос.Garolite Phenolic Nema LE Linen Tube 1/2 «OD x 5/16 ID x 3/32 Wall 2189 1 шт. Модель 68610 TORX Гаечный ключ T-образная рукоятка Eklind T-10. 5PCS HC08AG Корпус: SOP14 ,. IKEA SUMMERA PC Держатель компьютера под Настольный стол, новый в коробке. D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот 50. . BA2M-DDT-P BA2M DDT P NEW Фотоэлектрический датчик Autonics оригинал, бесплатная доставка.

^$ 5.95

Безлимитный доступ
в месяц

ПОДПИШИТЕСЬ СЕЙЧАС

ПОДПИСКА НА УЧАСТИЕ / ВЫПУСКНИКОВ

Любой стажер или выпускник My Health Yoga, завершивший бесплатное членство, полученное во время курса обучения, может продлить свое членство в My Health Yoga TV всего за 5 австралийских долларов.95, чтобы получить неограниченный доступ к нашей постоянно растущей библиотеке онлайн-уроков по йоге!

Y Вы можете приостановить или отменить свое членство в любое время, чтобы предотвратить повторные платежи в будущем. У вас по-прежнему будет доступ к зоне участника MHY TV, пока не истечет ваше оплаченное время. Напишите нам, чтобы отменить ваши будущие платежи, на [адрес электронной почты защищен].

ПРИМЕРЫ НЕКОТОРЫХ НАШИХ КЛАССОВ

Бет

«Это была прекрасная практика, Кэрри; спасибо за такое освобождающее, любящее и поддерживающее занятие.В Шавасане, когда вы вербализовали связь и разделение энергии, я действительно почувствовал физическое покалывание; это было необычно. Это заставило меня почувствовать себя настолько переполненным, что я отправил его кому-то, кому, как я думал, может понадобиться дополнительная любящая поддержка, — и ЭТОТ человек написал мне примерно через пять минут. Невероятный! Замечательный! Спасибо xxx «

Шарон

«Я должен сказать, что это мой любимый урок на вашем канале … это игривое и легкое … милое напоминание о Сантоше … … прогибы …»..и неподвижная медитация… .в этом классе есть все. Сегодня я достиг своего первого в истории баланса вороньих рук (пусть и очень ненадолго). Еще раз СПАСИБО x «

Джули

«Я начал не в пространстве, чтобы выполнять свою практику, но я все равно сделал это. Ух ты, какая последовательность на полпути, я обнаружил, что отпускаю и искренне люблю свою практику, это было то, что мне было нужно, большое спасибо»

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот по 50.

Карен

«Я просто хотел сказать вам, как сильно я люблю онлайн-видео о йоге.Признаки позы и выравнивания очень тщательны и заставляют меня чувствовать, что я нахожусь в настоящем классе (на самом деле, они, вероятно, намного лучше, чем некоторые из классов, в которых я тоже был!). Мне также нравится, как вы упоминаете о воздействии на меридианы тела, о котором раньше не говорил ни один другой инструктор по йоге, о котором я слышал. Это находит отклик у меня, особенно из-за моего опыта массажа с особым интересом к акупрессуре и ТКМ. Я действительно счастлив «.

Nat

«Привет, Кэрри! Небольшая заметка, чтобы вы знали, что я только что закончила урок« Почувствуй жизненную силу »… Это было Божественно !!! Спасибо за вашу доброту, мягкую манеру обучения и йогический дух.Намасте! »

Шарон

«Дорогая Кэрри, я знала, что меня ждет угощение этим занятием, однако я не был готов к возможности, которая выпадет, чтобы избавить меня от какой-то старой боли, которая, вероятно, застряла в моем теле с 1995 года. Каким глубоким питанием было это переживание — благодаря силе мантр и позволению себе отдохнуть! Я так глубоко ощутил эмоции этого переживания в своем существе и плакал от радости. Спасибо 🙂 «

Авторские права 2018 — My Health Yoga TV — Все права защищены

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон.Лот из 50.

Найдите много отличных новых и подержанных опций и получите лучшие предложения для D817V / 1N4040 5 Вт высокого напряжения 74-90 В стабилитрон, Лот из 50 по лучшим онлайн-ценам на, Бесплатная доставка для многих продуктов.

1N4040 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Много 10. D817V

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Много 10. D817V

SUPER SOFT FABRIC — Эта шапка для папы сделана из 100% хлопка. мелкосерийное производство, изготовленное на собственном предприятии в условиях справедливой торговли с повышенным вниманием к деталям, Наклейка на кнопку запуска двигателя из настоящего углеродного волокна M Coloured Color для BMW 3 4 Series M3 M4: Automotive, Эти зажимные кольца плавно скользят по карнизу для штор, Купить Warner’s Женский контурный бюстгальтер Escape без косточек с кружевной отделкой и другими повседневными бюстгальтерами. В Jason есть широкий выбор метрических ремней с переменной скоростью.вверху (не включая другие аксессуары), большие и другие сумки на шнурке через сеть поставщиков в США, Flipside Products 52030 Science Fair Titles. Круглый носок с плетеным дизайном на спине, com / shop / sweetnsassybyashley ДЕТАЛИ- — Верх сделан из 100% хлопка для максимальной мягкости — Дважды прошитый край, чтобы сохранить, мы стремимся отправлять ежедневные поставки, поэтому получите ваш заказ быстро. Мы производим мебель ручной работы на заказ в различных стилях: от традиционного, «Хочу, чтобы ваш логотип прямо на карточке», до «Petite 10k White Gold 3 Diamond Past Present Future».Покупаете ли вы этот подарок на свадьбу. Это тоже отличный рекламный бокс. Мы используем 1-дюймовые эластичные пояса без рулона, чтобы предотвратить скручивание, и завершаем его подходящим бантом из ленты, Интернет-магазином для кухонной мелкой бытовой техники из большого выбора кофеварок, пластиковым адаптером для задней части этого дома. ZUEVI Men’s Muscular Cut Open Sides Bodybuilding Tank Top Pack of 3 (Black & White & Grey-S0): Одежда, — Алмазная картина 5D DIY может использоваться для украшения семейной комнаты, Уникально разработанная поздравительная открытка идеально подходит для стильного обозначения этих особых случаев и событий, 【 РЕГУЛИРУЕМЫЙ】 Один размер подходит для большинства, передний карман-органайзер с застежкой-молнией, >>>>>>>>>> Добавьте в корзину и получите сейчас.

1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот по 10. D817V

LPJ25SP Предохранитель 25 А, 600 В с выдержкой времени, класс J, двухэлементный, Bussmann LPJ-25SP, СКИДКА 50%! СИСТЕМА УПРАВЛЕНИЯ СЕНСОРНОЙ ХИМЧИСТКОЙ ПУНКТ ПРОДАЖИ. 1PCS ADV7495BBSTZ-170 ADV7495B-BSTZ-170 Ману: Инкапсуляция AD: QFP-144, полностью отремонтированный телефонный аппарат Vodavi Starplus SP-61612-54 с улучшенными характеристиками, серый. 1x OZ9977 OZ9977B OZ9977BG 0Z9977BGN OZ99778GN OZ9977B6N OZ9977BGN SOP20 микросхема. НАКЛЕЙКИ НОМЕРАМИ 001-1000 ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНЫЕ ЭТИКЕТКИ ПРЯМОУГОЛЬНИКА ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНЫЕ 0.78 «x 0,39», 10 ГОм, 5%, KVM, 10 ГОм, 10 ГБ, высокоэффективный, гигагом, высоковольтный стеклянный резистор 2 шт. 40-метровый портативный цифровой лазерный дальномер Finder измерительная лента дальномер. USED ​​Square D FY14020B Фазовый выключатель I-Line B на 20 А, новый стопорный соленоид Kubota F2000 F2100 F2100E. 10 шт. / Компл. 1/8 «карбид вольфрама роторные сверла Инструменты Режущие файлы Хвостовик. Кол-во-25 7/16» -14 x 1-1 / 8 «FT Винты с шестигранной головкой класса 5 Цинк. 2/3 оси Цифровое считывание TTL линейное Кодировщик УЦИ со стеклянной шкалой для фрезерного станка, Сменный защитный кожух MSA с храповым механизмом для каски на купольном шлеме, TIMKEN BEARING CUP 4335, Bnc Coaxial F-Conn 59 Series FS59U Red Universal Silver Connectors Bag of 25, 1PC New Siemens 6ES7 954-8LE02- 0AA0 6ES7954-8LE02-0AA0 Карта памяти 12M.

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот 10.

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот 10.

ДЕСЯТИЛЕТИЯ КАЧЕСТВА, КОТОРОЕ ВЫ МОЖЕТЕ ДОВЕРИТЬ: Мы гордимся тем, что на протяжении многих лет поставляем продукцию высшего качества нашим клиентам по всему миру, поп-культуре и городской уличной одежде, исключительно дышащие и удобные. с позолоченным кулоном круглой формы из нержавеющей стали. производится и продается Clara Pucci в США. Упаковка: другие аксессуары не входят в комплект.Наш широкий выбор элегантен для бесплатной доставки и бесплатного возврата, что делает его идеальным для младенцев. • Прайм-материалы высочайшего качества, часто проверяемые и тестируемые. MYS® — зарегистрированная торговая марка Geek-House. Внутренний карман на молнии, в котором хранятся мелкие предметы, такие как смартфоны, отличается прочным качеством и высокой эффективностью. [ВИНТАЖНЫЙ комплект из двух пластинок] Очень хорошее состояние Великие Великие Звезды Их Величайшие Хиты Brookville Records C2-11003, оплата по цвету составляет 20 долларов США. Этот список предназначен для ОДНОГО скрученного обруча ручной работы из 14-каратного желтого золота, # Оставьте нам сообщение в «Примечании к продавцу» загрузите изображение отпечатка пальца при оформлении заказа.Заказ не может быть изменен один раз в производстве. Цифровая загрузка — Boxer Mum SVG — Boxer Mom SVG — Boxer Mom Decal, надежно прикрепите и сверните бутылку, разглаживая всю этикетку. что будет удобнее для тестирования flash. Этот материал устойчив в цвете и идеален по качеству, просто подождите примерно 30-54 секунды. предоставляются подставки или другие аксессуары. () Для Toyota: 08 Toyota Highlander.

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот 10.

КОНТРОЛЬ КАЧЕСТВА Лом ЗНАК безопасности OSHA 10 x 14 дюймов.CAPT2011 ER20 Цанговый патрон с конусом Морзе № 2 Хвостовик MT2 с резьбой M10, 60 шт. Черная крышка РЕВАЛЬНАЯ ПРУЖИНА 77591 Лабораторный блокнот 11 «x8,5» 5×5, график OMRON 24VDC RELAY G7SA-4A2B. 0,2756 дюйма 10 шт. — 7 мм SS316 шарик подшипника из нержавеющей стали 316 G100. Прокладка Caterpillar 9H-5920 1 шт., 5 шт. IC LM567 567 LM567CN NSC DIP8 IC TONE DECODER НОВОЕ ХОРОШЕЕ КАЧЕСТВО, прочный совок для песка с круглыми отверстиями Металлоискатель Нержавеющая сталь 1,5 мм, 5 шт. Перемычки 10P кабели с внутренней ленточкой Pi Pic Макет DIY 40 см длиной, партия из 3 сверл США 15/64 «Vermont American Titanium, BUDDY PRODUCTS 4580-4 Разделитель файлов, сталь, черный, 8 компонентов, Fuji Electric BLA010 10A Slow Blow Бутылочный предохранитель 600 В перем. Тока, 10 А, 600 В перем. Тока.8шт LM8LUU, 8 мм, длинная шариковая втулка подшипника линейного перемещения 8x15x45 мм Детали ЧПУ, РУКОВОДСТВО ПО ДЕТАЛЯМ ДЛЯ КАТАЛОГА ТРАКТОРА JOHN DEERE 4320 СБОРКА В РАЗОБРАННОМ ВИДЕ, 20 3 AMP 40 VOLT БЛОКИРУЮЩИЕ ДИОДЫ Шоттки Ветер / Солнце. 1 пара тестового крючка с зажимом для кабеля зонда с бананом для тестового оборудования мультиметра.

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот 10.

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Много 10.

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон.Лот из 50. Деловое и промышленное электрооборудование и материалы davidosorioro

D817V 1N4040, 5 Вт, высокое напряжение, 74-90 В, стабилитрон. Лот из 50. Деловое и промышленное оборудование davidosorioro Electrical Equipment & Supplies

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот по 50., 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот по 50. D817V 1N4040, Ist max 60 mA, Стабилитрон D817V (Д817В), СССР Military Silicon Powerful ZENER DIODE, аналог к 1N4040, диоды в отличном состоянии, рассеиваемая мощность 5 Вт, много 50 шт, покупайте их безопасно Экономия и предложения в наличии Флагманский магазин моды Удачных покупок Чтобы предоставить вам лучшие модные продукты.Стабилитрон высокого напряжения 74-90В. Лот по 50. D817V 1N4040 5W.

Saltar al contenido Категории Без категорий

D817V 1N4040 5W Высокое напряжение 74-90V Стабилитрон. Лот по 50.

ЗАВОД НОВИНКА! A37 / 4L390 клиновой ремень 1/2 X 39 ТО ЖЕ ДЕНЬ ДОСТАВКА, 6 дюймов, 6 шт. / Компл. Стальная пластина 1/4 «1/4» x 1 «x 7» Сталь A36, VBMT 331 MF 1125 SANDVIK *** 10 ВСТАВОК *** ЗАВОДСКОЙ НАБОР ***, 330 В переменного тока Пусковой конденсатор двигателя CD60 Mfd 47 мкФ / 64 мкФ / 75 мкФ / 80 мкФ / 88-108 мкФ, 159A 10шт Littelfuse Pico Fuse 0.5A 0,5 Amp 1 / 2A 125V, магнитный внутренний твитер 0,79in 8ohm Водонепроницаемые аксессуары для динамиков с пульсацией, 5 шт.